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贾第虫α-15-贾第素蛋白免疫荧光定位及两种虫株表达差异研究

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 引言第12-18页
    1.1 贾第虫概述第12页
    1.2 贾第虫的集聚体第12页
    1.3 贾第虫形态学第12-13页
    1.4 贾第虫生活史第13页
    1.5 贾第虫致病机制第13-14页
    1.6 细胞骨架研究进展第14-15页
        1.6.1 细胞骨架第14页
        1.6.2 贾第素第14-15页
    1.7 贾第虫病毒第15页
    1.8 诊断方法第15-16页
    1.9 研究的目的意义第16-18页
2 材料和方法第18-32页
    2.1 材料第18-21页
        2.1.1 试验虫种第18页
        2.1.2 实验动物第18页
        2.1.3 引物序列第18页
        2.1.4 原材料试剂第18-19页
        2.1.5 主要仪器设备第19页
        2.1.6 主要试剂配制第19-20页
        2.1.7 贾第虫滋养体的培养第20-21页
    2.2 方法第21-32页
        2.2.1 贾第虫总RNA的提取第21-22页
        2.2.2 cDNA的合成第22页
        2.2.3 α-15-giardin基因克隆载体的构建第22-25页
        2.2.4 α-15-giardin基因重组表达载体的构建第25-26页
        2.2.5 目的蛋白的诱导表达与纯化第26-27页
        2.2.6 多克隆抗体的制备第27-28页
        2.2.7 免疫血清效价的测定第28页
        2.2.8 免疫原性鉴定第28-29页
        2.2.9 α-15-贾第素蛋白免疫荧光定位分析第29-30页
        2.2.10 荧光相对定量PCR检测mRNA水平的差异第30-31页
        2.2.11 Western Blot检测两种虫株中蛋白质水平差异第31-32页
3 结果第32-41页
    3.1 贾第虫总RNA提取结果第32页
    3.2 α-15-giardin基因扩增结果第32-33页
    3.3 重组克隆质粒的鉴定第33页
    3.4 α-15-giardin贾第素生物信息学分析第33-35页
    3.5 重组表达质粒的鉴定第35-36页
    3.6 重组蛋白的诱导表达及纯化第36-37页
        3.6.1 重组蛋白的诱导条件优化及可溶性分析第36页
        3.6.2 表达产物的纯化第36-37页
    3.7 抗血清效价的测定第37页
    3.8 抗血清特异性分析第37-38页
    3.9 贾第虫滋养体α-15-贾第素的免疫荧光定位第38页
    3.10 两种虫株α-15-贾第素蛋白mRNA表达水平的差异第38-39页
    3.11 两种虫株α-15-贾第素蛋白蛋白质水平的差异第39-41页
4 讨论第41-43页
    4.1 α-15-贾第素蛋白荧光定位第41-42页
    4.2 α-15-贾第素在两种虫株中的差异表达第42-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-51页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第51页

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