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农杆菌介导的豌豆花瓣瞬间表达系统的建立及利用该系统对百脉根TCP基因亚细胞定位的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
1. 绪论第10-37页
   ·农杆菌转化植物细胞的机理第10-15页
   ·瞬间表达技术在植物中的应用第15-19页
     ·瞬间表达技术简介第15页
     ·农杆菌转化第15-16页
     ·双元Ti 载体(binary Ti vectors)与共转化(cotransformation)第16-17页
     ·基因枪第17-18页
     ·原生质体转化第18-19页
   ·荧光蛋白标签技术在植物中的应用第19-22页
     ·荧光蛋白简介第19-21页
     ·荧光蛋白标签所在位置对定位结果的影响第21-22页
     ·植物细胞中自发荧光对定位结果的影响第22页
   ·蛋白质向细胞核的运输第22-25页
   ·蛋白质向内质网的运输第25-26页
   ·ABC 模型与豌豆花的原基发育第26-27页
   ·被子植物花的对称性第27-28页
   ·TCP 家族第28-37页
     ·TCP 家族简介第28-29页
     ·CYC/DICH 基因第29-31页
     ·CIN 基因第31-32页
     ·豆科中的cyc-like 基因第32-35页
     ·TB1 基因第35页
     ·PCF 亚家族第35-37页
2. 材料与方法第37-44页
   ·材料与方法第37-44页
     ·植物材料及种植条件第37页
     ·菌株和质粒第37页
     ·试剂第37页
     ·引物合成第37-38页
     ·过表达载体的构建第38-40页
     ·热激法制备农杆菌EHA105 感受态第40-41页
     ·热击法转化农杆菌EHA105第41页
     ·农杆菌菌液注射侵染第41-42页
     ·固定第42-44页
       ·G US 染色第43页
       ·D API 染色第43-44页
3. 实验结果第44-56页
   ·农杆菌介导的豌豆叶片中瞬间表达第44-46页
     ·侵染后培养时间对叶片中瞬间表达结果的影响第44-45页
     ·LjCYC1-GFP 及free GFP 在叶片中瞬间表达得到的亚细胞定位结果第45-46页
   ·农杆菌介导的豌豆花瓣中瞬间表达第46-56页
     ·侵染后培养时间对花瓣中瞬间表达结果的影响第46-47页
     ·TCP 蛋白C 端与YFP 融合后的亚细胞定位第47-50页
     ·TCP 蛋白N 端与CFP 融合后的亚细胞定位第50-52页
     ·不同融合蛋白组合共转化的结果第52-56页
4. 讨论第56-59页
   ·关于农杆菌原位注射瞬间表达的优势及缺陷第56-57页
   ·百脉根TCP 与荧光蛋白融合后的亚细胞定位第57-59页
     ·LjCYC1-YFP 瞬间表达的定位与转基因植株中观察到的结果一致.第57页
     ·CFP 与TCP 蛋白N 端融合可能干扰了TCP 蛋白向细胞核的运输.第57页
     ·百脉根TCP 蛋白间可能存在着相互作用第57-59页
参考文献第59-64页
致谢第64页

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