摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-18页 |
1.1 贾第虫概述 | 第12页 |
1.2 贾第虫的集聚体 | 第12页 |
1.3 贾第虫形态学 | 第12-13页 |
1.4 贾第虫生活史 | 第13页 |
1.5 贾第虫致病机制 | 第13-14页 |
1.6 细胞骨架研究进展 | 第14-15页 |
1.6.1 细胞骨架 | 第14页 |
1.6.2 贾第素 | 第14-15页 |
1.7 贾第虫病毒 | 第15页 |
1.8 诊断方法 | 第15-16页 |
1.9 研究的目的意义 | 第16-18页 |
2 材料和方法 | 第18-32页 |
2.1 材料 | 第18-21页 |
2.1.1 试验虫种 | 第18页 |
2.1.2 实验动物 | 第18页 |
2.1.3 引物序列 | 第18页 |
2.1.4 原材料试剂 | 第18-19页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.6 主要试剂配制 | 第19-20页 |
2.1.7 贾第虫滋养体的培养 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-32页 |
2.2.1 贾第虫总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第22页 |
2.2.3 α-15-giardin基因克隆载体的构建 | 第22-25页 |
2.2.4 α-15-giardin基因重组表达载体的构建 | 第25-26页 |
2.2.5 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第26-27页 |
2.2.6 多克隆抗体的制备 | 第27-28页 |
2.2.7 免疫血清效价的测定 | 第28页 |
2.2.8 免疫原性鉴定 | 第28-29页 |
2.2.9 α-15-贾第素蛋白免疫荧光定位分析 | 第29-30页 |
2.2.10 荧光相对定量PCR检测mRNA水平的差异 | 第30-31页 |
2.2.11 Western Blot检测两种虫株中蛋白质水平差异 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-41页 |
3.1 贾第虫总RNA提取结果 | 第32页 |
3.2 α-15-giardin基因扩增结果 | 第32-33页 |
3.3 重组克隆质粒的鉴定 | 第33页 |
3.4 α-15-giardin贾第素生物信息学分析 | 第33-35页 |
3.5 重组表达质粒的鉴定 | 第35-36页 |
3.6 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第36-37页 |
3.6.1 重组蛋白的诱导条件优化及可溶性分析 | 第36页 |
3.6.2 表达产物的纯化 | 第36-37页 |
3.7 抗血清效价的测定 | 第37页 |
3.8 抗血清特异性分析 | 第37-38页 |
3.9 贾第虫滋养体α-15-贾第素的免疫荧光定位 | 第38页 |
3.10 两种虫株α-15-贾第素蛋白mRNA表达水平的差异 | 第38-39页 |
3.11 两种虫株α-15-贾第素蛋白蛋白质水平的差异 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
4.1 α-15-贾第素蛋白荧光定位 | 第41-42页 |
4.2 α-15-贾第素在两种虫株中的差异表达 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |