| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 胞质类受体蛋白激酶的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.2 普通胁迫蛋白USP的生物学功能 | 第12-14页 |
| 1.3 蛋白质互作相关研究技术 | 第14-18页 |
| 1.3.1 免疫共沉淀技术 | 第14-15页 |
| 1.3.2 酵母双杂技术 | 第15-16页 |
| 1.3.3 双分子荧光互补技术 | 第16-17页 |
| 1.3.4 Pull-down技术 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 胞质类受体蛋白激酶ZmSTK1中USP结构域互作蛋白筛选 | 第20-37页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第20页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第20-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 原核表达与纯化 | 第22-24页 |
| 2.2.2 抗体制备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 成熟花粉全蛋白提取 | 第25页 |
| 2.2.4 抗体特异性的验证 | 第25-27页 |
| 2.2.5 免疫共沉淀法筛选互作蛋白 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.3.1 重组蛋白ZmSTK1-USP的表达与纯化 | 第28-29页 |
| 2.3.2 Tris-HCl花粉全蛋白提取与鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 ZmSTK1-USP抗体制备及鉴定 | 第30-32页 |
| 2.3.4 ZmSTK1-USP互作蛋白的筛选鉴定 | 第32页 |
| 2.3.5 质谱检测 | 第32-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 胞质类受体蛋白激酶ZmSTK1的USP结构域互作蛋白的初步验证 | 第37-59页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第37-40页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 3.1.2 菌株 | 第37页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 试验仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.5 主要溶液 | 第38-40页 |
| 3.2 方法 | 第40-48页 |
| 3.2.1 ZmSTK1互作网络分析 | 第40页 |
| 3.2.2 RNA提取及反转录c DNA | 第40-41页 |
| 3.2.3 目的及捕获基因的扩增 | 第41-44页 |
| 3.2.4 相关载体的构建 | 第44-46页 |
| 3.2.5 酵母细胞转化及阳性克隆子鉴定 | 第46-48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-57页 |
| 3.3.1 蛋白质网络预测及结构域功能分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 花粉总RNA的提取 | 第49-50页 |
| 3.3.3 重组克隆载体的构建与鉴定 | 第50-52页 |
| 3.3.4 重组表达载体的构建与鉴定 | 第52-54页 |
| 3.3.5 诱饵载体pGBKT7-ZmSTK1-USP的毒性和自激活检测 | 第54-56页 |
| 3.3.6 ZmSTK1-USP互作蛋白的验证 | 第56-57页 |
| 3.4 小结 | 第57-59页 |
| 第四章 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 缩略词 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第67-68页 |
