缩略词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-16页 |
·超抗原简介 | 第9页 |
·超抗原的抗肿瘤作用机制 | 第9-11页 |
·SDCC 作用 | 第9-10页 |
·细胞因子的作用 | 第10-11页 |
·LAK 细胞样细胞毒活性作用 | 第11页 |
·超抗原抗肿瘤研究 | 第11页 |
·单纯超抗原抗肿瘤存在的问题 | 第11页 |
·单克隆抗体与超抗原的结合 | 第11-12页 |
·基因工程抗体靶向超抗原的抗肿瘤作用 | 第12-14页 |
·Fab-SEA 的抗肿瘤作用 | 第12-13页 |
·单链抗体-超抗原融合蛋白抗肿瘤 | 第13页 |
·突变的SEA 在肿瘤导向治疗中的应用 | 第13-14页 |
·其他形式的超抗原融合蛋白 | 第14页 |
·小结 | 第14-16页 |
·抗体分子 | 第14页 |
·抗体与效应蛋白超抗原的连接 | 第14-15页 |
·效应分子-超抗原的安全性 | 第15-16页 |
第二部分 实验部分 | 第16-38页 |
·材料 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-26页 |
·寡聚核苷酸引物的设计及合成 | 第18-19页 |
·B3VH 和B3VL 的扩增 | 第19页 |
·以柱离心式DNA 纯化试剂盒纯化回收PCR 产物 | 第19-20页 |
·B3VH 和B3VL 的PCR 连接 | 第20页 |
·B3ds-ScFv 重组克隆质粒的构建 | 第20页 |
·B3ds-ScFv 重组克隆质粒的筛选及鉴定 | 第20-21页 |
·B3ds-ScFv-PET 重组质粒的构建 | 第21页 |
·B3ds-ScFv-PET 重组质粒的筛选及鉴定 | 第21页 |
·SEA(D227A)-T 的构建 | 第21-22页 |
·序列分析 | 第22页 |
·B3dsscFv-SEA-pET 表达载体的构建 | 第22页 |
·B3dsscFv-SEA-pET 表达载体的筛选及鉴定 | 第22-23页 |
·B3ds-scFv-SEA 融合蛋白的诱导表达 | 第23页 |
·目的蛋白的 SDS-PAGE 鉴定 | 第23-24页 |
·表达产物的 western blot 鉴定 | 第24页 |
·包涵体的洗涤及变复性 | 第24页 |
·复性产物的纯化 | 第24-25页 |
·纯化蛋白的定量 | 第25页 |
·复性后蛋白二硫键形成鉴定 | 第25页 |
·ELISA 鉴定 B3ds-scFv-SEA 中抗体的活性 | 第25-26页 |
·融合蛋白稳定性实验 | 第26页 |
·MTS 法测定复性纯化后的 B3dsscFv-SEA 对肿瘤细胞的杀伤活性 | 第26页 |
·结 果 | 第26-38页 |
第三部分 本研究的特色、意义及所取得的主要结果 | 第38-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |