盐芥激活标签突变体库的构建和筛选及盐芥ftsH8基因功能研究
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
| 1. 植物功能基因组学 | 第10-13页 |
| ·功能基因组学的研究内容 | 第10-11页 |
| ·功能基因组学的主要研究技术 | 第11-13页 |
| ·基因芯片技术 | 第11页 |
| ·EST 技术 | 第11-12页 |
| ·基因表达系列分析 | 第12页 |
| ·蛋白质组学技术 | 第12页 |
| ·反向遗传学技术 | 第12页 |
| ·生物信息学 | 第12-13页 |
| 2. 突变体诱变技术的研究进展 | 第13-17页 |
| ·自发突变产生突变体 | 第14页 |
| ·物理化学法诱变突变体 | 第14-15页 |
| ·DNA 标签法诱变突变体 | 第15-17页 |
| ·T-DNA tagging 法 | 第15-16页 |
| ·转座子系统 | 第16-17页 |
| 3. 激活标签 | 第17-20页 |
| ·激活标签和功能基因的冗余 | 第18页 |
| ·由激活标签识别的过量表达的突变体 | 第18-19页 |
| ·激活标签的展望 | 第19-20页 |
| 4. 基因沉默 | 第20-21页 |
| 5. ftsH8 基因研究进展 | 第21-26页 |
| ·ftsH8 基因家族和表达 | 第21页 |
| ·FtsH 的结构 | 第21-22页 |
| ·叶绿体 FtsH 的生物学功能 | 第22-23页 |
| ·从 ftsH8 基因灭活和过量表达中得到的信息 | 第23-24页 |
| ·FtsH 作用机制 | 第24-26页 |
| 第二部分 实验论文 | 第26-45页 |
| 第一章 盐芥激活标签突变体库的筛选与构建 | 第26-42页 |
| 1. 实验材料 | 第26-27页 |
| 2. 实验方法 | 第27-33页 |
| ·花浸染法转化盐芥 | 第27-29页 |
| ·盐芥的种植 | 第27-28页 |
| ·转化用农杆菌的准备 | 第28-29页 |
| ·Floral dip 法转化盐芥 | 第29页 |
| ·Basta 抗性苗的筛选 | 第29页 |
| ·盐芥DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·TAIL-PCR 法扩增侧翼序列 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第30页 |
| ·TAIL-PCR 反应体系 | 第30-31页 |
| ·TAIL-PCR 反应程序 | 第31页 |
| ·GeneClean 法回收 DNA 片段 | 第31页 |
| ·PCR 产物与T-载体的连接 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌 DH5α 感受态细胞的制备和转化 | 第32页 |
| ·质粒的提取及酶切验证 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物测序及序列分析 | 第33页 |
| ·激活标记突变体种子的收获与保存 | 第33页 |
| 3. 实验结果及分析 | 第33-40页 |
| ·激活标记载体四个串联增强子的PCR 检测 | 第33-34页 |
| ·盐芥的萌发与春化 | 第34-35页 |
| ·Basta 抗性苗的获得 | 第35页 |
| ·TAIL-PCR 法扩增侧翼序列 | 第35-36页 |
| ·酶切验证 | 第36-37页 |
| ·侧翼序列的测序及序列分析 | 第37-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| ·盐芥的转化 | 第40页 |
| ·T1 代盐芥表型分析 | 第40-41页 |
| ·TAIL-PCR 的优化 | 第41页 |
| ·今后的工作 | 第41-42页 |
| 第二章 盐芥基因 ftsH8 功能研究 | 第42-45页 |
| 1. 实验材料 | 第42页 |
| 2. 实验方法 | 第42页 |
| ·盐芥的种植 | 第42页 |
| ·Basta 处理 | 第42页 |
| ·盐芥种子的采收 | 第42页 |
| 3. 实验结果 | 第42-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-45页 |
| ·叶片黄化及消失的原因 | 第43页 |
| ·盐芥 ftsH8 基因的功能 | 第43页 |
| ·今后的工作 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
