英文缩写 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
前言 | 第8-13页 |
1 实验材料与方法 | 第13-25页 |
·实验设计与技术路线 | 第13-14页 |
·实验材料 | 第14-17页 |
·主要仪器设备 | 第14页 |
·主要试剂耗材 | 第14-17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·靶基因survivin mRNA与寡核苷酸库的制备 | 第17-18页 |
·寡核苷酸库的筛选 | 第18-20页 |
·mRNA可接近位点的芯片筛选 | 第20-22页 |
·硫代反义寡核苷酸的细胞水平活性筛选 | 第22-23页 |
·硫代反义寡核苷酸分子水平的活性筛选 | 第23-25页 |
2 实验结果 | 第25-37页 |
·靶基因mRNA与寡核苷酸库的制备 | 第25-27页 |
·全长靶基因的克隆与验证 | 第25-26页 |
·靶基因的体外转录 | 第26-27页 |
·寡核苷酸库的“全长基因寻靶”筛选 | 第27-30页 |
·寡核苷酸库结合序列的PCR扩增与测序 | 第27-28页 |
·mRNA可接近位点分析 | 第28-30页 |
·mRNA可接近位点芯片杂交及原位切割活性筛选 | 第30-33页 |
·mRNA可接近位点的芯片筛选 | 第30-31页 |
·RNase H原位切割 | 第31-33页 |
·硫代反义寡核苷酸的细胞水平活性筛选 | 第33-34页 |
·硫代反义寡核苷酸分子水平的活性筛选 | 第34-37页 |
·硫代反义寡核苷酸转录水平的活性筛选 | 第34-35页 |
·硫代反义寡核苷酸翻译水平的活性筛选 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-41页 |
附图一 靶基因survivin的克隆测序结果 | 第41-42页 |
附图二 靶mRNA与结合标签的序列比对及靶点发现 | 第42-48页 |
附图三 RNase H酶切动力学曲线 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
综述 | 第54-59页 |