| 致谢 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-24页 |
| ABSTRACT | 第24-38页 |
| 英文缩写 | 第38-40页 |
| 第一章 文献综述 | 第40-85页 |
| 参考文献 | 第70-85页 |
| 第二章 功能性抗肺癌单克隆抗体的制备及初步鉴定 | 第85-115页 |
| 1. 前言 | 第85-88页 |
| 2. 材料与方法 | 第88-97页 |
| ·实验材料 | 第88-90页 |
| ·标本 | 第88页 |
| ·细胞系 | 第88页 |
| ·实验动物 | 第88页 |
| ·实验试剂及用品 | 第88-89页 |
| ·主要实验仪器 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-97页 |
| ·细胞培养 | 第90页 |
| ·免疫用人肺癌固定化细胞悬液的制备 | 第90页 |
| ·小鼠的免疫 | 第90-91页 |
| ·细胞融合 | 第91-94页 |
| ·甲基纤维素胶的制备 | 第91页 |
| ·融合用免疫脾细胞悬液的制备 | 第91-92页 |
| ·融合用骨髓瘤细胞的准备 | 第92页 |
| ·融合 | 第92-93页 |
| ·胸腺饲养细胞的制备 | 第93-94页 |
| ·融合后杂交瘤细胞的培养 | 第94页 |
| ·人肺癌细胞滴片的制备 | 第94-95页 |
| ·杂交瘤的第1轮筛选 | 第95-96页 |
| ·杂交瘤的第2轮筛选 | 第96页 |
| ·杂交瘤的第3轮筛选 | 第96-97页 |
| ·杂交瘤的初步鉴定 | 第97页 |
| ·设置及结果判断标准 | 第97页 |
| 3. 结果 | 第97-104页 |
| ·小鼠的免疫 | 第97-98页 |
| ·采用甲基纤维素胶一步获得单克隆杂交瘤细胞 | 第98页 |
| ·杂交瘤的筛选 | 第98-102页 |
| ·杂交瘤的第1轮筛选 | 第98-99页 |
| ·杂交瘤的第2轮筛选 | 第99-100页 |
| ·杂交瘤的第3轮筛选 | 第100-102页 |
| ·部分单克隆抗体的初步鉴定 | 第102-104页 |
| 4. 讨论 | 第104-112页 |
| 参考文献 | 第112-115页 |
| 第三章 兰尼碱受体1(RyR1)基因在肺癌组织中的表达水平及意义 | 第115-144页 |
| 1. 前言 | 第115页 |
| 2. 材料及方法 | 第115-130页 |
| ·材料 | 第115-120页 |
| ·组织资料 | 第116页 |
| ·标本来源 | 第116页 |
| ·诊断分期标准 | 第116页 |
| ·随访 | 第116页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第116-119页 |
| ·主要试剂 | 第117页 |
| ·试剂的配制 | 第117-119页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第119页 |
| ·用具与耗材的处理 | 第119-120页 |
| ·实验方法与操作步骤 | 第120-130页 |
| ·总RNA提取 | 第120-121页 |
| ·实验原理 | 第120页 |
| ·实验步骤 | 第120-121页 |
| ·RNA逆转录成合成cDNA | 第121-122页 |
| ·标准品的构建 | 第122-123页 |
| ·引物设计 | 第122页 |
| ·扩增RYR1基因特异性片及内参片段 | 第122-123页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第123-124页 |
| ·实验原理 | 第123页 |
| ·实验方法与步骤 | 第123-124页 |
| ·DNA产物与TA载体的连接 | 第124-126页 |
| ·实验原理 | 第124-125页 |
| ·实验方法与步骤 | 第125-126页 |
| ·转化摇菌 | 第126-127页 |
| ·实验原理 | 第126页 |
| ·实验步骤 | 第126-127页 |
| ·质粒DNA小提 | 第127-128页 |
| ·实验原理 | 第127页 |
| ·实验步骤 | 第127-128页 |
| ·质量鉴定 | 第128页 |
| ·标准品的配制 | 第128页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第128-130页 |
| ·实验原理 | 第128-129页 |
| ·实验方法 | 第129-130页 |
| ·统计软件和分析方法 | 第130页 |
| 3 结果 | 第130-139页 |
| ·GAPDH和RYR1基因片段的电泳图 | 第130-132页 |
| ·构建重组GAPDH/pMD18-T和RYR1/pMD18-T质粒并测序鉴定 | 第132-133页 |
| ·RyR1/pMD-18T和GAPDH/pMD-18T质粒的标准曲线的建立 | 第133页 |
| ·熔解曲线 | 第133-134页 |
| ·RyRl基因在不同组织中表达情况 | 第134-135页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与临床病理因素的关系 | 第135-137页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与临床分期的关系 | 第135页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与性别的关系 | 第135页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与年龄的关系 | 第135-136页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与病理类型的关系 | 第136页 |
| ·肺癌组织中RyR1mRNA表达水平与淋巴结转移的关系 | 第136-137页 |
| ·RyR1mRNA表达水平与预后的关系 | 第137-139页 |
| ·RyR1mRNA表达水平与生存时间的关系 | 第137-138页 |
| ·COX归模型分析RyR1mRNA表达水平与预后的关系 | 第138-139页 |
| 4 讨论 | 第139-142页 |
| ·RyR1mRNA表达水平与肺癌的关系 | 第139-140页 |
| ·RyR1mRNA表达水平与肺癌患者预后的关系 | 第140-142页 |
| 参考文献 | 第142-144页 |
| 第四章 RyR1蛋白在肺癌组织的表达及其临床意义 | 第144-163页 |
| 1. 前言 | 第144页 |
| 2. 材料及方法 | 第144-154页 |
| ·材料 | 第144-148页 |
| ·组织资料 | 第144-145页 |
| ·标本来源 | 第144-145页 |
| ·诊断分期标准 | 第145页 |
| ·随访 | 第145页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第145-148页 |
| ·主要试剂 | 第145-146页 |
| ·试剂的配制 | 第146-147页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第147-148页 |
| ·实验方法与操作步骤 | 第148-154页 |
| ·组织蜡块包埋 | 第148页 |
| ·酶免疫组化原理及步骤 | 第148-153页 |
| ·酶免疫组化各关键步骤及其原理 | 第148-152页 |
| ·实验步骤 | 第152-153页 |
| ·结果判定及评定标准 | 第153-154页 |
| ·统计软件和分析方法 | 第154页 |
| 3. 结果 | 第154-158页 |
| ·肺癌、肺良性肿瘤、肺癌旁正常组织RyR1蛋白表达情况 | 第154-155页 |
| ·肺癌RyR1蛋白阳性表达率与患者的年龄的关系 | 第155页 |
| ·肺癌RyR1蛋白阳性表达率与临床病理特征的关系 | 第155-156页 |
| ·RyR1蛋白阳性表达与预后的关系 | 第156-158页 |
| ·肺癌RyR1蛋白阳性表达与生存时间的关系 | 第156-157页 |
| ·COX模型分析肺癌RyR1蛋白阳性与预后的关系 | 第157-158页 |
| ·图片采集 | 第158页 |
| 4. 讨论 | 第158-162页 |
| ·RyR1蛋白阳性表达水平与肺癌的关系 | 第158-160页 |
| ·肺癌组织中RyR1蛋白阳性表达率与临床病理特征的关系 | 第160页 |
| ·RyR1蛋白阳性表达与肺癌患者预后的关系 | 第160-162页 |
| 参考文献 | 第162-163页 |
| 第五章 AQP1在非小细胞肺癌中的表达及其与MMP-9、Ki67表达的关系 | 第163-193页 |
| 1. 前言 | 第163-165页 |
| 2. 材料与方法 | 第165-169页 |
| ·材料 | 第165-167页 |
| ·研究对象和标本采集 | 第165页 |
| ·临床及病理资料 | 第165-166页 |
| ·主要试剂 | 第166页 |
| ·主要仪器设备 | 第166-167页 |
| ·实验方法及步骤 | 第167-168页 |
| ·标本及切片处理 | 第167页 |
| ·HE染色 | 第167-168页 |
| ·免疫组化染色步骤(SP二步法) | 第168页 |
| ·对照组设置 | 第168页 |
| ·结果判定标准 | 第168-169页 |
| ·统计学处理 | 第169页 |
| 3. 结果 | 第169-176页 |
| ·AQP1、MMP-9和Ki67免疫组化在标本定位情况 | 第169-170页 |
| ·AQP1蛋白在NSCLC组、癌旁正常肺组织组及良性肿物组中的表达情况 | 第170-172页 |
| ·AQP1蛋白在NSCLC组、癌旁正常肺组织组及良性肿物组中的表达 | 第170页 |
| ·AQP1蛋白的表达与NSCLC临床病理的关系 | 第170-172页 |
| ·AQP1蛋白阳性表达与预后的关系 | 第172-173页 |
| ·肺癌AQP1蛋白阳性表达与生存时间的关系 | 第172-173页 |
| ·COX模型分析肺癌AQP1蛋白阳性与预后的关系 | 第173页 |
| ·NSCLC中AQP1和Ki67、MMP-9蛋白表达之间的关系 | 第173-174页 |
| ·AQP1和MMP-9在NSCLC中表达之间的相关性 | 第173-174页 |
| ·AQP1和Ki67在NSCLC中表达之间的相关性 | 第174页 |
| ·图片采集 | 第174-176页 |
| 4. 讨论 | 第176-187页 |
| ·AQP1在肺组织中的分布 | 第177-178页 |
| ·NSCLC中AQP1表达与临床病理特征的关系 | 第178-182页 |
| ·NSCLC中AQP1与MMP-9、Ki67之间的关系 | 第182-185页 |
| ·NSCLC中AQP1与MMP-9之间的关系 | 第182-184页 |
| ·NSCLC中AQP1与Ki67之间的关系 | 第184页 |
| ·AQP1蛋白阳性表达与肺癌患者预后的关系 | 第184-185页 |
| ·问题与展望 | 第185-187页 |
| 参考文献 | 第187-193页 |
