| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-42页 |
| 1 研究目的与意义 | 第15-18页 |
| ·甾体及其酯的存在与分布 | 第15页 |
| ·胆固醇与人类健康 | 第15-17页 |
| ·胆固醇在人体生理代谢中的重要作用 | 第15-16页 |
| ·人体胆固醇代谢概况 | 第16-17页 |
| ·胆固醇酯酶在临床血清总胆固醇测定中的意义 | 第17-18页 |
| ·临床血清总胆固醇测定的意义 | 第17-18页 |
| 2 国内外研究进展 | 第18-36页 |
| ·血液胆固醇(酯)测定的研究进展 | 第18-25页 |
| ·酶法检测 | 第19-23页 |
| ·化学法 | 第23-24页 |
| ·同位素稀释质谱(ID/MS)分析 | 第24-25页 |
| ·酯酶及其研究状况 | 第25-29页 |
| ·胆固醇酯酶的研究进展 | 第29-36页 |
| ·酶源开发与筛选 | 第30-31页 |
| ·胆固醇酯酶结构的研究 | 第31-33页 |
| ·胆固醇酯酶与人体代谢的一些研究 | 第33-34页 |
| ·胆固醇酯酶酶学特性研究 | 第34-36页 |
| 3 研究内容和目标 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 第二章 胆固醇酯酶高产菌的筛选与鉴定 | 第42-56页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·待分离样品 | 第42页 |
| ·溶液与试剂 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·溶液配制 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·筛选培养基 | 第42-43页 |
| ·发酵培养基 | 第43页 |
| ·增殖培养基 | 第43页 |
| ·发酵培养基 | 第43页 |
| ·鉴定用培养基 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-47页 |
| ·菌种筛选方法 | 第43-44页 |
| ·富集培养 | 第43-44页 |
| ·平板初筛 | 第44页 |
| ·酶法检测复筛 | 第44页 |
| ·表面活性剂对产酶活性影响 | 第44页 |
| ·酶活测定方法 | 第44-45页 |
| ·粗酶液制备 | 第44页 |
| ·标线绘制 | 第44-45页 |
| ·检测 | 第45页 |
| ·鉴定方法 | 第45-47页 |
| ·形态鉴定 | 第45页 |
| ·菌株生长曲线的测定 | 第45页 |
| ·培养特征 | 第45页 |
| ·培养及生理生化鉴定 | 第45-46页 |
| ·分子鉴定 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-54页 |
| ·菌株的分离 | 第47页 |
| ·表面活性剂对产酶活性影响 | 第47-48页 |
| ·鉴定 | 第48-54页 |
| ·形态鉴定 | 第48页 |
| ·菌株生长曲线的测定 | 第48-49页 |
| ·生理生化鉴定 | 第49-50页 |
| ·菌株的系统发育分析 | 第50-54页 |
| 4 小结 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三章 胆固醇酯酶高产菌发酵条件优化研究 | 第56-80页 |
| 1 材料 | 第56-58页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·药品与试剂 | 第56页 |
| ·培养基优化用试剂 | 第56页 |
| ·酶活检测用试剂 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56-57页 |
| ·斜面培养基 | 第56-57页 |
| ·种子培养基 | 第57页 |
| ·发酵培养基 | 第57页 |
| ·优化基础培养基 | 第57页 |
| ·仪器 | 第57-58页 |
| 2 方法 | 第58-64页 |
| ·培养方法 | 第58页 |
| ·酶活测定方法 | 第58页 |
| ·粗酶液制备 | 第58页 |
| ·标线绘制 | 第58页 |
| ·检测 | 第58页 |
| ·生物量测定 | 第58-59页 |
| ·发酵条件的初步优化 | 第59页 |
| ·最佳初始pH的确定 | 第59页 |
| ·最适发酵温度的确定 | 第59页 |
| ·表面活性剂对产酶及酶活影响 | 第59页 |
| ·培养基的优化 | 第59-63页 |
| ·碳源对酶活影响 | 第59-61页 |
| ·氮源对酶活影响 | 第61-62页 |
| ·生长因子对酶活影响 | 第62-63页 |
| ·培养基成分的正交实验 | 第63页 |
| ·培养条件对酶活影响 | 第63-64页 |
| ·培养基pH对产酶活力影响 | 第63-64页 |
| ·培养温度对产酶活力影响 | 第64页 |
| ·通气量对产酶活力影响 | 第64页 |
| ·种子菌龄对产酶活力影响 | 第64页 |
| ·接种量对产酶活力影响 | 第64页 |
| ·培养时间对产酶活力影响 | 第64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-78页 |
| ·最佳初始pH的确定 | 第64-65页 |
| ·最适发酵温度的确定 | 第65-66页 |
| ·表面活性剂对酶活影响 | 第66页 |
| ·培养基的优化 | 第66-74页 |
| ·碳源对酶活影响 | 第66-68页 |
| ·氮源对酶活影响 | 第68-69页 |
| ·微量元素对产酶活性的影响 | 第69-70页 |
| ·复合生长因子对酶活影响 | 第70-72页 |
| ·发酵培养基成分的正交实验结果 | 第72-74页 |
| ·培养条件对酶活影响 | 第74-78页 |
| ·培养基pH对产酶活力影响 | 第74-75页 |
| ·培养温度对产酶活力影响 | 第75页 |
| ·通气量对产酶活力影响 | 第75-76页 |
| ·种子菌龄对产酶活性的影响 | 第76页 |
| ·接种量对产酶活力影响 | 第76-77页 |
| ·培养时间对产酶活力影响 | 第77-78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-80页 |
| 第四章 胆固醇酯酶的分离纯化与鉴定 | 第80-95页 |
| 1 材料 | 第80-82页 |
| ·菌株 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·主要溶液 | 第80-82页 |
| ·酶活力测定试剂 | 第80页 |
| ·蛋白浓度测定试剂 | 第80-81页 |
| ·纯化用溶液 | 第81-82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| 2 方法 | 第82-89页 |
| ·粗酶液制备 | 第82-83页 |
| ·酶活力的测定及酶活力单位的定义 | 第83页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第83页 |
| ·离子交换层析 | 第83-84页 |
| ·DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析 | 第83-84页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第84-86页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B装柱 | 第84-85页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析样品制备 | 第85页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析筛选试验 | 第85页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第85-86页 |
| ·Sephadex G-50凝胶过滤层析 | 第86页 |
| ·凝胶的预处理与装柱 | 第86页 |
| ·Sephadex G-50凝胶过滤层析 | 第86页 |
| ·凝胶层析检测分子量 | 第86页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第86-88页 |
| ·HPLC检测 | 第88-89页 |
| 3 结果 | 第89-93页 |
| ·DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析结果 | 第89页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第89-90页 |
| ·Sephadex G-50凝胶过滤层析结果 | 第90-91页 |
| ·凝胶层析分析胆固醇酯酶分子量 | 第91页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第91页 |
| ·HPLC检测结果 | 第91-93页 |
| 4 小结 | 第93页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
| 第五章 Acinetobacter sp.产胆固醇酯酶酶学特性研究 | 第95-104页 |
| 1 材料 | 第95-96页 |
| ·酶液制备 | 第95页 |
| ·主要试剂 | 第95页 |
| ·溶液与其他试剂 | 第95-96页 |
| ·酶活检测试剂 | 第95页 |
| ·缓冲液的配制 | 第95-96页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| 2 方法 | 第96-97页 |
| ·酶活力的测定及酶活力单位的定义 | 第96页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第96页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第96页 |
| ·温度对酶活性影响 | 第96页 |
| ·温度对酶稳定性影响 | 第96-97页 |
| ·酶的底物特异性 | 第97页 |
| ·底物对酶促反应速度的影响 | 第97页 |
| ·部分化学物质对酶活性的影响 | 第97页 |
| 3 结果 | 第97-101页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第97-98页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第98页 |
| ·温度对酶活性影响 | 第98-99页 |
| ·温度对酶稳定性影响 | 第99页 |
| ·酶的底物特异性 | 第99页 |
| ·底物对酶促反应速度的影响 | 第99-100页 |
| ·部分化学物质对酶活性的影响 | 第100-101页 |
| 4 小结 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-104页 |
| 结论与展望 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 发表文章目录 | 第107页 |
