| 第一章 文献综述 | 第1-20页 |
| ·概述 | 第8页 |
| ·马红球菌(Rhodococcus equi)概述 | 第8页 |
| ·胆固醇氧化酶研究进展 | 第8-12页 |
| ·胆固醇氧化酶的基本特性 | 第8-9页 |
| ·胆固醇氧化酶降解胆固醇的机理 | 第9-10页 |
| ·胆固醇氧化酶的催化效率 | 第10-12页 |
| ·胆固醇氧化酶的主要用途 | 第12页 |
| ·胆固醇氧化酶基因工程研究进展 | 第12-19页 |
| ·已分离的胆固醇氧化酶基因 | 第12-15页 |
| ·链霉菌streptomyces sp.的胆固醇氧化酶基因choA | 第13-14页 |
| ·甾短杆菌Brevibacterium sterolicum的胆固醇氧化酶基因choB | 第14-15页 |
| ·马红球菌(Rhodococcus equi)胆固醇氧化酶基因choE | 第15页 |
| ·胆固醇氧化酶基因与基因工程 | 第15-19页 |
| ·胆固醇氧化酶基因与微生物基因工程 | 第15-16页 |
| ·胆固醇氧化酶基因与抗虫植物基因工程 | 第16-19页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·实验用菌株 | 第20页 |
| ·与本论文有关的质粒 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·标准分子量 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-33页 |
| ·胆固醇氧化酶活性检测 | 第21-22页 |
| ·马红球菌基因组DNA提取 | 第22页 |
| ·PCR扩增马红球菌胆固醇氧化酶基因 | 第22-23页 |
| ·PCR片段的克隆及亚克隆的构建与鉴定 | 第23-27页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第23-25页 |
| ·DNA的限制性酶切 | 第25页 |
| ·目的DNA片段的电泳回收 | 第25-26页 |
| ·质粒载体片段与外源片段的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第27页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·电击法转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| ·细菌表达载体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第29页 |
| ·蛋白质表达情况的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-31页 |
| ·表达产物的可溶性及包涵体分析 | 第31-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·胆固醇氧化酶基因的克隆 | 第33-37页 |
| ·胆固醇氧化酶基因片段的获得 | 第33页 |
| ·胆固醇氧化酶基因完整序列的获得 | 第33-37页 |
| ·胆固醇氧化酶基因表达载体的构建及其表达研究 | 第37-41页 |
| ·胆固醇氧化酶表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·胆固醇氧化酶的SDS-PAGE分析 | 第39页 |
| ·表达产物的活性分析 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 作者简介 | 第50-55页 |
