| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一部分 肝癌组织中Mcl-1抗凋亡蛋白的表达及意义 | 第16-26页 |
| 一、前言 | 第16-17页 |
| 二、材料与方法 | 第17-20页 |
| ·研究对象 | 第17-18页 |
| ·仪器与试剂 | 第18-19页 |
| ·免疫组织化学 | 第19-20页 |
| ·结果判定 | 第20页 |
| ·统计学分析 | 第20页 |
| 三、结果 | 第20-24页 |
| ·光镜下观察 | 第20-22页 |
| ·免疫组织化学结果 | 第22-24页 |
| 四、讨论 | 第24-26页 |
| 第二部分 靶向MCl-1的shRNA重组质粒载体的构建及评价 | 第26-42页 |
| 一、前言 | 第26-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| 三、结果 | 第37-39页 |
| ·psiRNA-hH1neo重组质粒酶切电泳鉴定 | 第37-38页 |
| ·psiRNA质粒的浓度和纯度测定 | 第38页 |
| ·不同的shRNA对Mcl-1 mRNA的抑制率 | 第38-39页 |
| 四、讨论 | 第39-42页 |
| 第三部分 生物磁性纳米基因载体的制备和及其与质粒DNA的连接 | 第42-62页 |
| 一、前言 | 第42-43页 |
| 二、材料与方法 | 第43-47页 |
| ·试剂及仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-47页 |
| 三、实验结果 | 第47-58页 |
| ·制备产物Fe_3O_4纳米粒子形貌表征 | 第47-52页 |
| ·PLL修饰Fe_3O_4纳米粒子与DNA的结合效率测定结果 | 第52-54页 |
| ·PLL修饰Fe_3O_4纳米粒子对DNA的保护实验结果 | 第54-55页 |
| ·PLL修饰Fe_3O_4纳米粒基因转运体系的细胞毒性实验(MTT) | 第55-56页 |
| ·普鲁士蓝染色结果 | 第56-58页 |
| 四 讨论 | 第58-62页 |
| 第四部分 磁性纳米介导的Mcl-1 shRNA体内外治疗肝细胞癌的实验研究 | 第62-83页 |
| 一、前言 | 第62-63页 |
| 二、材料与方法 | 第63-70页 |
| ·实验材料 | 第63-65页 |
| ·实验方法 | 第65-70页 |
| 三、结果 | 第70-80页 |
| ·RT-PCR检测Mcl-1 mRNA抑制情况 | 第70-71页 |
| ·Western blot检测Mcl-1蛋白 | 第71-72页 |
| ·不同组细胞生长曲线的绘制 | 第72-73页 |
| ·流式细胞仪检测各组HepG2细胞周期 | 第73-77页 |
| ·裸鼠肝癌移植瘤动物模型 | 第77-80页 |
| 四、讨论 | 第80-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 综述·一 | 第92-102页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 综述·二 | 第102-116页 |
| 参考文献 | 第111-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 研究成果 | 第117页 |
