| 第一章 文献综述 | 第1-25页 |
| 1．1 我国棉花纤维品质现状 | 第9-11页 |
| 1．2 棉纤维的发育过程 | 第11页 |
| 1．3 棉纤维发育过程中的内源激素的动态变化 | 第11-13页 |
| 1．4 棉纤维优势表达或特异表达基因的克隆及功能研究 | 第13-16页 |
| 1．5 棉花纤维品质改良的基因工程尝试 | 第16-18页 |
| 1．5．1 对棉花产量及纤维强度的改良 | 第16页 |
| 1．5．2 通过改变棉纤维中激素含量来改良纤维品质的尝试 | 第16页 |
| 1．5．3 利用聚羟基丁酸改良纤维的保温性 | 第16-17页 |
| 1．5．4 利用色素合成酶基因改良棉纤维的色泽 | 第17页 |
| 1．5．5 利用角蛋白基因改良棉纤维强度 | 第17-18页 |
| 1．6 RNAI技术简介 | 第18-20页 |
| 1．7 目的基因：COBRA和BOTERO的研究背景 | 第20-23页 |
| 1．7．1 COBRA的研究背景 | 第20-22页 |
| 1．7．2 BOTERO基因的研究背景 | 第22-23页 |
| 1．8 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-42页 |
| 2．1 材料 | 第25-28页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第25页 |
| 2．1．2 质粒和菌株 | 第25页 |
| 2．1．3 酶和试剂 | 第25页 |
| 2．1．4 培养基 | 第25-27页 |
| 2．1．5 引物合成和序列测定 | 第27-28页 |
| 2．2 方法 | 第28-42页 |
| 2．2．1 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞(用于热击转化) | 第28页 |
| 2．2．2 一步法制备大肠杆菌和农杆菌感受态细胞(用于热击转化) | 第28页 |
| 2．2．3 大肠杆菌的转化(热击法)： | 第28-29页 |
| 2．2．4 CaCl_2法制备农杆菌感受态细胞(用于热击转化)： | 第29页 |
| 2．2．5 农杆菌感受态细胞的转化(热击法)： | 第29页 |
| 2．2．6 碱裂解法小量提取质粒DNA | 第29-30页 |
| 2．2．7 碱裂解法大量提取质粒DNA | 第30页 |
| 2．2．8 冻融法回收目的基因片段(适合于微量DNA回收) | 第30-31页 |
| 2．2．9 棉花DNA的提取(酮试剂法) | 第31页 |
| 2．2．10 棉花DNA的提取(CTAB法) | 第31页 |
| 2．2．11 棉花叶片RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2．2．12 用Gateway方法构建RNAi载体 | 第32-33页 |
| 2．2．13 棉花转基因植株胚珠体外培养和酒精诱导 | 第33-34页 |
| 2．2．14 比色法测定胚珠体外培养后的纤维质量 | 第34页 |
| 2．2．15 一步法RT-PCR | 第34-35页 |
| 2．2．16 基因cDNA全长克隆及5’-RACE和3’-RACE反应 | 第35-40页 |
| 2．2．17 裂殖酵母的转化 | 第40页 |
| 2．2．18 裂殖酵母的诱导表达 | 第40-41页 |
| 2．2．19 对诱导表达后裂殖酵母的进行显微镜观察 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-59页 |
| 3．1 陆地棉GHCOBRA和GHBOTERO基因的RNAI载体构建 | 第42-44页 |
| 3．2 对转基因植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| 3．3 转基因植株的胚珠体外培养和酒精诱导及纤维质量测定 | 第45-47页 |
| 3．3．1 转基因植株的胚珠体外培养和酒精诱导 | 第45-46页 |
| 3．3．2 比色法测定胚珠体外诱导后的纤维总量和数据分析 | 第46-47页 |
| 3．4 陆地棉GHCOBRA的全长CDNA的克隆 | 第47-53页 |
| 3．4．1 RT-PCR方法克隆GhCOBRA的已知片段 | 第47-48页 |
| 3．4．2 克隆GhCOBRA的5’-末端和3’末端 | 第48-49页 |
| 3．4．3 GhCOBRA的序列分析 | 第49-53页 |
| 3．5 GHCOBRA的植物表达载体构建 | 第53-57页 |
| 3．5．1 构建中间载体1：pSK-COB | 第53-54页 |
| 3．5．2 构建中间载体2：pXL | 第54-56页 |
| 3．5．3 植物表达载体pXL-COB的构建 | 第56-57页 |
| 3．6 GHCOBRA的裂殖酵母表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3．7 分析和讨论 | 第58-59页 |
| 结论及创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 个人简历 | 第66页 |
