| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一部分 引言 | 第12-16页 |
| 第二部分 禽(番鸭)呼肠孤病毒株S组基因序列分析 | 第16-46页 |
| 材料与方法 | 第16-22页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| ·病毒 | 第16页 |
| ·非免疫番鸭胚 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·溶液配制 | 第16-17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-22页 |
| ·病毒的增殖及RNA的提取 | 第18页 |
| ·病毒RNA反转录和PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第19页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第19-20页 |
| ·DRV-S组基因节段的序列测定 | 第20-21页 |
| ·DRV-S组基因节段测序结果的联机检索分析 | 第21页 |
| ·DRV-S组基因节段cDNA核苷酸、推导的氨基酸序列的比较及系统发生树的绘制 | 第21-22页 |
| 结果与分析 | 第22-41页 |
| 1 RT-PCR扩增结果 | 第22-23页 |
| ·对YH和YJL的S组基因的RT-PCR扩增结果 | 第22页 |
| ·YH和YJL-S1基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YJL-S2基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YH和YJL-S3基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YJL-S4基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·对YB的S组基因的RT-PCR扩增结果 | 第22-23页 |
| ·YB-S1基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YB-S2基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YB-S3基因的RT-PCR扩增 | 第22页 |
| ·YB-S4基因的RT-PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2 YH、YJL和YB的S组基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23-28页 |
| ·YH和YJL的S组基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23页 |
| ·YH和YJL-S1基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23页 |
| ·YJL-S2基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23页 |
| ·YH和YJL-S3基因的阳性质粒鉴定 | 第23页 |
| ·YJL-S4基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23页 |
| ·YB的S组基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23-28页 |
| ·YB-S1基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23页 |
| ·YB-S2基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第23-24页 |
| ·YB-S3基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第24页 |
| ·YB-S4基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第24-28页 |
| 3 cDNA的序列测定 | 第28-30页 |
| ·YH和YJL的S组基因cDNA的序列测定 | 第28-29页 |
| ·YH、YJL-S1基因的序列测定 | 第28页 |
| ·YJL-S2基因的序列测定 | 第28页 |
| ·YH、YJL-S3基因的序列测定 | 第28-29页 |
| ·YJL-S4基因的序列测定 | 第29页 |
| ·YB的S组基因cDNA的序列测定 | 第29-30页 |
| ·YB-S1基因的序列测定 | 第29页 |
| ·YB-S2基因的序列测定 | 第29页 |
| ·YB-S3基因的序列测定 | 第29页 |
| ·YB-S4基因的序列测定 | 第29-30页 |
| 4 测序结果的联机检索 | 第30页 |
| 5 DRV核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第30-37页 |
| ·编码σA蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第30页 |
| ·编码σNS蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第30-31页 |
| ·编码σB蛋白的基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第31页 |
| ·具有多顺反子基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第31-37页 |
| ·YH、YJL-S1基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第31-32页 |
| ·YB-S4基因核苷酸序列和推导氨基酸序列的比较分析 | 第32-37页 |
| 6 DRV-S组基因系统发生树的建立 | 第37-41页 |
| ·编码σA蛋白的基因系统发生树的建立 | 第37页 |
| ·编码σNS蛋白的基因系统发生树的建立 | 第37页 |
| ·编码σB蛋白的基因系统发生树的建立 | 第37-38页 |
| ·编码σC蛋白的基因系统发生树的建立 | 第38-41页 |
| 讨论 | 第41-46页 |
| 1 YJL、YH-S1和YB-S4基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较 | 第41-43页 |
| 2 YJL-S4和YB-S2基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较 | 第43-44页 |
| 3 YJL-S2和YB-S1基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较 | 第44-45页 |
| 4 YH，YJL和YB-S3基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性比较 | 第45-46页 |
| 第三部分 DRV-YB株的S3与S40RF2基因的原核表达 | 第46-57页 |
| 材料与方法 | 第46-53页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| ·病毒 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·溶液配制 | 第47页 |
| ·引物 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-53页 |
| ·病毒增殖 | 第48页 |
| ·病毒RNA的提取和PCR扩增 | 第48页 |
| ·PCR产物的回收、克隆及鉴定 | 第48页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第48-51页 |
| ·表达产物σB和σC蛋白的生物学活性检测 | 第51-53页 |
| 结果与分析 | 第53-57页 |
| 1 对YB的S3和S40RF2基因RT-PCR扩增结果 | 第53页 |
| ·YB-S40RF2基因的RT-PCR扩增 | 第53页 |
| ·YB-S3基因的RT-PCR扩增 | 第53页 |
| 2 YB的S3和S40RF2基因阳性质粒PCR鉴定 | 第53-54页 |
| ·YB-S40RF2基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第53页 |
| ·YB-S3基因的阳性质粒PCR鉴定 | 第53-54页 |
| 3 表达产物SDS-PAGE分析和Western-blotting分析 | 第54-56页 |
| ·诱导表达蛋白的分析 | 第54-55页 |
| ·表达产物的Western-blotting检测 | 第55-56页 |
| 4 蛋白胶薄层扫描分析重组表达蛋白 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
