| 提要 | 第1-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-23页 |
| 第一节谷胱甘肽过氧化物酶及其模拟物 | 第8-15页 |
| 一、谷胱甘肽过氧化物酶的结构及其催化机制 | 第9-11页 |
| 1. GPx的结构 | 第9-11页 |
| 2. GPx的催化机制 | 第11页 |
| 二、以小分子为骨架构建的GPx模拟物 | 第11-13页 |
| 1. Ebselen(PZ51) | 第12页 |
| 2. 硒代谷胱甘肽（GSeH） | 第12-13页 |
| 3. 硒桥联环糊精 | 第13页 |
| 三、以生物大分子为骨架构建的GPx模拟物 | 第13-15页 |
| 1. 化学修饰天然蛋白质 | 第13-14页 |
| 2. 通过基因工程方法改造天然蛋白质模拟GPx | 第14-15页 |
| 第二节 营养缺陷型表达概述 | 第15-21页 |
| 一、营养缺陷型表达的发展概况 | 第16-21页 |
| 1. 早期胞外掺入实验 | 第17-18页 |
| 2. 利用营养缺陷型微生物掺入氨基酸类似物 | 第18-21页 |
| 第三节 本论文立论依据 | 第21-23页 |
| 第二章 硒代谷胱甘肽硫转移酶模拟GPX | 第23-48页 |
| 第一节 引言 | 第23页 |
| 第二节 乙酰化硒代蛋氨酸的合成 | 第23-27页 |
| 一、实验材料 | 第23-24页 |
| 1. 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2. 实验仪器 | 第24页 |
| 二、实验方法 | 第24-27页 |
| 1. 乙酰化-α-氨基-γ-丁内酯的制备 | 第24页 |
| 2. 乙酰化硒代蛋氨酸的制备 | 第24-25页 |
| 3 产物的表征 | 第25-27页 |
| 三、结果分析 | 第27页 |
| 第三节 谷胱甘肽硫转移酶表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 一、实验材料 | 第27-28页 |
| 1. 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2. 实验仪器 | 第28页 |
| 3. 菌种与质粒 | 第28页 |
| 二、实验方法 | 第28-29页 |
| 1. 目的基因的获得及扩增 | 第28页 |
| 2. 目的基因的定点突变Y7M的引入 | 第28-29页 |
| 三、结果分析 | 第29-30页 |
| 第四节 硒代和野生型谷胱甘肽硫转移酶表达、分离提纯及初步表征 | 第30-36页 |
| 一、实验材料 | 第30-32页 |
| 1. 实验试剂 | 第30页 |
| 2. 实验仪器 | 第30-31页 |
| 3. 主要溶液的配制 | 第31-32页 |
| 二、实验方法 | 第32-33页 |
| 1. 野生型及突变后的sjGST诱导表达 | 第32页 |
| 2. Se-Met-GST的诱导表达 | 第32页 |
| 3. 野生型GST、突变体及Se-Met-sjGST的分离提纯 | 第32-33页 |
| 4. 高效液相色谱鉴定目的蛋白纯度 | 第33页 |
| 5. 质谱鉴定 | 第33页 |
| 6. 蛋白质含量的测定 | 第33页 |
| 三、结果分析 | 第33-36页 |
| 1. 野生型及突变后的sjGST诱导表达 | 第33-34页 |
| 2. Se-Met-sjGST的诱导表达与分离提纯 | 第34-35页 |
| 3. 高效液相色谱鉴定目的蛋白纯度 | 第35页 |
| 4 质谱鉴定 | 第35-36页 |
| 第五节 硒代谷胱甘肽硫转移酶的酶学性质分析 | 第36-43页 |
| 一、实验材料 | 第36页 |
| 1. 实验试剂 | 第36页 |
| 2. 实验仪器 | 第36页 |
| 二、实验方法 | 第36-37页 |
| 1. 蛋白质含量的测定 | 第36页 |
| 2. 活力的测定 | 第36-37页 |
| 3. 最适温度和最适pH值的测定 | 第37页 |
| 三、结果分析 | 第37-43页 |
| 1. 天然sjGST与Se-Met-sjGST及其突变体的GPx活力 | 第37-42页 |
| 2. 最适温度和最适pH值 | 第42-43页 |
| 第六节 硒代谷胱甘肽硫转移酶的动力学分析 | 第43-48页 |
| 一、实验材料 | 第43页 |
| 1. 实验试剂 | 第43页 |
| 2. 实验仪器 | 第43页 |
| 二、实验方法 | 第43页 |
| 1. 蛋白质含量的测定 | 第43页 |
| 2. 表观动力学性质研究 | 第43页 |
| 三、结果分析 | 第43-48页 |
| 实验结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 作者简历 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 中文摘要 | 第55-58页 |
| Abstract | 第58-60页 |
