| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词/符号说明 | 第12-14页 |
| 一、前言 | 第14-21页 |
| 研究现状 | 第14-20页 |
| 1.1 DNA损伤反应分子机制 | 第15-17页 |
| 1.2 DNA修复分子机制 | 第17-19页 |
| 1.3 去泛素化酶与肿瘤的发生 | 第19-20页 |
| 研究目的与方法 | 第20-21页 |
| 二、材料与方法 | 第21-39页 |
| 2.1 实验对象 | 第21页 |
| 2.2 实验仪器及试剂 | 第21-28页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第22-26页 |
| 2.2.2.1 实验基本耗材 | 第22-23页 |
| 2.2.2.2 所需抗体及来源抗体 | 第23页 |
| 2.2.2.3 质粒的构建所需试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.2.2.4 生化常规试剂 | 第24-26页 |
| 2.2.3 实验试剂的配制 | 第26-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-39页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第28页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第28页 |
| 2.3.4 质粒的转化与提取 | 第28-30页 |
| 2.3.5 病毒包装 | 第30页 |
| 2.3.6 QPCR步骤 | 第30-31页 |
| 2.3.7 构建细胞株的稳定株 | 第31-32页 |
| 2.3.8 质粒标签构建与点突变 | 第32-34页 |
| 2.3.8.1 质粒标签构建 | 第32-33页 |
| 2.3.8.2 点突变质粒的构建 | 第33-34页 |
| 2.3.9 免疫共沉淀(immunoprecipitation,IP) | 第34页 |
| 2.3.10 GSTpull-downAssay | 第34-35页 |
| 2.3.11 免疫荧光实验 | 第35页 |
| 2.3.12 体内与体外去泛素化实验 | 第35-37页 |
| 2.3.12.1 体内去泛素化实验 | 第35-36页 |
| 2.3.12.2 体外去泛素化实验 | 第36-37页 |
| 2.3.13 细胞周期检测 | 第37页 |
| 2.3.14 细胞凋亡检测 | 第37页 |
| 2.3.15 SoftAgar集落形成实验 | 第37-38页 |
| 2.3.16 免疫组化染色 | 第38页 |
| 2.3.17 统计学方法 | 第38-39页 |
| 三、实验结果 | 第39-57页 |
| 3.1 USP39与CHK2互作 | 第39-40页 |
| 3.2 USP39与CHK2直接互作 | 第40-42页 |
| 3.3 USP39上调CHK2蛋白水平 | 第42-44页 |
| 3.4 USP39调控CHK2稳定性 | 第44-46页 |
| 3.5 USP39去泛素化CHK2 | 第46-47页 |
| 3.6 USP39直接去泛素化CHK2 | 第47-49页 |
| 3.7 USP39介导CHK2调控细胞生长 | 第49-51页 |
| 3.8 USP39介导CHK2调控细胞凋亡和阻滞 | 第51-54页 |
| 3.9 USP39下调非小细胞肺癌 | 第54-57页 |
| 四、讨论与结论 | 第57-60页 |
| 4.1 讨论 | 第57-59页 |
| 4.2 小结 | 第59-60页 |
| 五、结论与展望 | 第60-61页 |
| 5.1 结论 | 第60页 |
| 5.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 综述 蛋白质去泛素化研究进展 | 第68-88页 |
| 综述参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89页 |