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猪囊尾蚴单克隆抗体的制备及其识别多肽表位的鉴定

致谢第1-8页
前言第8-12页
 1.猪带绦虫的起源第8页
 2.猪带绦虫及其幼虫(囊尾蚴)的研究历史第8-9页
 3.猪带绦虫成虫、幼虫(囊尾蚴)及虫卵第9-10页
 4.猪带绦虫生活史第10-11页
 5.流行病学第11-12页
文献综述一、猪带绦虫基因组学研究进展第12-13页
文献综述二、猪带绦虫幼虫的致病、免疫逃避机制及囊尾蚴病的免疫学诊断方法研究进展第13-17页
 1.病原的入侵及致病机制第13-14页
 2.病原体的免疫逃避机制第14-15页
   ·物理屏障第14页
   ·合成并分泌可干扰宿主免疫系统的活性物质第14页
   ·改变虫体表面抗原第14-15页
   ·模拟或伪装宿主抗原第15页
 3.囊尾蚴病免疫学诊断方法研究进展第15-17页
   ·胶乳凝集法:第15页
   ·间接血凝法(IHA)第15页
   ·酶联免疫吸附法(ELISA)第15-16页
   ·酶联免疫印渍技术(EITB)第16页
   ·滴金法(DIGFA)第16-17页
综述三、猪囊尾蚴诊断抗原抗原成分研究进展第17-21页
 1、小扁豆凝集素纯化抗原第17-19页
 2、囊液抗原第19页
 3、头节囊壁抗原第19页
 4、排泄分泌抗原第19-21页
摘要第21-22页
实验一、分泌猪囊尾蚴特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立第22-29页
 1、材料与方法第22-26页
   ·材料第22-23页
     ·试验动物第22页
     ·细胞第22页
     ·BALB/C小鼠免疫用抗原第22-23页
     ·主要试剂和仪器第23页
   ·方法第23-26页
     ·免疫抗原的制备与鉴定第23-24页
     ·小鼠的免疫第24页
     ·杂交瘤细胞的建株第24页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选、克隆与单克隆抗体的制备第24-25页
     ·分泌单抗的免疫学特性检测第25-26页
 2.结果第26-28页
   ·猪囊尾蚴囊液蛋白SDS-PAGE鉴定结果第26页
   ·猪囊尾蚴囊液纯化蛋白免疫反应性Dot-ELISA鉴定结果第26页
   ·免疫BALB/c小鼠血清效价第26-27页
   ·杂交瘤细胞培养上清和小鼠腹水单抗效价第27页
   ·单抗交叉反应性间接ELISA鉴定结果第27页
   ·单抗与猪囊尾蚴各部分结构抗原反应性Dot-ELISA鉴定结果第27页
   ·单抗与猪囊尾蚴囊液的Western-blot试验结果第27-28页
   ·单抗与猪囊尾蚴囊液各纯化蛋白反应性Dot-ELISA鉴定结果第28页
 3.讨论第28-29页
实验二、猪囊尾蚴单克隆抗体TSCF-16_1 1H12B8识别抗原表位的鉴定第29-35页
 1.材料与方法第29-31页
   ·材料第29-30页
     ·单抗(McAb)第29页
     ·猪囊尾蚴囊液(TSCF)第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·主要试剂第30页
   ·方法第30-31页
     ·Western-blot对McAb TSCF-18_1 1H12B8识别囊液抗原成分的鉴定第30页
     ·多肽的设计与合成第30-31页
     ·多肽与蛋白载体的连接第31页
     ·Dot-ELISA法鉴定多肽表位及表位中关键氨基酸第31页
 2.结果第31-34页
   ·McAb TSCF-18_1 1H12B8与TSCF的Western-blot结果第31-32页
   ·合成肽及其McAb TSCF-18_1 1H12B8识别肽表位鉴定结果第32-34页
     ·猪囊尾蚴TsM18KDa var1蛋白质公开序列及首批合成肽和鉴定结果:第32-33页
     ·McAb TSCF-18_1 1H12B8识别多肽表位的N-末端和C—末端氨基酸鉴定结果第33-34页
   ·McAb TSCF-18_1 1H12B8识别多肽表位中关键氨基酸的鉴定结果第34页
 4.讨论第34-35页
实验三、猪囊尾蚴特异性单抗介导夹心ELISA方法的建立第35-42页
 1.材料与方法第35-39页
   ·材料第35-36页
     ·检测样品第35页
     ·主要仪器第35页
     ·试剂和试液第35-36页
   ·方法第36-39页
     ·方法所用肉样的预处理第36页
     ·夹心ELISA方法的特异性测定第36-37页
     ·夹心ELISA方法的灵敏度测定第37-38页
     ·夹心ELISA方法对囊虫病猪不同部位肉样的检测第38-39页
 2.结果第39-41页
   ·McAbTSCF-10_1 2G5B5介导夹心ELISA方法的特异性和灵敏性第39页
   ·McAbTSCF-10_1 2G5B5介导夹心ELISA用于囊虫病猪不同部位肉样的检测结果第39-40页
   ·McAbTSCF-10_1 2G5B5介导夹心ELISA对囊虫病血清循环抗原的检测结果第40-41页
 3.讨论第41-42页
实验四、猪囊尾蚴8KD蛋白家族特异性表位在囊尾蚴病血清抗体诊断中应用价值的探讨第42-47页
 1.材料与方法第42-44页
   ·材料第42页
     ·猪囊尾蚴8KD蛋白家族特异性表位第42页
     ·检测样品第42页
     ·主要仪器及试剂第42页
   ·方法第42-44页
     ·多肽表位与载体的连接第42页
     ·多肽表位与囊尾蚴病人血清抗体的反应性第42-43页
     ·多肽表位与囊尾蚴病猪血清抗体的反应性第43-44页
 2.结果第44-47页
   ·囊尾蚴病人血清和脑脊髓液与多肽表位的间接ELISA鉴定结果第44-45页
   ·囊尾蚴病猪血清与多肽表位的间接ELISA鉴定结果第45-47页
Abstract第47-49页
参考文献第49-54页

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