Pim-3对急性肝损伤肝细胞凋亡的抑制作用
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-11页 |
| 第2章 材料与方法 | 第11-25页 |
| ·实验材料 | 第11-13页 |
| ·实验动物 | 第11页 |
| ·质粒来源 | 第11页 |
| ·主要仪器与设备 | 第11-12页 |
| ·主要试剂 | 第12-13页 |
| ·实验方法 | 第13-24页 |
| ·实验动物 | 第13-14页 |
| ·动物饲养 | 第13-14页 |
| ·动物分组及处理方法 | 第14页 |
| ·建立急性肝损伤动物模型 | 第14页 |
| ·基因转染方法 | 第14-16页 |
| ·质粒的提取 | 第14-16页 |
| ·靶向肝脏的活体基因转染 | 第16页 |
| ·荧光显微镜检查 | 第16页 |
| ·细胞凋亡的TUNEL 分析 | 第16页 |
| ·Caspase-3 活性检测 | 第16页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第16-19页 |
| ·RNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·逆转录即cDNA 的合成 | 第17页 |
| ·PCR 扩增 | 第17-19页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western blot)检测 | 第19-24页 |
| ·常用液体的配制 | 第19-20页 |
| ·样本总蛋白提取和浓度测定 | 第20-21页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21-22页 |
| ·Western 印迹法 | 第22-24页 |
| ·统计学分析 | 第24-25页 |
| 第3章 结果 | 第25-31页 |
| ·各组大鼠肝组织GFP 表达情况 | 第25-26页 |
| ·肝组织目的基因Pim-3 的表达 | 第26-27页 |
| ·肝细胞凋亡的TUNEL 分析结果 | 第27-28页 |
| ·肝组织Caspase-3 活性分析结果 | 第28-29页 |
| ·肝组织Bcl-2 基因的表达 | 第29-30页 |
| ·肝组织凋亡诱导基因p53 的表达 | 第30-31页 |
| 第4章 讨论 | 第31-34页 |
| 第5章 结论与展望 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第34页 |
| ·进一步工作的方向 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 附录A 肝炎病毒与原癌基因的激活 | 第41-47页 |
| 附录B 胚胎干细胞与 Nanog 基因 | 第47-53页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第53页 |