| 第一章 文献综述 | 第1-30页 |
| 1 瘤胃微生物的主要种类 | 第11页 |
| 2 瘤胃微生物对动物生产和健康的影响 | 第11-14页 |
| 2．1 瘤胃微生物对动物生产的影响 | 第11-13页 |
| 2．2 瘤胃微生物对动物健康的影响 | 第13-14页 |
| 3 瘤胃微生物的定量方法 | 第14-19页 |
| 3．1 传统定量方法 | 第14-15页 |
| 3．2 分子定量方法 | 第15-17页 |
| 3．3 分子定量方法中的靶核酸片段 | 第17页 |
| 3．4 瘤胃微生物评价方法的发展趋势 | 第17-19页 |
| 4 Real Time PCR研究进展 | 第19-22页 |
| 4．1 定量原理 | 第19页 |
| 4．2 荧光标记的种类 | 第19-21页 |
| 4．3 定量方法 | 第21-22页 |
| 4．4 Real Time PCR的应用 | 第22页 |
| 5 反刍动物甲烷生成的机理与调控 | 第22-28页 |
| 5．1 甲烷生成的生物学机理 | 第23-26页 |
| 5．2 甲烷生成的调控 | 第26-28页 |
| 6 研究目的、意义及主要内容 | 第28-30页 |
| 第二章 瘤胃微生物Real Time PCR定量方法的建立 | 第30-95页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-58页 |
| 2．1 材料 | 第30-37页 |
| 2．2 方法 | 第37-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-88页 |
| 3．1 瘤胃微生物总DNA的提取与纯化 | 第58-62页 |
| 3．2 M.formicicum目标片段的克隆测序 | 第62-65页 |
| 3．3 M.formicicum Real time PCR反应条件的优化 | 第65-67页 |
| 3．4 M.formicicum 16S rDNA拷贝数的确定 | 第67-69页 |
| 3．5 M.formicicum 16S rDNA Real Time PCR标准曲线的制作 | 第69-70页 |
| 3．6 样品中M.formicicum的定量 | 第70-72页 |
| 3．7 M.mazei Internal Transcribed Spacer目标片段的克隆测序 | 第72-75页 |
| 3．8 M.mazei Real Time PCR反应体系的建立 | 第75-76页 |
| 3．9 M.mazei标准曲线的制作 | 第76-78页 |
| 3．10 总产甲烷菌的Real time PCR定量方法的建立 | 第78-82页 |
| 3．11 瘤胃Ciliate Protozoa Real time PCR相对定量方法的建立 | 第82-83页 |
| 3．12 瘤胃Butyrivibrio fibrisolven的相对定量方法的建立 | 第83-84页 |
| 3．13 瘤胃Ruminococcus albus的相对定量方法的建立 | 第84-85页 |
| 3．14 瘤胃中产甲烷菌的定量 | 第85-88页 |
| 4 讨论 | 第88-94页 |
| 4．1 瘤胃微生物Real time PCR定量方法的建立 | 第88-92页 |
| 4．2 Real time PCR在瘤胃微生物定量评价中的应用前景 | 第92-94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 第三章 日粮中添加植物油对反刍动物甲烷产量和瘤胃微生物数量的影响 | 第95-113页 |
| 1 前言 | 第95页 |
| 2 材料和方法 | 第95-100页 |
| 2．1 材料 | 第95-97页 |
| 2．2 方法 | 第97-100页 |
| 3 结果与分析 | 第100-108页 |
| 3．1 植物油对甲烷产量的影响 | 第100-101页 |
| 3．2 植物油对M.formicium数量的影响 | 第101-102页 |
| 3．3 植物油对总产甲烷菌数量的影响 | 第102-103页 |
| 3．4 植物油对纤毛虫数量的影响 | 第103-104页 |
| 3．5 植物油对及B.fibrivolen数量的影响 | 第104-105页 |
| 3．6 植物油对R.ablus数量的影响 | 第105-108页 |
| 4 讨论 | 第108-112页 |
| 4．1 日粮中添加植物油对瘤胃中甲烷产量和产甲烷菌的影响 | 第108-109页 |
| 4．2 日粮中添加植物油对瘤胃中Ciliate protozoa数量的影响 | 第109页 |
| 4．3 日粮中添加植物油对瘤胃中B.fibrivolen和R.ablus数量的影响 | 第109-110页 |
| 4．4 反刍动物日粮中添加植物油影响甲烷产量机制的探讨 | 第110-111页 |
| 4．5 人工瘤胃模拟实验的可行性与局限性 | 第111-112页 |
| 5 小结 | 第112-113页 |
| 第四章 论文总体结论、创新点及需进一步研究的问题 | 第113-115页 |
| 1 结论 | 第113页 |
| 2 创新点 | 第113-114页 |
| 3 有待进一步研究的问题 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-126页 |
| 附录1 M. formicicum设计Real Time PCR引物的种内完全保守序列 | 第126页 |
| 附录2 M. formicicum Real Time PCR预计扩增产物的相似性比较 | 第126-127页 |
| 附录3 确定M. formicicum 16S rDNA拷贝数的杂交探针序列 | 第127页 |
| 附录4 M. mazei克隆片段的测序结果 | 第127-128页 |
| 附录5 M. mazei Real Time PCR引物序列的相似性比较 | 第128-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 作者简历 | 第132页 |
