梅PGIP基因转化盆栽小菊的研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
| 1 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白研究进展 | 第14-23页 |
| ·病原真菌的入侵机制 | 第15-17页 |
| ·植物抗病性的分子机理 | 第17-18页 |
| ·植物抗真菌病害的方法 | 第18-19页 |
| ·PGIP的结构 | 第19-20页 |
| ·PGIP的发现及其在植物甲存在的广泛性 | 第20页 |
| ·PGIP的生物学功能 | 第20-21页 |
| ·PGIP基因的表达与调控 | 第21-22页 |
| ·PGIP基因在植物抗病育种中的应用 | 第22-23页 |
| 2 菊花遗传转化研究进展 | 第23-28页 |
| ·转基因技术在菊花中的应用进展 | 第24-26页 |
| ·花色改良 | 第24页 |
| ·株型改良 | 第24-25页 |
| ·花期改良 | 第25页 |
| ·抗性改良 | 第25-26页 |
| ·提高抗逆性 | 第25页 |
| ·提高抗病虫性 | 第25-26页 |
| ·转基因花卉存在的问题 | 第26-27页 |
| ·提高转化率 | 第26页 |
| ·提高对外源基因表达的调控能力 | 第26页 |
| ·外源基因的稳定性 | 第26-27页 |
| ·转基因花卉的安全性问题 | 第27页 |
| ·展望 | 第27-28页 |
| 3 本研究的主要内容及意义 | 第28-30页 |
| ·目的意义 | 第28-29页 |
| ·主要内容 | 第29页 |
| ·本研究的技术路线 | 第29-30页 |
| 第二部分 试验研究 | 第30-65页 |
| 第一章 菊花高频再生体系的建立 | 第30-40页 |
| 摘要 | 第30页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·无菌系的建立 | 第30-31页 |
| ·无菌苗的获得 | 第30-31页 |
| ·继代增殖 | 第31页 |
| ·生根培养 | 第31页 |
| ·不同浓度的生长调节剂对菊花愈伤组织诱导的影响 | 第31页 |
| ·不同浓度的生长调节剂对菊花芽诱导的影响 | 第31-32页 |
| ·不同的外植体对芽再生的影响 | 第32页 |
| ·直接诱导芽再生培养基对菊花的影响 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-37页 |
| ·不同浓度的培养基对菊花增殖的影响 | 第33页 |
| ·不同的生根培养基对菊花生根的影响 | 第33-34页 |
| ·不同浓度的生长调节剂对菊花再生的影响 | 第34-37页 |
| ·不同浓度的生长调节剂对愈伤组织诱导的影响 | 第34-35页 |
| ·不同浓度的生长调节剂对芽诱导的影响 | 第35页 |
| ·不同外植体对菊花再生的影响 | 第35-36页 |
| ·直接诱导芽再生培养基对菊花的影响 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-40页 |
| ·菊花高频再生体系的建立的意义 | 第37页 |
| ·影响菊花再生的因素 | 第37-38页 |
| ·基因型 | 第37-38页 |
| ·再生途径 | 第38页 |
| ·激素组合对再生的影响 | 第38页 |
| ·褐化现象 | 第38-40页 |
| 第二章 菊花高频遗传转化体系的建立 | 第40-52页 |
| 摘要 | 第40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·培养基制备 | 第41页 |
| ·菊花抗生素的筛选实验 | 第41-42页 |
| ·根癌农杆菌的活化和工程菌液的制备 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的菊花遗传转化 | 第42页 |
| ·预培养 | 第42页 |
| ·农杆菌浓度和侵染时间 | 第42页 |
| ·共培养 | 第42页 |
| ·延迟培养 | 第42页 |
| ·抗性植株的再生 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·抗生素对菊花的影响 | 第43-46页 |
| ·不同浓度的潮霉素对菊花叶片不定芽分化的影响 | 第43-44页 |
| ·不同浓度的潮霉素对菊花茎段增殖的影响 | 第44页 |
| ·不同浓度的潮霉素对菊花生根的影响 | 第44-45页 |
| ·抗生素的选择加入对菊花叶片再生的影响 | 第45-46页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第46页 |
| ·农杆菌侵染浓度和时间对转化的影响 | 第46-47页 |
| ·侵染浓度对转化的影响 | 第46-47页 |
| ·侵染时间对转化的影响 | 第47页 |
| ·共培养时间对转化率的影响 | 第47-48页 |
| ·延迟培养时间对转化率的影响 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| ·抗生素的选择及选择压的确定 | 第48-49页 |
| ·继代培养对抗性芽再生的影响 | 第49-50页 |
| ·影响菊花转化频率的因素探讨 | 第50页 |
| ·预培养 | 第50页 |
| ·共培养 | 第50页 |
| ·延迟培养 | 第50页 |
| ·菊花遗传转化率低下的原因 | 第50-52页 |
| 第三章 转基因菊花的分子鉴定 | 第52-59页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·转基因菊花的PCR检测 | 第52-54页 |
| ·转基因菊花基因组DNA的提取 | 第52-53页 |
| ·农杆菌质粒DNA的提取 | 第53页 |
| ·PCR反应体系 | 第53-54页 |
| ·转基因菊花的RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| ·RNA的提取 | 第54-55页 |
| ·反转录反应 | 第55页 |
| ·PCR反应 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| ·转基因菊花PCR鉴定 | 第55-56页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR检测 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 转基因菊花的抗病性鉴定 | 第59-65页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·病害症状的观察 | 第59页 |
| ·病原菌分离与纯化 | 第59-60页 |
| ·分离物的致病性测定 | 第60页 |
| ·病原菌形态学观察 | 第60页 |
| ·病原菌产孢表型观察 | 第60页 |
| ·自然寄主上病菌形态观察 | 第60页 |
| ·PCA培养基上病菌形态观察 | 第60页 |
| ·柯赫氏法则验证 | 第60-61页 |
| ·转基因株系的苗期接种实验 | 第61页 |
| ·转基因植株的田间抗病性鉴定 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·菊花黑斑病的症状 | 第62页 |
| ·致病性测定 | 第62-63页 |
| ·病原菌分离、菌落及其形态特征 | 第63页 |
| ·柯赫氏法则验证 | 第63-64页 |
| ·转基因株系的抗病性鉴定 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
