| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-42页 |
| ·冬虫夏草 | 第14-22页 |
| ·冬虫夏草概述 | 第14-15页 |
| ·冬虫夏草主要化学成分 | 第15-18页 |
| ·虫草多糖 | 第15页 |
| ·核苷类化合物 | 第15-17页 |
| ·蛋白质和氨基酸 | 第17-18页 |
| ·糖醇和甾醇类 | 第18页 |
| ·其它化合物 | 第18页 |
| ·冬虫夏草的药理学研究 | 第18-21页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第18-19页 |
| ·对免疫系统的作用 | 第19-20页 |
| ·对类固醇合成的刺激作用 | 第20页 |
| ·对机体的代谢调节活性 | 第20页 |
| ·抗氧化作用 | 第20-21页 |
| ·其它药理作用 | 第21页 |
| ·冬虫夏草人工培育现状 | 第21-22页 |
| ·天然抗肿瘤药物 | 第22-26页 |
| ·肿瘤的危害及抗肿瘤药物的重要性 | 第22-23页 |
| ·天然抗肿瘤药物及其作用机制研究进展 | 第23-26页 |
| ·生物碱 | 第24页 |
| ·萜类 | 第24-25页 |
| ·黄酮类 | 第25页 |
| ·多糖 | 第25-26页 |
| ·细胞凋亡 | 第26-37页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第26-27页 |
| ·细胞凋亡的形态特征 | 第27-28页 |
| ·细胞核的变化 | 第27页 |
| ·细胞质的变化 | 第27-28页 |
| ·凋亡小体的形成 | 第28页 |
| ·细胞凋亡的生化特征 | 第28-29页 |
| ·DNA 片段化 | 第28页 |
| ·胞浆Ca~(2+)的升高与分布变化 | 第28-29页 |
| ·胞浆pH 的变化 | 第29页 |
| ·细胞凋亡的信号传导途径 | 第29-32页 |
| ·死亡受体介导的信号传导途径 | 第29-30页 |
| ·线粒体依赖的信号传导途径 | 第30-32页 |
| ·电子传递和能量代谢的瓦解 | 第31页 |
| ·线粒体跨膜电位(ΔΨm)与MPT 孔道 | 第31页 |
| ·Cyt c、Apaf-1 及procaspase-9 复合体 | 第31-32页 |
| ·细胞凋亡的中枢效应器——Caspase 蛋白酶家族 | 第32-36页 |
| ·Caspase 家族成员结构和分类 | 第33页 |
| ·Caspase 的激活 | 第33-35页 |
| ·Caspase的生理功能 | 第35-36页 |
| ·Bcl-2 基因家族 | 第36-37页 |
| ·Bcl-2 的发现 | 第36-37页 |
| ·Bcl-2 基因及其蛋白的分子结构 | 第37页 |
| ·细胞凋亡在肿瘤的发生、发展及治疗中的作用 | 第37-40页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤的发生、发展 | 第37-38页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤治疗 | 第38-40页 |
| ·化疗 | 第38-39页 |
| ·放疗 | 第39页 |
| ·生物治疗 | 第39-40页 |
| ·本论文研究的内容 | 第40-42页 |
| 第二章 虫草菌的分离培养及其主要成分分析 | 第42-48页 |
| ·实验材料和方法 | 第42-44页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42-43页 |
| ·天然冬虫夏草的来源 | 第43页 |
| ·虫草菌HK-1 的分离 | 第43页 |
| ·菌丝体的液体培养 | 第43-44页 |
| ·总的糖含量的测定 | 第44页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第44页 |
| ·腺苷和虫草素含量的测定 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-46页 |
| ·虫草菌HK-1 的形态学特征 | 第44-45页 |
| ·虫草菌主要化学成分的测定及其与天然冬虫夏草的比较 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 人工虫草菌 HK-1与天然虫草抗肿瘤活性比较 | 第48-57页 |
| ·实验材料和方法 | 第48-52页 |
| ·仪器 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48-49页 |
| ·虫草菌HK-1 和天然虫草提取物的制备 | 第49页 |
| ·肿瘤细胞培养 | 第49-51页 |
| ·复苏 | 第49-50页 |
| ·传代 | 第50-51页 |
| ·保存 | 第51页 |
| ·MTT 比色法 | 第51页 |
| ·麦角甾醇、腺苷和环孢霉素A 含量测定 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-55页 |
| ·提取物对816 细胞的生长抑制作用 | 第52-54页 |
| ·乙酸乙酯提取物对其它肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第54-55页 |
| ·虫草菌HK-1 与天然虫草主要活性成分含量的比较 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 虫草菌 HK-1的抗肿瘤活性 | 第57-69页 |
| ·实验材料和方法 | 第57-59页 |
| ·仪器 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·正常小鼠骨髓细胞的分离培养 | 第57-58页 |
| ·动物模型的建立 | 第58页 |
| ·抗肿瘤治疗实验方案 | 第58页 |
| ·疗效观察方法 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-66页 |
| ·出膏率和主要成分含量 | 第59页 |
| ·虫草菌HK-1 对体外培养的肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第59-62页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物对正常细胞的抑制作用 | 第62-63页 |
| ·虫草菌HK-1 在体内对小鼠黑色素瘤816 的抑制作用 | 第63-66页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物中抗肿瘤活性成分 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第五章 中草菌 HK-1对肿瘤细胞的凋亡诱导作用 | 第69-82页 |
| ·实验材料和方法 | 第69-75页 |
| ·仪器 | 第69-70页 |
| ·试剂 | 第70-72页 |
| ·Hoechst 33258 染色 | 第72页 |
| ·DNA ladder | 第72-73页 |
| ·凋亡细胞DNA 的提取 | 第72页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第72-73页 |
| ·Caspase-3 活性测定 | 第73页 |
| ·Western blotting | 第73-75页 |
| ·样品制备 | 第73-74页 |
| ·PAGE-SDS 凝胶电泳 | 第74页 |
| ·电转移 | 第74-75页 |
| ·Western blotting | 第75页 |
| ·实验结果 | 第75-80页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物作用后HL-60 细胞形态变化 | 第75页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导HL-60 细胞染色质凝集 | 第75-76页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导细胞核DNA片段化 | 第76-78页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导Caspase-3 活性 | 第78-79页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导PARP 蛋白水解 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第六章 虫草菌 HK-1诱导肿瘤细胞凋亡的信号传导途径 | 第82-92页 |
| ·实验材料和方法 | 第82-84页 |
| ·仪器 | 第82页 |
| ·试剂 | 第82-83页 |
| ·细胞荧光染色(Hoechst 33258 和CMXRos) | 第83页 |
| ·线粒体与细胞质的分离 | 第83页 |
| ·Caspase 活性测定 | 第83-84页 |
| ·实验结果 | 第84-88页 |
| ·低浓度虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导细胞核DNA片断化 | 第84-85页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导线粒体膜电位(Δψm)下降 | 第85页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导线粒体内Cyt c的转移 | 第85-86页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物诱导Bcl-2 和Bax蛋白的变化 | 第86-87页 |
| ·虫草菌HK-1乙酸乙酯提取物诱导Caspase 酶活性 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| ·小结 | 第90-92页 |
| 第七章 虫草菌 HK-1对肿瘤细胞 HL-60细胞周期的影响 | 第92-96页 |
| ·实验材料和方法 | 第92-93页 |
| ·仪器 | 第92页 |
| ·试剂 | 第92页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期 | 第92-93页 |
| ·实验结果 | 第93-94页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物对HL-60 细胞周期时相的影响 | 第93页 |
| ·虫草菌HK-1 乙酸乙酯提取物对p21~(WAF1/CIP1)、CyclinB1和p34~(cdc2)蛋白含量的影响 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 第八章 总结与设想 | 第96-99页 |
| ·总结 | 第96-98页 |
| ·设想 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-116页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
