| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-29页 |
| ·流行性乙型脑炎概况 | 第12页 |
| ·流行性乙型脑炎的危害 | 第12-13页 |
| ·流行性乙型脑炎的病原与流行病学 | 第13-16页 |
| ·流行现状 | 第13-14页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的致病性与免疫性 | 第16-17页 |
| ·致病性 | 第16-17页 |
| ·免疫性 | 第17页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的抗原特性 | 第17页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的分子生物学特性 | 第17-21页 |
| ·基因组结构与功能 | 第17-18页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒蛋白的结构与功能 | 第18-21页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的诊断 | 第21-25页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第22页 |
| ·病毒的血清学诊断 | 第22-24页 |
| ·常规抗原检查方法 | 第24-25页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的防治 | 第25-26页 |
| ·JEV单克隆抗体的研究进展 | 第26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-29页 |
| 第二章 JEV E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第29-50页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·病毒与细胞 | 第29页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要设备 | 第29-30页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-39页 |
| ·重组JEV E蛋白的表达与纯化 | 第33页 |
| ·小鼠免疫 | 第33-34页 |
| ·筛选方法(间接ELISA检测方法)的建立 | 第34-35页 |
| ·细胞制备 | 第35-36页 |
| ·细胞融合 | 第36页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体生物学特性的鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·重组JEV E蛋白的表达和纯化结果 | 第39-40页 |
| ·重组JEV E蛋白combinan包被ELISA方法最佳工作条件的建立 | 第40-41页 |
| ·小鼠免疫结果 | 第41页 |
| ·单克隆抗体的筛选与杂交瘤细胞株的建立 | 第41-42页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体的鉴定 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-49页 |
| ·免疫原的制备 | 第44-45页 |
| ·小鼠免疫 | 第45页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第45-46页 |
| ·细胞融合 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆 | 第47页 |
| ·污染问题 | 第47页 |
| ·抗JEV E蛋白单克隆抗体的应用前景 | 第47-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 第三章 JEV E蛋白单克隆抗体5D4重链可变区 | 第50-61页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·细胞、质粒及菌株 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·溶液配制 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·引物设计 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-56页 |
| ·杂交瘤细胞总RNA的提取 | 第52页 |
| ·逆转录合成cDNA第一条链 | 第52-53页 |
| ·反转录产物的PCR反应(VH基因的扩增) | 第53页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第53页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第53-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·杂交瘤细胞总RNA的提取 | 第56页 |
| ·VH基因片段的扩增与鉴定 | 第56页 |
| ·pMD18-T VH重组质粒的筛选与鉴定 | 第56-57页 |
| ·VH基因的序列分析 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·RNA的提取 | 第58-59页 |
| ·引物设计的影响 | 第59页 |
| ·RT-PCR条件的优化 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 全文结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |