| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-19页 |
| ·干扰素简介 | 第12页 |
| ·Ⅲ型干扰素的分子结构和编码蛋白 | 第12-13页 |
| ·Ⅲ型干扰素的产生和调节 | 第13-14页 |
| ·Ⅲ型扰素的受体 | 第14页 |
| ·Ⅲ型扰素的受体和信号转导 | 第14-15页 |
| ·Ⅲ型扰素的生物功能 | 第15-17页 |
| ·重组蛋白表达系统简述 | 第17-19页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第3章 材料与方法 | 第20-38页 |
| ·试验材料 | 第20-25页 |
| ·毒株、细胞与菌株 | 第20页 |
| ·载体与质粒 | 第20-22页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第22页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第22-23页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第23-25页 |
| ·试验方法 | 第25-38页 |
| ·猪外周血单核细胞(PBMC)的分离及诱导培养 | 第25页 |
| ·猪PBMC总RNA的提取 | 第25页 |
| ·RT-PCR扩增PoIFN-λ1 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第26-27页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第27页 |
| ·外源DNA片段与克隆质粒载体的连接反应 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第28-30页 |
| ·PoIFN-λ1的原核表达 | 第30-32页 |
| ·PoIFN-λ1多克隆抗体的制备 | 第32页 |
| ·PoIFN-λ1的真核表达 | 第32-34页 |
| ·表达产物的Western blot检测 | 第34-35页 |
| ·ELISA试验 | 第35页 |
| ·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第35-36页 |
| ·PoIFN-λ1生物学活性的测定 | 第36页 |
| ·PoIFN-λ1抗PRRSV、PRV作用 | 第36-38页 |
| 第4章 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·PoIFN-λ1的扩增及序列分析 | 第38-40页 |
| ·PoIFN-λ1基因的扩增 | 第38-39页 |
| ·PoIFN-λ1的核苷酸序列和氨基酸序列 | 第39页 |
| ·PoIFN-λ1的氨基酸进化树分析 | 第39-40页 |
| ·PoIFN-λ1原核表达 | 第40-43页 |
| ·PoIFN-λ1原核表达质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第41页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白的Western blot检测及抗病毒活性测定 | 第42-43页 |
| ·PoIFN-λ1多克隆抗体的制备 | 第43页 |
| ·PoIFN-λ1真核表达 | 第43-45页 |
| ·PoIFN-λ1真核表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·PoIFN-λ1真核表达产物的Western blot检测及抗病毒活性测定 | 第44-45页 |
| ·PoIFN-λ1对PRRSV和PRV的抑制作用 | 第45-49页 |
| ·PoIFN-λ1对PRRSV CH-1a增殖的影响 | 第45-46页 |
| ·PoIFN-λ1对PRRSV WuH3增殖的影响 | 第46-47页 |
| ·PoIFN-λ1对PRV Ea株增殖的影响 | 第47-49页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的克隆及序列分析 | 第49-50页 |
| ·猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的原核表达 | 第50-51页 |
| ·猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的真核表达 | 第51页 |
| ·猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1对PRRSV和PRV抑制作用 | 第51-52页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
