除虫菊CPS基因的克隆及其转化烟草的研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-23页 |
| ·除虫菊酯概述 | 第12-13页 |
| ·植物萜类物质的代谢研究 | 第13-15页 |
| ·植物萜类物质的简介 | 第13页 |
| ·萜类物质的代谢研究 | 第13-15页 |
| ·除虫菊酯的生物合成 | 第15-21页 |
| ·除虫菊酯的化学结构 | 第15-16页 |
| ·除虫菊酯的生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·除虫菊酯生物合成途径的相关酶 | 第18-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 2 除虫菊 CPS 基因的克隆及表达载体的构建 | 第23-37页 |
| ·材料与仪器 | 第23-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·酶与化学试剂 | 第23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·常用抗生素贮存液 | 第23-24页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第25页 |
| ·DNA 的纯化 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26页 |
| ·除虫菊花总RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·目的基因的RT-PCR 扩增 | 第27页 |
| ·目的DNA 片段的回收 | 第27-28页 |
| ·CPS 基因的克隆与鉴定 | 第28-29页 |
| ·CPS 基因的生物信息学分析 | 第29页 |
| ·CPS 基因植物表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-37页 |
| ·除虫菊花的总RNA 的质量鉴定 | 第31-32页 |
| ·除虫菊CPS 基因的RT-PCR 扩增 | 第32页 |
| ·CPS 基因的克隆及鉴定 | 第32-34页 |
| ·CPS 基因的测序与生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌的转化及鉴定 | 第36-37页 |
| 3 CPS 基因转化烟草的研究 | 第37-47页 |
| ·材料与仪器 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·工程菌株 | 第37页 |
| ·酶与化学试剂 | 第37页 |
| ·引物 | 第37页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第37-38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·外植体和农杆菌的准备 | 第38页 |
| ·烟草的侵染 | 第38页 |
| ·转基因烟草的筛选培养和移栽 | 第38-39页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草的GUS 染色检测 | 第40页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR 检测 | 第40-42页 |
| ·转基因烟草的生理生化分析 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第42-43页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·GUS 染色检测 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR 半定量检测 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草的生理生化分析 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·CPS 基因的克隆和分析 | 第47页 |
| ·CPS 基因表达载体的构建策略 | 第47-48页 |
| ·CPS 基因对烟草生理生化的影响 | 第48-50页 |
| 5 结论与展望 | 第50-52页 |
| ·结论 | 第50页 |
| ·后续工作展望 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
