| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·转基因植物生物安全性问题 | 第12-15页 |
| ·转基因植物生物安全性涉及的重要问题 | 第13页 |
| ·目前解决转基因植物生物安全性问题的手段 | 第13-15页 |
| ·位点特异性重组系统 | 第15-19页 |
| ·位点特异性重组酶的种类 | 第15-16页 |
| ·位点特异性重组酶的作用机制 | 第16页 |
| ·位点特异性重组系统在植物生物安全控制的应用 | 第16-19页 |
| ·核定位信号 | 第19-24页 |
| ·蛋白质的主动入核机制 | 第19-20页 |
| ·可作用于植物细胞的核定位信号 | 第20-21页 |
| ·核定位信号对位点特异性重组酶删除效率的影响 | 第21-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-28页 |
| ·论文研究的立题依据和目的意义 | 第24-26页 |
| ·论文的技术路线 | 第26-28页 |
| 第三章 材料与方法 | 第28-40页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株和质粒载体 | 第28页 |
| ·主要化学试剂和仪器设备 | 第28-29页 |
| ·主要缓冲液和培养基配方 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-40页 |
| ·引物设计及序列合成 | 第30-33页 |
| ·载体构建 | 第33-35页 |
| ·烟草遗传转化 | 第35-36页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| ·转基因植物GUS组织染色 | 第37页 |
| ·转基因烟草的核蛋白提取 | 第37-38页 |
| ·GUS酶活性测定 | 第38-39页 |
| ·转基因发根的形态观察 | 第39页 |
| ·删除效率的统计比较 | 第39-40页 |
| 第四章 结果与分析 | 第40-64页 |
| 第一部分 不同NLS协助蛋白入核效率的比较分析 | 第40-56页 |
| ·载体构建 | 第40-47页 |
| ·不同种类NLS的选择与获得 | 第40-42页 |
| ·融合基因GFP::GUS的构建 | 第42-44页 |
| ·含不同核定位信号的融合基因的构建 | 第44-47页 |
| ·转基因烟草植株的获得及鉴定 | 第47-51页 |
| ·GUS组织染色的初步鉴定 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第48-51页 |
| ·融合不同NLS的转基因烟草的表达分析 | 第51-56页 |
| ·转基因植株GUS组织染色观察结果 | 第51-52页 |
| ·转基因植株的GFP荧光观察 | 第52-54页 |
| ·定量比较不同NLS融合表达系统的核内表达差异 | 第54-56页 |
| 第二部分 NLS对重组酶删除效率影响的初步研究 | 第56-64页 |
| ·重组酶表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·发根农杆菌介导重组酶二次转化含特异识别位点的GUS阳性烟草 | 第57-64页 |
| ·含特异识别位点的GUS阳性烟草的获得 | 第57-58页 |
| ·发根农杆菌介导的烟草二次遗传转化及再生克隆子的形态学鉴定 | 第58页 |
| ·再生发根中重组酶删除的有效性鉴定 | 第58-60页 |
| ·转重组酶基因再生发根删除效率的统计 | 第60-62页 |
| ·核定位信号SV40NLS对重组酶Cre删除效率的影响 | 第62-64页 |
| 第五章 讨论 | 第64-68页 |
| ·选择合适的核定位信号的研究意义 | 第64-65页 |
| ·NLS促进融合蛋白入核效率的研究 | 第65-66页 |
| ·NLS对重组酶的影响 | 第66-68页 |
| 第六章 结论 | 第68-70页 |
| ·筛选得到协助蛋白高效入核的NLS | 第68页 |
| ·NLS加快重组酶删除反应速率 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 缩略词表 | 第75-76页 |
| 硕士期间发表论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
