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东亚飞蝗免疫组织和中枢神经组织cDNA文库的构建与分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
缩略词第7-12页
1 绪论第12-26页
   ·引言第12-13页
   ·昆虫对病原真菌免疫反应研究进展第13-15页
     ·昆虫免疫反应的组织和免疫反应发生的时间第13-14页
     ·诱导昆虫免疫反应的接种方式第14页
     ·蝗虫免疫反应研究进展第14-15页
   ·昆虫神经系统研究进展第15-17页
     ·昆虫的神经系统第15-16页
     ·昆虫神经系统与杀虫剂第16-17页
     ·飞蝗神经分子生物学研究进展第17页
   ·全长 cDNA 文库第17-19页
   ·均一化技术研究现状第19-21页
     ·常用的均一化技术第19-20页
     ·基于DSN 的均一化技术第20-21页
   ·研究目的第21-22页
   ·研究内容和技术路线第22-25页
     ·研究内容第22-23页
     ·技术路线第23-25页
   ·本研究的创新之处第25-26页
2 材料与方法第26-40页
   ·材料第26-28页
     ·供试昆虫第26页
     ·菌株和载体第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要溶液配制第28页
   ·真菌侵染的东亚飞蝗血细胞、脂肪体均一化 cDNA 文库构建与 分析第28-37页
     ·绿僵菌孢悬液的制备与东亚飞蝗的侵染第28页
     ·东亚飞蝗脂肪体和血淋巴的收集第28-29页
     ·东亚飞蝗脂肪体和血淋巴总RNA 提取及mRNA 分离第29-30页
     ·cDNA 一链的合成第30-31页
     ·cDNA 第二链的合成第31页
     ·cDNA 的均一化第31-32页
     ·cDNA 片段的酶切和分级分离第32页
     ·pDNR-LIB 载体制备第32-34页
     ·cDNA 与载体pDNR-LIB 连接第34页
     ·转化第34-36页
     ·文库质量的鉴定第36-37页
     ·文库测序及序列注释第37页
   ·东亚飞蝗中枢神经系统转录组分析第37-40页
     ·组织的分离第37-38页
     ·中枢神经系统总RNA 提取及mRNA 分离第38页
     ·东亚飞蝗中枢神经系统均一化cDNA 文库的构建第38页
     ·文库大量测序、序列分析及转录组注释第38-40页
3 结果与分析第40-59页
   ·真菌侵染的东亚飞蝗血细胞、脂肪体均一化 cDNA 文库构建 与分析第40-48页
     ·RNA 的提取、cDNA 的合成及均一化处理第40-41页
     ·文库滴度、重组率和插入片段大小分析第41-42页
     ·EST 序列分析与功能聚类第42-48页
   ·东亚飞蝗中枢神经系统转录组分析第48-59页
     ·RNA 的提取、cDNA 的合成及均一化处理第48-49页
     ·文库滴度、重组率和插入片段大小分析第49页
     ·EST 大规模测序及分析第49-51页
     ·EST 序列比对、注释第51-59页
4 讨论第59-63页
   ·真菌侵染东亚飞蝗及侵染后飞蝗脂肪体和血细胞取材时间的确定第59-60页
   ·均一化文库构建第60-61页
   ·绿僵菌自然侵染的东亚飞蝗血细胞和脂肪体均一化 cDNA 文 库测序部分序列功能分析第61-62页
   ·东亚飞蝗神经组织转录组分析第62-63页
5 结论及后续工作建议第63-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-73页
附录第73页

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