| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 综述 | 第10-16页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·ghrelin结构 | 第10-12页 |
| ·ghrelin功能 | 第12-14页 |
| ·ghrelin在免疫系统的生理功能 | 第12页 |
| ·ghrelin的促GH释放活性 | 第12页 |
| ·ghrelin的抗心力衰竭作用 | 第12-13页 |
| ·ghrelin促脂肪生成 | 第13-14页 |
| ·motilin结构和功能 | 第14-16页 |
| 2.研究目的和意义 | 第16-18页 |
| ·motilin和ghrelin生物学特性的研究 | 第16页 |
| ·IBRS2细胞ghrelin的转录调控研究 | 第16-18页 |
| 3.材料与方法 | 第18-31页 |
| ·材料 | 第18-21页 |
| ·组织样 | 第18页 |
| ·IBRS2细胞cDNA样 | 第18页 |
| ·试剂和载体 | 第18-19页 |
| ·DNA样品 | 第19页 |
| ·辐射杂种板(RH) | 第19页 |
| ·细胞和菌株 | 第19-20页 |
| ·引物设计与合成 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·主要分了生物学软件 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-31页 |
| ·总RSA提取和cDNA制备 | 第21-24页 |
| ·组织RNA提取 | 第21-23页 |
| ·药物处理IBRS2细胞 | 第23页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第23页 |
| ·RT-PCR | 第23-24页 |
| ·梅山猪motilin和ghrelin基因的克隆 | 第24页 |
| ·外源片段回收,连接和转化 | 第24-26页 |
| ·用DNA回收试剂盒回收DNA片断 | 第24页 |
| ·DNA特异片断连接载体 | 第24-25页 |
| ·感受态细胞制备及转化 | 第25-26页 |
| ·梅山猪ghrelin和motilin基因组序列的分离和分析 | 第26页 |
| ·PCR扩增 | 第26页 |
| ·梅山猪ghrelin和motilin基因组序列的分析 | 第26页 |
| ·猪motilin和ghrelin基因的染色体定位 | 第26-27页 |
| ·定位引物的设计 | 第26页 |
| ·PCR扩增分型方法 | 第26页 |
| ·数据分析方法 | 第26-27页 |
| ·质粒的检测与测序 | 第27页 |
| ·质粒的抽提 | 第27页 |
| ·连接质粒的PCR检测与测序 | 第27页 |
| ·表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·pEGFP-Express-N1和pDsRed-Express-N1表达载体 | 第27-29页 |
| ·pDsRed-motilin载体和pEGFP-ghrelin载体的构建 | 第29页 |
| ·质粒的提取和转染 | 第29-31页 |
| ·质粒的大量抽提： | 第29-30页 |
| ·转染 | 第30-31页 |
| ·半定量RT-PCR | 第31页 |
| 4 结果 | 第31-44页 |
| ·猪胃组织总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·Motilin和Ghrelin基因的克隆和测序 | 第32页 |
| ·Motilin和Ghrelin基因的核苷酸和氨基酸序列分析 | 第32-33页 |
| ·梅山猪Ghrelin和Motilin部分基因组序列的分离 | 第33页 |
| ·Motilin和Ghrelin基因结构分析 | 第33-34页 |
| ·梅山猪Motilin和Ghrelin基因的染色体定位 | 第34-35页 |
| ·梅山猪motilin和ghrelin基因的组织表达谱分析 | 第35-37页 |
| ·真核载体的构建及其融合蛋白的体外表达 | 第37-39页 |
| ·真核载体的构建 | 第37页 |
| ·融合蛋白的体外表达 | 第37-39页 |
| ·Ghrelin基因转录水平的激素应答调控 | 第39-44页 |
| ·葡萄糖下调ghrelin基因的表达 | 第39页 |
| ·胰高血糖素上调ghrelin基因的表达 | 第39-40页 |
| ·胰岛素可抵消ghrelin表达的胰高血糖素促进作用 | 第40-41页 |
| ·胰高血糖素部分抵消胰岛素对Glut4转录的下调作用 | 第41-42页 |
| ·P4上调IBRS2细胞中ghrelin基因表达 | 第42-43页 |
| ·Progestin可改善T对ghrelin基因表达的下调作用 | 第43-44页 |
| 5 讨论 | 第44-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 研究生在读期间论文发表情况 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 声明 | 第60页 |
