中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
1. 前言 | 第14-24页 |
·酵母中蔗糖非发酵蛋白激酶及动物中的同源基因 | 第14-15页 |
·植物中蔗糖非发酵蛋白激酶的同源基因 | 第15-18页 |
·植物蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1(SnRK1)作用底物及活性调控 | 第18-19页 |
·SnRK1 调控基因的表达 | 第19-20页 |
·SnRK1 与植物的发育、糖信号响应及参与细胞代谢和循环 | 第20-23页 |
·植物中的糖信号及其对碳氮代谢基因的调控 | 第20-22页 |
·SnRK1 在相关信号转导和发育过程中的作用 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2. 材料与方法 | 第24-40页 |
·实验材料 | 第24-27页 |
·植物材料与处理 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·酶及生化试剂 | 第24-25页 |
·PCR 引物 | 第25-26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-40页 |
·植物材料总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
·反转录cDNA 第一链的合成(用于3′RACE) | 第28页 |
·反转录cDNA 第一链的合成(用于5′RACE) | 第28-29页 |
·SnRK1 的α亚基编码基因的cDNA 全长基因序列的获得 | 第29-31页 |
·3′端基因片段的克隆 | 第29页 |
·5′RACE 获得5′端基因序列 | 第29-30页 |
·MhSnRK1 全长序列的克隆 | 第30-31页 |
·βγ亚基编码基因AKINβγ的cDNA 3′端基因序列的获得 | 第31页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第31-32页 |
·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第32页 |
·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第32-33页 |
·DNA 序列测定 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第34-35页 |
·基因组 DNA 提取(CTAB 法) | 第35-36页 |
·MhSnRK1 正、反义表达载体的构建 | 第36页 |
·实时荧光定量 PCR | 第36-38页 |
·‘S 以12 粉’番茄的转化 | 第38页 |
·转基因植株的检测 | 第38页 |
·转基因植株果实内含物的测定 | 第38-39页 |
·转基因植株果实发育期变化和叶片淀粉的测定 | 第39页 |
·本研究使用的软件 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-61页 |
·平邑甜茶SnRK1 的α亚基编码基因(MhSnRK1)的分离 | 第40-41页 |
·MhSnRK1 3′端基因片段的分离 | 第40页 |
·MhSnRK1 5′片段的分离 | 第40页 |
·MhSnRK1 全长cDNA 的分离 | 第40-41页 |
·SnRK1 的βγ亚基编码基因(AKINβγ)cDNA 3′端基因序列的分离 | 第41-43页 |
·SnRK1 的α亚基编码基因(MhSnRK1)的序列分析 | 第43-50页 |
·基因表达特性分析 | 第50-53页 |
·MhSnRK1 和MhAKINβγ在不同组织中的表达 | 第50-51页 |
·硝态氮和PEG 处理对MhSnRK1 和MhAKINβγ在不同组织中的表达的影响 | 第51-53页 |
·转基因番茄表达载体 pBI121-MhSnRK1 的构建及转基因番茄的鉴定 | 第53-57页 |
·正义转基因番茄果实内含物的测定 | 第57页 |
·正义转基因植株果实发育期的变化及叶片淀粉含量日变化的测定 | 第57-61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
·MhSnRK1和MhAKINβγ基因分别编码平邑甜茶蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1的α和βγ亚基并具有相似的表达特性 | 第61-63页 |
·MhSnRK1 对转基因番茄果实内含物、果实发育期和叶片淀粉含量日变化产生显著影响 | 第63-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
硕士在读期间形成的论文 | 第78页 |