| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-17页 |
| 1 绪论 | 第17-34页 |
| ·课题背景 | 第17-18页 |
| ·课题来源 | 第17页 |
| ·课题的目的和意义 | 第17页 |
| ·课题的研究内容及创新点 | 第17-18页 |
| ·漆酶的研究概况 | 第18-21页 |
| ·漆酶的来源、种类及分布 | 第18页 |
| ·漆酶的结构、特性及其作用机理 | 第18-19页 |
| ·漆酶的应用 | 第19-21页 |
| ·细菌漆酶研究概况 | 第21-28页 |
| ·产漆酶细菌的种类 | 第21-23页 |
| ·产漆酶细菌筛选方法进展 | 第23-24页 |
| ·细菌漆酶酶学性质的研究方法进展 | 第24-26页 |
| ·细菌漆酶应用的研究进展 | 第26-28页 |
| ·细菌漆酶的分子生物学研究进展 | 第28页 |
| ·固定化酶技术 | 第28-30页 |
| ·固定化酶的定义 | 第28-29页 |
| ·固定化酶的优点 | 第29页 |
| ·酶的固定化方法 | 第29-30页 |
| ·固定化酶的应用 | 第30页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌表达系统特点 | 第30-31页 |
| ·表达系统的构成 | 第31-32页 |
| ·重组基因的表达特点 | 第32-34页 |
| 2 产漆酶细菌的筛选与鉴定 | 第34-48页 |
| ·实验材料与仪器 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34-35页 |
| ·试剂配制及培养基 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-42页 |
| ·筛选方法 | 第36-37页 |
| ·形态特性研究 | 第37-38页 |
| ·生理生化特性研究 | 第38-39页 |
| ·16S rDNA鉴定 | 第39-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-45页 |
| ·高产漆酶菌株的分离 | 第42页 |
| ·形态及生理生化特性 | 第42-43页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 3 B.subtilis WD23的生物学及其酶学性质研究 | 第48-62页 |
| ·实验材料与仪器 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·试剂与培养基 | 第48页 |
| ·仪器 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·Bacillus subtilis WD23的生物学特性 | 第49页 |
| ·粗提液的制备与酶活测定 | 第49-50页 |
| ·细菌芽孢漆酶酶学性质研究 | 第50-51页 |
| ·细菌芽孢漆酶对染料的脱色实验 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-60页 |
| ·Bacillus subtilis WD23的生物学特性 | 第52-55页 |
| ·产芽孢率与细菌漆酶活性的关系 | 第55-56页 |
| ·细菌芽孢漆酶酶学性质研究 | 第56-59页 |
| ·细菌芽孢漆酶对染料的脱色实验 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 4 细菌芽孢漆酶的固定化及其应用 | 第62-73页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·菌株 | 第62页 |
| ·试剂与培养基 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-67页 |
| ·固定化细菌芽孢漆酶微胶囊的制备 | 第63页 |
| ·微胶囊性能测定方法 | 第63页 |
| ·芽孢漆酶酶活测定方法 | 第63-64页 |
| ·固定化芽孢漆酶酶学性质 | 第64-65页 |
| ·造纸废水黑液的降解试验 | 第65-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-71页 |
| ·微胶囊性能测定 | 第67页 |
| ·固定化芽孢漆酶酶学性质 | 第67-70页 |
| ·造纸废水黑液的降解试验 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 5 B.subtilis WD23的CotA基因的克隆与异源表达 | 第73-108页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·菌株 | 第73页 |
| ·试剂 | 第73页 |
| ·仪器 | 第73-74页 |
| ·试剂配制及培养基 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-84页 |
| ·Bacillus subtilis CotA基因的克隆 | 第74-77页 |
| ·pET22b/CotA重组表达载体的构建及鉴定 | 第77-82页 |
| ·CotA重组蛋白的诱导表达条件的优化 | 第82-84页 |
| ·结果与分析 | 第84-104页 |
| ·CotA基因的PCR扩增 | 第84-85页 |
| ·重组质粒pMD18-T/CotA的构建及鉴定 | 第85-86页 |
| ·pET22b/CotA重组表达载体的构建及鉴定 | 第86-101页 |
| ·CotA重组蛋白的诱导表达条件的优化 | 第101-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·本章小结 | 第106-108页 |
| 6 CotA蛋白的纯化及其酶学特性的研究 | 第108-121页 |
| ·实验材料 | 第108-110页 |
| ·菌种 | 第108页 |
| ·试剂 | 第108页 |
| ·仪器 | 第108页 |
| ·试剂配制 | 第108-110页 |
| ·实验方法 | 第110-114页 |
| ·CotA蛋白的纯化 | 第110-112页 |
| ·CotA漆酶酶学性质的研究 | 第112-113页 |
| ·CotA漆酶对染料的脱色实验 | 第113-114页 |
| ·结果与分析 | 第114-119页 |
| ·CotA蛋白的纯化 | 第114-115页 |
| ·CotA漆酶酶学性质的研究 | 第115-119页 |
| ·CotA漆酶对染料的脱色实验 | 第119页 |
| ·讨论 | 第119页 |
| ·本章小结 | 第119-121页 |
| 结论 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-131页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
