| 英文缩写注解 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-15页 |
| 技术路线 | 第15-16页 |
| 中文摘要 | 第16-18页 |
| 英文摘要 | 第18-20页 |
| 第一部分 pcDNA3.1-Angiostatin质粒的扩增、提纯及鉴定 | 第20-37页 |
| 一、引言 | 第20页 |
| 二、材料与方法 | 第20-28页 |
| 三、实验结果 | 第28-30页 |
| 1.质粒pcDNA3.1-angiostatin的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| 2.质粒pcDNA3.1(+)和pEGFP-C2的酶切鉴定 | 第29页 |
| 3.紫外分光光度计测定质粒的纯度和含量 | 第29-30页 |
| 四、讨论 | 第30-33页 |
| 五、结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 第二部分 乳糖化PEI-磁性纳米粒的制备、特性及其与质粒DNA的连接 | 第37-68页 |
| 一、引言 | 第37-39页 |
| 二、乳糖化PEI-Fe_3O_4复合磁性纳米粒制备 | 第39-43页 |
| 三、乳糖化PEI-Fe_3O_4复合磁性纳米粒性能检测 | 第43-47页 |
| 1.纳米粒子的粒径侧定及形态的观察 | 第43页 |
| 2.纳米粒子的磁响应性观察 | 第43页 |
| 3.铁离子浓度的测定 | 第43-44页 |
| 4.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对DNA的结合实验 | 第44页 |
| 5.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对DNA的结合效率测定 | 第44-45页 |
| 6.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对DNA的保护实验 | 第45页 |
| 7.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对细胞的毒性实验 | 第45-46页 |
| 8.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP/DNA在血清中的稳定性观测 | 第46页 |
| 9.巨噬细胞对纳米粒的吞噬实验 | 第46-47页 |
| 四、实验结果 | 第47-59页 |
| 1.纳米粒子的粒径侧定及形态的电子显微镜分析(TEM)检测 | 第47页 |
| 2.磁响应性观测结果 | 第47-50页 |
| 3.铁离子浓度的测定分析 | 第50-51页 |
| 4.PH值对乳糖化PEI-Fe_3O_4NP与DNA结合能力的影响分析 | 第51-52页 |
| 5.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对DNA的结合效率分析 | 第52-53页 |
| 6.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对DNA的保护实验 | 第53-54页 |
| 7.乳糖化PEI-Fe_3O_4NP对细胞的毒性测定 | 第54-56页 |
| 8.血浆内的稳定性 | 第56-57页 |
| 9.巨噬细胞对PEI-Fe_3O_4NP、乳糖化PEI-Fe_3O_4NP的摄入 | 第57-59页 |
| 五、讨论 | 第59-61页 |
| 六、结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 第三部分 乳糖化PEI-磁性纳米粒介导的pcDNA3.1-Angiostatin对人HepG2肝癌细胞的体外转染实验 | 第68-86页 |
| 一、引言 | 第68-69页 |
| 二、材料与方法 | 第69-74页 |
| 三、实验结果 | 第74-80页 |
| 1.载质粒pEGFP-C2乳糖化PEI-磁性纳米粒HepG2细胞转染实验 | 第74-75页 |
| 2.外加磁场对乳糖化PEI-磁性纳米粒转染的影响 | 第75-76页 |
| 3.竞争拮抗实验 | 第76-77页 |
| 4.载pcDNA3.1-angiostatin基因纳米粒转染HepG2细胞后RT-PCR检测结果 | 第77页 |
| 5.RT-PCR产物的测序结果 | 第77-80页 |
| 四、讨论 | 第80-82页 |
| 五、结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 第四部分 纳米粒介导的pcDNA3.1-Angiostatin对人HepG2肝癌细胞的体内转染实验及其对裸鼠肝癌模型治疗的初步观测 | 第86-102页 |
| 一、引言 | 第86-87页 |
| 二、材料与方法 | 第87-90页 |
| 三、实验结果 | 第90-94页 |
| 1.动物模型 | 第90-91页 |
| 2.抑瘤作用的观测结果 | 第91-92页 |
| 3.瘤组织内mANG mRNA表达情况 | 第92页 |
| 4.MVD的测定结果 | 第92-93页 |
| 5.VEGF的测定结果 | 第93页 |
| 6.肿瘤组织细胞凋亡情况 | 第93-94页 |
| 四、讨论 | 第94-97页 |
| 五、结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-102页 |
| 第四部分 附图 | 第102-105页 |
| 总结论 | 第105-106页 |
| 综述部分 | 第106-131页 |
| 一、血管抑素基因对肿瘤治疗的研究进展 | 第106-120页 |
| 参考文献 | 第114-120页 |
| 二、纳米粒基因载体的研究现状与展望 | 第120-131页 |
| 参考文献 | 第126-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第132-134页 |
