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平邑甜茶SnRK1基因的克隆、表达及其功能的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
1. 前言第14-24页
   ·酵母中蔗糖非发酵蛋白激酶及动物中的同源基因第14-15页
   ·植物中蔗糖非发酵蛋白激酶的同源基因第15-18页
   ·植物蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1(SnRK1)作用底物及活性调控第18-19页
   ·SnRK1 调控基因的表达第19-20页
   ·SnRK1 与植物的发育、糖信号响应及参与细胞代谢和循环第20-23页
     ·植物中的糖信号及其对碳氮代谢基因的调控第20-22页
     ·SnRK1 在相关信号转导和发育过程中的作用第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
2. 材料与方法第24-40页
   ·实验材料第24-27页
     ·植物材料与处理第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·酶及生化试剂第24-25页
     ·PCR 引物第25-26页
     ·培养基第26-27页
   ·实验方法第27-40页
     ·植物材料总 RNA 的提取第27-28页
     ·反转录cDNA 第一链的合成(用于3′RACE)第28页
     ·反转录cDNA 第一链的合成(用于5′RACE)第28-29页
     ·SnRK1 的α亚基编码基因的cDNA 全长基因序列的获得第29-31页
       ·3′端基因片段的克隆第29页
       ·5′RACE 获得5′端基因序列第29-30页
       ·MhSnRK1 全长序列的克隆第30-31页
     ·βγ亚基编码基因AKINβγ的cDNA 3′端基因序列的获得第31页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第31-32页
     ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第32页
     ·碱法小量质粒 DNA 的提取第32-33页
     ·DNA 序列测定第33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第33-34页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化第34-35页
     ·基因组 DNA 提取(CTAB 法)第35-36页
     ·MhSnRK1 正、反义表达载体的构建第36页
     ·实时荧光定量 PCR第36-38页
     ·‘S 以12 粉’番茄的转化第38页
     ·转基因植株的检测第38页
     ·转基因植株果实内含物的测定第38-39页
     ·转基因植株果实发育期变化和叶片淀粉的测定第39页
     ·本研究使用的软件第39-40页
3 结果与分析第40-61页
   ·平邑甜茶SnRK1 的α亚基编码基因(MhSnRK1)的分离第40-41页
     ·MhSnRK1 3′端基因片段的分离第40页
     ·MhSnRK1 5′片段的分离第40页
     ·MhSnRK1 全长cDNA 的分离第40-41页
   ·SnRK1 的βγ亚基编码基因(AKINβγ)cDNA 3′端基因序列的分离第41-43页
   ·SnRK1 的α亚基编码基因(MhSnRK1)的序列分析第43-50页
   ·基因表达特性分析第50-53页
     ·MhSnRK1 和MhAKINβγ在不同组织中的表达第50-51页
     ·硝态氮和PEG 处理对MhSnRK1 和MhAKINβγ在不同组织中的表达的影响第51-53页
   ·转基因番茄表达载体 pBI121-MhSnRK1 的构建及转基因番茄的鉴定第53-57页
   ·正义转基因番茄果实内含物的测定第57页
   ·正义转基因植株果实发育期的变化及叶片淀粉含量日变化的测定第57-61页
4 讨论第61-65页
   ·MhSnRK1和MhAKINβγ基因分别编码平邑甜茶蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1的α和βγ亚基并具有相似的表达特性第61-63页
   ·MhSnRK1 对转基因番茄果实内含物、果实发育期和叶片淀粉含量日变化产生显著影响第63-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-77页
致谢第77-78页
硕士在读期间形成的论文第78页

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