| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 1 引言 | 第14-22页 |
| ·五种苹果病毒的特点 | 第14-16页 |
| ·苹果茎沟病毒的特点 | 第14-15页 |
| ·苹果茎痘病毒的特点 | 第15页 |
| ·苹果褪绿叶斑病毒的特点 | 第15页 |
| ·苹果锈果类病毒的特点 | 第15页 |
| ·苹果花叶病毒的特点 | 第15-16页 |
| ·五种苹果病毒的为害特征 | 第16页 |
| ·苹果病毒的传播途径 | 第16-17页 |
| ·苹果病毒病的发生特点及主要危害 | 第17页 |
| ·苹果病毒病的防治对策 | 第17页 |
| ·苹果病毒检测方法及特点 | 第17-20页 |
| ·植物学症状鉴定法 | 第17页 |
| ·生物学检测方法 | 第17-18页 |
| ·电镜观察技术 | 第18页 |
| ·血清学方法 | 第18页 |
| ·分子生物学方法 | 第18-20页 |
| ·主要的脱毒技术 | 第20页 |
| ·热处理脱毒法 | 第20页 |
| ·枝条顶端组培脱毒法 | 第20页 |
| ·热处理结合枝条顶端培养脱毒法 | 第20页 |
| ·微体嫁接脱毒法 | 第20页 |
| ·化学处理脱毒法 | 第20页 |
| ·国内外研究现状 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 试验材料与方法 | 第22-33页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-33页 |
| ·田间样品的选择和保存 | 第23页 |
| ·总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·总RNA 提取质量的检测 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·三种苹果潜隐性病毒RT-PCR 检测方法的改进 | 第26-30页 |
| ·ASPV 和ACLSV 荧光定量RT-PCR 体系 | 第30页 |
| ·苹果锈果类病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第30-31页 |
| ·苹果花叶病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第31-32页 |
| ·PCR 产物的检测、回收和测序 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-68页 |
| ·几种总RNA 提取方法的对比 | 第33-34页 |
| ·三种潜隐性病毒多重RT-PCR 体系特异性检测和引物组合的筛选 | 第34-37页 |
| ·多重RT-PCR 体系特异性检测 | 第34-35页 |
| ·多重RT-PCR 体系引物组合的筛选 | 第35-37页 |
| ·三种潜隐性病毒两步多重RT-PCR 检测体系的优化 | 第37-41页 |
| ·反转录体系的确定 | 第37-38页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第38-41页 |
| ·三种潜隐性病毒一步多重RT-PCR 检测体系的优化 | 第41-45页 |
| ·反转录时间的确定 | 第41页 |
| ·适宜退火温度的确定 | 第41-42页 |
| ·适宜延伸时间的确定 | 第42-43页 |
| ·循环次数的确定 | 第43页 |
| ·适宜终延伸时间的确定 | 第43-44页 |
| ·引物终浓度组合的筛选 | 第44页 |
| ·总RNA 用量的确定 | 第44-45页 |
| ·苹果锈果类病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第45-50页 |
| ·苹果锈果类病毒RT-PCR 检测体系特异性的检验 | 第45-46页 |
| ·两步RT-PCR 检测体系的确定 | 第46-47页 |
| ·一步RT-PCR 检测体系的确定 | 第47-49页 |
| ·两种RT-PCR 检测体系的验证 | 第49-50页 |
| ·苹果花叶病毒 RT-PCR 检测体系的优化 | 第50-52页 |
| ·苹果花叶病毒RT-PCR 检测体系特异性的检验 | 第50页 |
| ·退火温度的筛选 | 第50-51页 |
| ·引物终浓度的确定 | 第51页 |
| ·RT-PCR 检测体系的验证 | 第51-52页 |
| ·ASPV 和ACLSV 两种潜隐性病毒的分布特征 | 第52-59页 |
| ·ASPV 的分布特征 | 第52-54页 |
| ·ACLSV 的分布特征 | 第54-56页 |
| ·ASPV 和ACLSV 的分布特征比较 | 第56-59页 |
| ·我国苹果主产区潜隐性病毒分布情况 | 第59-68页 |
| ·我国苹果主产区分布情况 | 第59页 |
| ·样品采集情况 | 第59-63页 |
| ·不同地区苹果潜隐性病毒侵染情况 | 第63-65页 |
| ·不同品种的苹果潜隐性病毒侵染情况 | 第65-67页 |
| ·其他苹果品种潜隐性病毒侵染情况分析 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| ·三种潜隐性病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第68-69页 |
| ·ASPV 和ACLSV 两种潜隐性病毒的时空分布特征 | 第69-70页 |
| ·田间苹果枝皮组织的总 RNA 提取方法 | 第70页 |
| ·我国苹果主产区潜隐性病毒分布情况 | 第70-71页 |
| ·两种非潜隐性病毒RT-PCR 检测体系的优化 | 第71-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 在读期间发表论文 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
