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家蚕天然彩色茧品种CBP基因的结构和表达分析及类胡萝卜素差异

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 引言第14-34页
   ·家蚕天然彩色茧茧丝特性第15-16页
   ·家蚕有色茧中主要色素物质第16-21页
     ·黄酮类化合物第16-18页
       ·黄酮类化合物的分类第16页
       ·黄酮类化合物的生理功能第16-17页
       ·家蚕黄酮类化合物的提取和分析第17页
       ·家蚕茧中黄酮类化合物的鉴定第17-18页
     ·类胡萝卜素第18-21页
       ·类胡萝卜素的分类第18-19页
       ·类胡萝卜素的生物合成第19-20页
       ·类胡萝卜素的功能和用途第20-21页
       ·类胡萝卜素的提取和定量分析第21页
   ·动物体内类胡萝卜素的吸收和代谢第21-24页
     ·类胡萝卜素的吸收途径第22-23页
     ·类胡萝卜素的转移和代谢第23-24页
     ·类胡萝卜素在家蚕体内的分布第24页
   ·家蚕茧色形成相关基因的研究进展第24-32页
     ·家蚕黄茧色决定基因第25-31页
       ·黄血抑制基因I第25-26页
       ·黄血基因Y第26-30页
       ·外层黄茧基因C第30-31页
     ·绿茧及其它茧色相关基因第31-32页
   ·本文要解决的问题第32-34页
第二章 常用实验技术第34-45页
   ·试剂配制第34-36页
   ·家蚕总RNA的分离和质量检测第36-38页
   ·家蚕基因组DNA的提取和质量鉴定第38-39页
   ·CBP基因片段的扩增、克隆和序列分析第39-41页
     ·cDNA第一链合成第39页
     ·RT-PCR分析第39页
     ·PCR分析第39页
     ·PCR产物的克隆测序分析第39-40页
     ·感受态大肠杆菌细胞的制备第40页
     ·质粒抽提和酶切鉴定第40-41页
   ·家蚕组织中类胡萝卜素的分离第41页
   ·染色体原位杂交第41-43页
     ·Nick translation方法合成荧光染料标记的DNA第41-42页
     ·减数分裂粗线期细胞的制备第42页
     ·荧光原位杂交流程第42-43页
   ·Southern杂交第43-44页
     ·基因组DNA的消化第43页
     ·Southern blotting步骤第43-44页
   ·序列分析第44-45页
第三章 家蚕CBP基因的结构和发育表达分析第45-76页
   ·材料和方法第46-51页
     ·实验材料第46-49页
       ·家蚕品种第46-47页
       ·实验仪器第47页
       ·常用化学试剂和材料第47-48页
       ·生化试剂第48页
       ·酶类第48页
       ·试剂盒类第48-49页
       ·Marker第49页
       ·克隆菌株第49页
     ·实验方法第49-51页
   ·结果与分析第51-73页
     ·家蚕总RNA和基因组DNA的质量鉴定第51-52页
     ·家蚕CBP基因序列的比较分析第52-56页
       ·CBP全基因序列的品种差异第52-54页
       ·CBP mRNA表达的差异和编码区分析第54-56页
     ·实验分析家蚕不同品种CBP基因的内含子结构第56-58页
     ·家蚕CBP的发育表达分析第58-63页
       ·2L和3L期CBP表达分析第58-59页
       ·4L期CBP表达分析第59-61页
       ·5L期CBP表达分析第61-62页
       ·蛹期CBP表达分析第62-63页
     ·家蚕N4品种CBP表达分析第63-65页
       ·CBP在N4品种的发育表达分析第63-64页
       ·N4品种5L-4d组织CBP表达分析第64-65页
       ·使用文献中公布引物调查N4品种丝腺和中肠CBP表达第65页
     ·高保真酶扩增家蚕CBP mRNA第65-66页
     ·Southern blotting分析CBP基因拷贝数第66-71页
       ·家蚕基因组DNA消化和Southern杂交探针的制备第67-68页
       ·CBP基因拷贝数的确定第68-71页
     ·CBP基因染色体定位初探第71-73页
   ·讨论第73-75页
     ·CBP基因结构和表达在家蚕茧色品种间具有特异性和复杂性第73-74页
     ·CBP基因的特异序列可以作为潜在的茧色分子标记第74-75页
     ·家蚕CBP可能具有其它的生理功能第75页
   ·结论第75-76页
第四章 家蚕茧色品种间类胡萝卜素差异分析第76-89页
   ·材料和方法第76-77页
     ·实验材料第76-77页
       ·实验品种第76页
       ·实验试剂第76-77页
       ·实验仪器第77页
     ·实验方法第77页
   ·结果与分析第77-85页
     ·类胡萝卜素标品和部分样品的紫外可见吸收光谱比较第77-78页
     ·家蚕白茧品种组织间类胡萝卜素的分析第78-79页
     ·家蚕绿茧品种组织间类胡萝卜素的分析第79-81页
     ·家蚕黄茧品种组织间类胡萝卜素的分析第81-84页
     ·定量分析部分品种类胡萝卜素的含量第84-85页
   ·讨论第85-88页
     ·紫外可见分光光度法可用于家蚕类胡萝卜素的定性和定量分析第85-87页
     ·家蚕类胡萝卜素分布特征反映出了茧色的差异第87-88页
     ·家蚕体内类胡萝卜素的分布同步于CBP基因的表达第88页
   ·结论第88-89页
第五章 CBP基因位点的多转录本分析和鉴定第89-110页
   ·实验材料和方法第89-90页
     ·实验材料第89页
     ·实验方法第89-90页
   ·结果与分析第90-102页
     ·不同茧色品种间CBP mRNA表达的差别第90-91页
     ·黄茧品种CBP mRNA多转录本序列的初步调查第91-93页
     ·N4品种CBP-like transcripts序列的调查分析第93-96页
     ·CBP mRNA 5'非翻译区的鉴定分析第96-100页
     ·Novel CBP transcripts的表达分析第100-102页
   ·讨论第102-109页
     ·Clustered transcription产生多个CBP-like转录产物第103-104页
     ·转录产物丰富的CBP基因位点第104-107页
     ·CBP基因位点多转录产物的功能第107-109页
   ·结论第109-110页
第六章 综合结论和创新点第110-111页
参考文献第111-120页
攻读学位期间公开发表的论文、专利、标准第120-121页
攻读学位期间在NCBI GenBank上登录的序列第121-122页
攻读学位期间参与的科研项目第122-123页
附录1 部分家蚕品种5L-5d丝腺照片第123-124页
附录2 部分家蚕品种蚕茧照片第124-125页
附录3 部分彩色茧家蚕品种组织间类胡萝卜素分析第125-128页
附录4 英文名词缩写第128-129页
附录5 资助项目第129-130页
致谢第130页

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