| 个人简历 | 第3-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 第一章 外泌体提取方法的确立 | 第17-30页 |
| 1 目的 | 第17-18页 |
| 2 材料与仪器 | 第18-20页 |
| 3 方法 | 第20-26页 |
| 3.1 细胞培养 | 第20-22页 |
| 3.2 ExoQuick-TC试剂盒提取外泌体 | 第22页 |
| 3.3 ExoQuick-TC试剂盒改良法提取外泌体 | 第22-23页 |
| 3.4 Bradford蛋白浓度测定 | 第23页 |
| 3.5 外泌体的电镜鉴定 | 第23-24页 |
| 3.6 Nano FCM检测外泌体粒径分布及颗粒浓度 | 第24页 |
| 3.7 Western Blot检测外泌体标记蛋白 | 第24-26页 |
| 4 结果 | 第26-28页 |
| 4.1 外泌体标志蛋白的表达 | 第27页 |
| 4.2 外泌体形态 | 第27-28页 |
| 4.3 外泌体粒径分布及浓度 | 第28页 |
| 5 小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第二章 HepG2 肝癌细胞外泌体对人树突状细胞成熟与功能影响 | 第30-42页 |
| 1 目的 | 第30-31页 |
| 2 材料与仪器 | 第31-32页 |
| 3 方法 | 第32-36页 |
| 3.1 健康人PBMCs的获取 | 第32-33页 |
| 3.2 免疫磁珠法分选CD14+单核细胞 | 第33页 |
| 3.3 DC诱导及与肝癌外泌体共培养 | 第33-34页 |
| 3.4 DC表面分子染色及流式细胞仪检测 | 第34页 |
| 3.5 ELISA检测DC培养上清IL-12 | 第34-35页 |
| 3.6 CCK-8 检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力 | 第35-36页 |
| 4 结果 | 第36-39页 |
| 4.1 HepG2 外泌体对DC成熟的影响 | 第36-38页 |
| 4.2 HepG2 外泌体对DC IL-12 产生的影响 | 第38页 |
| 4.3 HepG2 外泌体对DC刺激淋巴细胞增殖效应的影响 | 第38-39页 |
| 5 小结与讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 改良癌痛消方干预肝癌细胞分泌的外泌体对人树突状细胞成熟与功能影响 | 第42-51页 |
| 1 目的 | 第42-43页 |
| 2 材料与仪器 | 第43-44页 |
| 3 方法 | 第44-47页 |
| 3.1 I-ATXP溶液的制备 | 第44-45页 |
| 3.2 癌痛消方干预HepG2 细胞 | 第45页 |
| 3.3 外泌体提取 | 第45页 |
| 3.4 AchE检测外泌体含量 | 第45-46页 |
| 3.5 Bradford法检测外泌体蛋白浓度 | 第46页 |
| 3.6 CCK-8 法检测I-ATXP对 HepG2 细胞存活率影响 | 第46-47页 |
| 3.7 流式检测DC细胞表面标记分子的变化 | 第47页 |
| 4 结果 | 第47-50页 |
| 4.1 I-ATXP I-ATXP对 HepG2 外泌体分泌量的影响 | 第47-48页 |
| 4.2 I-ATXP干预HepG2 分泌的外泌体对DC的影响 | 第48-50页 |
| 5 小结与讨论 | 第50-51页 |
| 全文总结 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-68页 |
| 英文缩写词表 | 第68-69页 |
| 项目资助 | 第69-70页 |
| 综述 | 第70-84页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第85页 |
