| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 简要符号表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-19页 |
| 1. 蛋白质芯片 | 第13-16页 |
| ·技术背景 | 第13页 |
| ·工作原理和分类 | 第13-14页 |
| ·应用 | 第14-16页 |
| ·存在的问题与展望 | 第16页 |
| 2. 自身免疫性疾病及自身抗体的检测现状 | 第16-18页 |
| ·定义、分类和发病机理 | 第16-17页 |
| ·自身抗体的检测技术现状 | 第17页 |
| ·蛋白芯片在自身抗体检测中的应用 | 第17-18页 |
| 3. 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 自身免疫性疾病抗体检测芯片的制备及反应条件的优化 | 第19-56页 |
| 1. 材料与方法 | 第19-37页 |
| ·培养Hep-2 细胞并提取其核蛋白作为核抗原并测蛋白含量 | 第19-22页 |
| ·从原核表达载体pcDNAⅡ中提取dsDNA 作为检测抗dsDNA 的抗原 | 第22-24页 |
| ·固相基片的选择与制备 | 第24-26页 |
| ·不同修饰玻片及点样液的比较 | 第26-30页 |
| ·自身抗体检测微阵列制备条件的正交优化 | 第30-34页 |
| ·自身抗体检测芯片自身抗原浓度和血清稀释度的确定 | 第34-36页 |
| ·自身免疫性疾病抗体检测芯片的制备 | 第36-37页 |
| 2. 实验结果 | 第37-52页 |
| ·核蛋白的提取及蛋白定量: 培养HEP-2 细胞并提取其核蛋白作为核抗原并测蛋白含量 | 第37-38页 |
| ·dsDNA 的提取: | 第38页 |
| ·固相基片及点样液的选择 | 第38-45页 |
| ·自身抗体检测微阵列制备条件的正交优化 | 第45-50页 |
| ·自身抗体检测芯片自身抗原浓度和血清稀释度的确定 | 第50-52页 |
| ·自身免疫性疾病抗体检测芯片的制备 | 第52页 |
| 3. 讨论 | 第52-55页 |
| 4. 结论 | 第55-56页 |
| ·基片和点样液的优化结果 | 第55页 |
| ·通过两次正交试验，得出芯片制备和检测条件的优化结果 | 第55页 |
| ·七种自身抗原点样浓度和血清稀释度的优化结果 | 第55-56页 |
| 第三章 自身免疫性疾病抗体检测芯片的初步应用 | 第56-68页 |
| 1. 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·主要材料与仪器 | 第56页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第56页 |
| ·标本收集 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| 2. 实验结果 | 第58-65页 |
| ·芯片的重复性检测 | 第58-59页 |
| ·芯片的稳定性检测 | 第59-60页 |
| ·运用蛋白芯片检测自身抗体方法的评价 | 第60-65页 |
| 3. 讨论 | 第65-67页 |
| ·重复性检测 | 第65页 |
| ·稳定性检测 | 第65页 |
| ·自身免疫性抗体检测蛋白芯片法与目前采用的检测方法的比较 | 第65-67页 |
| 4. 结论 | 第67-68页 |
| ·蛋白芯片重复性实验表明 | 第67页 |
| ·蛋白芯片稳定性实验证实 | 第67页 |
| ·蛋白芯片与常规方法检测标本结果检出率的比较显示 | 第67页 |
| ·蛋白芯片检测自身抗体的灵敏度和特异度评价显示 | 第67-68页 |
| 全文小结 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 综述 | 第74-79页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
