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hMSCs与Col及Col-HA支架体外复合构建软骨及软骨下骨的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-21页
   ·引言第12页
   ·软骨、骨组织的细胞生理学第12-14页
     ·软骨与软骨细胞第12-13页
     ·骨细胞与成骨化第13-14页
   ·骨组织再生工程第14-16页
     ·骨、软骨再生的临床需要第14页
     ·MSCs 在软骨修复工程中的应用第14-16页
     ·MSCs 在骨修复工程中的应用第16页
   ·生物支架材料第16-19页
     ·软骨修复中的生物支架材料第16-18页
     ·骨修复中的生物支架材料第18-19页
   ·本实验研究背景及研究意义第19页
   ·本课题的主要研究内容第19-21页
第二章 人骨髓间充质干细胞的分离纯化及鉴定第21-26页
   ·引言第21页
   ·实验仪器与试剂第21-22页
     ·实验仪器与耗材第21页
     ·实验试剂第21-22页
   ·实验方法和步骤第22-23页
     ·hMSCs 的分离培养第22-23页
     ·流式细胞术鉴定hMSCs 表面标志第23页
   ·实验结果第23-24页
     ·hMSCs 的分离培养第23-24页
     ·流式细胞术鉴定hMSCs 的表面标志第24页
   ·分析和讨论第24-25页
   ·本章小结第25-26页
第三章 hMSCs 成软骨、成骨诱导体系的建立第26-47页
   ·引言第26页
   ·实验仪器与试剂第26-30页
     ·实验仪器与耗材第26-27页
     ·实验试剂第27-30页
   ·实验方法和步骤第30-36页
     ·hMSCs 成软骨诱导第30页
     ·石蜡包埋切片第30页
     ·阿辛蓝染色鉴定hMSCs 的成软骨诱导第30页
     ·II 型胶原免疫组织化学染色鉴定hMSCs 的成软骨诱导第30-31页
     ·糖胺聚糖(GAGs)定量第31页
     ·实时定量PCR 检测成软骨相关基因的表达第31-33页
     ·hMSCs 成骨诱导第33页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定hMSCs 成骨诱导第33页
     ·茜素红染色鉴定hMSCs 成骨诱导第33页
     ·I 型胶原免疫组织化学染色鉴定hMSCs 成骨诱导第33页
     ·细胞总蛋白的提取第33-34页
     ·碱性磷酸酶(ALP)定量第34页
     ·总蛋白定量第34页
     ·实时定量PCR 检测成骨相关基因的表达第34-36页
     ·统计学处理第36页
   ·实验结果第36-42页
     ·hMSCs 成软骨诱导第36页
     ·阿辛蓝染色鉴定hMSCs 成软骨诱导第36-37页
     ·II 型胶原免疫组织化学染色鉴定hMSCs 成软骨诱导第37页
     ·糖胺聚糖(GAGs)定量第37-38页
     ·成软骨相关基因的表达第38-39页
     ·hMSCs 成骨诱导第39-40页
     ·碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定hMSCs 成骨诱导第40页
     ·茜素红S 染色鉴定hMSCs 成骨诱导第40页
     ·I 型胶原免疫组织化学鉴定hMSCs 成骨诱导第40-41页
     ·碱性磷酸酶(ALP)定量鉴定hMSCs 成骨诱导第41-42页
     ·成骨相关基因的表达第42页
   ·分析和讨论第42-45页
   ·本章小结第45-47页
第四章 hMSCs 与 Col 支架复合构建关节软骨的研究第47-62页
   ·引言第47页
   ·实验仪器与试剂第47-50页
     ·实验仪器与耗材第47-48页
     ·实验试剂第48-50页
   ·实验方法和步骤第50-54页
     ·hMSCs 与生物支架材料复合第50页
     ·MTT 法测定hMSCs 在生物支架材料上的增殖第50-51页
     ·hMSCs 在生物支架材料上的成软骨诱导第51页
     ·石蜡包埋与切片第51页
     ·阿辛蓝染色鉴定生物支架材料促成软骨诱导第51页
     ·II 型胶原免疫组织化学染色鉴定生物支架材料促成软骨诱导第51页
     ·糖胺聚糖定量第51-52页
     ·实时定量PCR 检测hMSCs 复合材料后成软骨相关基因的表达第52-53页
     ·统计学处理第53-54页
   ·实验结果第54-58页
     ·MTT 法测定hMSCs 在生物支架材料上的增殖第54页
     ·hMSCs 与生物支架材料复合成软骨诱导的石蜡切片染色第54-55页
     ·阿辛蓝染色鉴定生物支架材料促成软骨诱导第55-56页
     ·II 型胶原免疫组织化学染色鉴定生物支架材料促成软骨诱导第56-57页
     ·成软骨相关基因的表达第57-58页
   ·分析和讨论第58-60页
   ·本章小结第60-62页
第五章 hMSCs 与 Col-HA 支架复合构建软骨下骨的研究第62-76页
   ·引言第62页
   ·实验仪器与试剂第62-65页
   ·实验方法和步骤第65-69页
     ·hMSCs 在生物支架材料上的复合与成骨诱导第65页
     ·石蜡包埋与切片第65页
     ·碱性磷酸酶染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第65-66页
     ·茜素红染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第66页
     ·I 型胶原免疫组织化学染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第66页
     ·hMSCs 复合生物支架材料总蛋白的提取第66页
     ·hMSCs 复合生物支架材料碱性磷酸酶定量第66页
     ·hMSCs 复合生物支架材料总蛋白定量第66页
     ·实时定量PCR 检测hMSCs 复合材料后成骨相关基因的表达第66-68页
     ·统计学处理第68-69页
   ·实验结果第69-73页
     ·hMSCs 与生物支架材料复合成软骨诱导的石蜡切片染色第69页
     ·碱性磷酸酶染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第69-70页
     ·茜素红染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第70-71页
     ·I 型胶原免疫组织化学染色鉴定生物支架材料促成骨诱导第71页
     ·碱性磷酸酶定量第71-72页
     ·hMSCs 复合材料后成骨相关基因的表达第72-73页
   ·分析和讨论第73-75页
   ·本章小结第75-76页
结论与展望第76-79页
参考文献第79-84页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第84-85页
致谢第85页

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