| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-24页 |
| ·猪流感及猪流感病毒的研究进展 | 第9-17页 |
| ·SI的世界流行情况及公共卫生意义 | 第9-11页 |
| ·病原 | 第11-17页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的应用和进展 | 第17-23页 |
| ·实时定量 PCR 原理 | 第17-21页 |
| ·实时荧光定量PCR的特点及优点 | 第21页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第21-23页 |
| ·实时荧光定量PCR的展望 | 第23页 |
| ·本研究的背景和目的 | 第23页 |
| ·本研究的特点和创新之处 | 第23-24页 |
| 第二章 猪流感病毒 M 基因实时荧光定量 PCR 诊断方法的建立 | 第24-32页 |
| ·材料与方法 | 第24-27页 |
| ·毒株 | 第24页 |
| ·仪器和试剂 | 第24-25页 |
| ·引物和探针的设计合成 | 第25页 |
| ·病毒 RNA 提取及逆转录 | 第25页 |
| ·对引物最佳退火温度的筛选 | 第25-26页 |
| ·质粒标准阳性模板的制备 | 第26页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·引物最佳退火温度的筛选 | 第27-28页 |
| ·M 基因的克隆及测序鉴定 | 第28页 |
| ·质粒标准品浓度的测定 | 第28页 |
| ·反应参数的优化 | 第28-29页 |
| ·反应体系中各组分的优化 | 第29页 |
| ·标准曲线绘制 | 第29-30页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、重复性、特异性 | 第30页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 实时荧光定量 PCR 技术快速定量检测 H3N2 亚型猪流感病 | 第32-39页 |
| ·材料与方法 | 第32-35页 |
| ·毒株 | 第32-33页 |
| ·仪器和试剂 | 第33页 |
| ·引物和探针的设计合成 | 第33页 |
| ·病毒 RNA 提取及逆转录 | 第33-34页 |
| ·质粒标准阳性模板的制备 | 第34页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第34页 |
| ·SIV 病毒的绝对定量 | 第34-35页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、特异性、重复性 | 第35页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·H3、N2 基因的克隆及测序鉴定 | 第35页 |
| ·质粒标准品浓度的测定 | 第35-36页 |
| ·标准曲线绘制 | 第36页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、重复性、特异性 | 第36-37页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 实时荧光定量 PCR技术快速定量检测 H1N1亚型猪流感病毒 | 第39-46页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·毒株 | 第40页 |
| ·仪器和试剂 | 第40页 |
| ·引物和探针的设计合成 | 第40-41页 |
| ·病毒 RNA 提取及逆转录 | 第41页 |
| ·质粒标准阳性模板的制备 | 第41页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
| ·H1N2 SIV 的绝对定量 | 第42页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、特异性、重复性 | 第42页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·H1、N1 基因的克隆及测序鉴定 | 第42-43页 |
| ·质粒标准品浓度的测定 | 第43页 |
| ·标准曲线绘制 | 第43-44页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、重复性、特异性 | 第44-45页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 实时荧光定量 PCR技术快速定量检测 H1N2亚型猪流感病毒 | 第46-53页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·毒株 | 第46-47页 |
| ·仪器和试剂 | 第47页 |
| ·引物和探针的设计合成 | 第47页 |
| ·病毒 RNA 提取及逆转录 | 第47-48页 |
| ·质粒标准阳性模板的制备 | 第48页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第48页 |
| ·H1N2 SIV 的绝对定量 | 第48-49页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、特异性、重复性 | 第49页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·H1、N2 基因的克隆及测序鉴定 | 第49-50页 |
| ·质粒标准品浓度的测定 | 第50页 |
| ·标准曲线绘制 | 第50-51页 |
| ·RF-PCR 的敏感性、重复性、特异性 | 第51-52页 |
| ·对人工攻毒样品及现地样品的检测 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第六章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
