| 1 引言 | 第1-19页 |
| ·植物基因工程研究进展 | 第9-11页 |
| ·芸薹属植物--甘蓝的基因工程研究进展 | 第11-12页 |
| ·植物基因工程发展的新阶段-植物生物反应器时代 | 第12-14页 |
| ·用植物生物反应器生产医用蛋白 | 第12-13页 |
| ·用植物生物反应器生产工业用酶及工业原料 | 第13-14页 |
| ·根癌农杆菌TI质粒及其应用 | 第14-15页 |
| ·ubiC及相关ubiA基因的研究及应用现状 | 第15-17页 |
| ·本课题的研究思路和意义 | 第17-19页 |
| ·用转基因甘蓝生产工业原料对羟基苯甲酸(4HB) | 第17-19页 |
| ·对羟基苯甲酸是合成紫草宁的重要前体物质 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·材料 | 第19-25页 |
| ·植物材料 | 第19-20页 |
| ·菌种和质粒 | 第20页 |
| ·限制性内切酶及其它工具酶 | 第20页 |
| ·常用储存液及配法 | 第20-21页 |
| ·生化试剂与配制 | 第21-22页 |
| ·化学试剂 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-31页 |
| ·ubiC基因的克隆及植物表达载体的构建 | 第25-28页 |
| ·质粒pBI-ubiC转化根癌农杆菌LBA4404 | 第28-29页 |
| ·甘蓝的组织培养 | 第29-30页 |
| ·ubiC基因共培养转化甘蓝 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-40页 |
| ·ubiC基因植物表达质粒pBI121-ubiC的构建与鉴定 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增结果 | 第31页 |
| ·植物重组表达质粒pBI121-ubiC的构建 | 第31页 |
| ·重组质粒pBI121-ubiC的鉴定 | 第31页 |
| ·pBI121-ubiC质粒转化根癌农杆菌 | 第31-32页 |
| ·根癌农杆菌生长曲线的测定 | 第32-33页 |
| ·甘蓝再生体系的建立 | 第33-36页 |
| ·不同时期甘蓝下胚轴对芽分化频率的影响 | 第33页 |
| ·不同浓度的激素组合对下胚轴芽分化的影响 | 第33-34页 |
| ·不同浓度的激素组合对下胚轴愈伤组织形成的影响 | 第34-35页 |
| ·快繁及生根培养 | 第35-36页 |
| ·转化体筛选及植株再生 | 第36-40页 |
| ·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第36页 |
| ·不同抗生素对甘蓝下胚轴出愈率的影响 | 第36-37页 |
| ·外植体预培养时间对出愈率的影响 | 第37-38页 |
| ·农杆菌侵染时间对出愈率的影响 | 第38-39页 |
| ·共培养时间对出愈率的影响 | 第39页 |
| ·转基因抗性愈伤的获得 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第40页 |
| ·抑菌剂的选择 | 第40页 |
| ·选择压力的确定 | 第40-41页 |
| ·愈伤组织再生系统和直接分化再生系统在甘蓝基因转化中的质量评价 | 第41页 |
| ·影响外植体褐化的原因及解决办法 | 第41-42页 |
| ·试管苗玻璃化现象 | 第42-43页 |
| ·外源基因转化的影响因素及抗性愈伤的应用前景 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 图3.4 甘蓝无菌苗 | 第52页 |
| 图3.5 直接分化培养基中的下胚轴 | 第52页 |
| 图3.6 下胚轴直接分化出不定芽 | 第52页 |
| 图3.7 下胚轴形成的愈伤组织 | 第52-53页 |
| 图3.8 生长良好的愈伤组织 | 第53页 |
| 图3.9 由愈伤组织分化出不定芽 | 第53页 |
| 图3.10 生长良好的不定芽 | 第53页 |
| 图3.11 由芽点快繁得到的丛生苗 | 第53-54页 |
| 图3.12 诱导出不定根 | 第54页 |
| 图3.13 由下胚轴再生的甘蓝植株 | 第54页 |
| 图3.14 抗性愈伤的获得 | 第54页 |
| 图4.1 外植体的褐化现象 | 第54页 |
