| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 引言 | 第11页 |
| 2 脂肪组织概述 | 第11-12页 |
| 3 脂肪细胞发生的研究进展 | 第12-16页 |
| ·体内脂肪细胞的发生 | 第12页 |
| ·体外脂肪细胞的发生 | 第12-16页 |
| ·体外脂肪细胞的增殖分化 | 第12-13页 |
| ·体外脂肪细胞分化的分子调控 | 第13-16页 |
| 4 脂肪细胞功能的研究进展 | 第16-21页 |
| ·脂肪细胞的脂质合成及分子调控 | 第16-18页 |
| ·动物的脂质合成 | 第16-17页 |
| ·脂肪细胞脂质合成及分子调控 | 第17-18页 |
| ·脂肪细胞脂质水解及分子调控 | 第18-20页 |
| ·脂肪细胞的内分泌功能 | 第20-21页 |
| 5 猪脂肪细胞体外培养的研究进展 | 第21-23页 |
| 第二章 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第三章 猪前脂肪细胞的分离培养及其鉴定 | 第25-33页 |
| 1 材料和方法 | 第25-29页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·试验仪器、设备和器皿： | 第25-27页 |
| ·主要器械的准备 | 第26页 |
| ·金属器械的清洗和消毒 | 第26页 |
| ·橡胶和塑料用品的清洗和消毒 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·胎牛血清的制备 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·猪皮下前脂肪细胞的分离 | 第28页 |
| ·猪前脂肪细胞的原代培养 | 第28-29页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第29页 |
| ·油红O染色 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-30页 |
| ·细胞形态和特征 | 第29页 |
| ·细胞生长曲线 | 第29页 |
| ·细胞的染色结果 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-33页 |
| ·关于取样 | 第30-31页 |
| ·关于无菌操作和细胞的分离 | 第31页 |
| ·关于前脂肪细胞的培养模式 | 第31-32页 |
| ·关于细胞生长曲线 | 第32页 |
| ·关于油红O染色 | 第32-33页 |
| 第四章 猪SMAF1和ATGL基因的组织表达规律 | 第33-49页 |
| 1 材料和方法 | 第33-35页 |
| ·试验动物组织样 | 第33页 |
| ·主要药品及试剂 | 第33页 |
| ·缓冲液及常用试剂的配制 | 第33-34页 |
| ·主要仪器和设备 | 第34-35页 |
| 2 试验方法 | 第35-40页 |
| ·基因克隆 | 第35-39页 |
| ·用RNeasy Lipid Tissue Mini Kit提取猪脂肪组织总RNA | 第35页 |
| ·Trizol法提取猪脂肪组织以外组织的总RNA | 第35-36页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR反应 | 第37页 |
| ·RT-PCR扩增产物的检测 | 第37页 |
| ·RT-PCR产物的回收、纯化及克隆测序 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR产物的回收、纯化 | 第37-38页 |
| ·载体连接 | 第38页 |
| ·感受态细胞的制备和连接产物转化DH5a | 第38-39页 |
| ·连接产物的转化 | 第39页 |
| ·阳性克隆子鉴定及测序 | 第39页 |
| ·生物信息学分析及相应软件 | 第39页 |
| ·猪SMAF1和ATGL基因组织表达规律 | 第39-40页 |
| 3.结果和分析 | 第40-45页 |
| ·猪SMAF1基因的克隆及序列分析 | 第40-42页 |
| ·总RNA的提取及反转录 | 第40页 |
| ·猪SMAF1基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·猪SMAF1基因cDNA序列分析结果 | 第41-42页 |
| ·猪SMAF1基因的组织表达规律 | 第42-44页 |
| ·猪各组织总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·猪SMAF1基因在瘦肉型猪和脂肪型猪脂肪组织中的表达差异 | 第43-44页 |
| ·猪SMAF1基因的组织表达谱 | 第44页 |
| ·猪ATGL基因的组织表达规律 | 第44-45页 |
| ·猪ATGL基因在瘦肉型猪和脂肪型猪脂肪组织中的表达差异 | 第44-45页 |
| ·猪ATGL基因的组织表达谱 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| ·关于猪SMAF1基因的克隆 | 第45-47页 |
| ·关于半定量RT-PCR | 第47页 |
| ·关于猪SMAF1、ATGL基因的组织表达规律 | 第47-49页 |
| 第五章 小结 | 第49-50页 |
| 1 本研究获得的结果 | 第49页 |
| 2 本研究的创新点 | 第49页 |
| 3 本研究的不足之处及下一步值得研究的工作 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
