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利用TALEN技术定点突变水稻DST基因

中文摘要第3-4页
Abstract第4页
第1章 前言第8-18页
    1.1 试验目的与意义第8页
    1.2 DST基因概述第8-12页
        1.2.1 水稻DST基因的发现第8-9页
        1.2.2 水稻DST基因耐盐碱基本原理第9-10页
        1.2.3 水稻耐盐碱能力的分类第10-11页
        1.2.4 耐盐碱水稻的研究前景第11-12页
    1.3 TALEN技术概述第12-17页
        1.3.1 TALEN切割和修复原理第14-15页
        1.3.2 TALEN靶向基因敲除基本流程第15-16页
        1.3.3 TALEN技术的展望第16-17页
    1.4 试验技术路线第17-18页
第2章 材料与方法第18-44页
    2.1 试验材料第18-24页
        2.1.1 水稻材料第18页
        2.1.2 载体质粒和菌株第18-19页
        2.1.3 转化相关试剂第19-21页
        2.1.4 PCR检测及Southern印记杂交相关试剂第21-22页
        2.1.5 尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂第22-23页
        2.1.6 试验相关仪器第23-24页
    2.2 试验方法第24-44页
        2.2.1 TALEN表达载体的构建第24-28页
        2.2.2 水稻转化体系建立与再生苗的形成第28-29页
        2.2.3 再生苗的PCR检测及Southern印记杂交第29-35页
        2.2.4 再生苗的尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳及测序分析第35-37页
        2.2.5 T_2代转基因植株的耐盐碱性分析第37-43页
        2.2.6 T_2代转基因植株的农艺性状分析第43页
        2.2.7 数据处理与统计分析第43-44页
第3章 结果与分析第44-73页
    3.1 TALEN表达载体的构建第44-50页
        3.1.1 空育131DST基因序列分析第44-46页
        3.1.2 酶切连接与转化第46-49页
        3.1.3 表达载体的检测第49-50页
    3.2 空育131水稻愈伤组织的诱导分化与再生苗的获得第50-51页
    3.3 再生苗的PCR检测与Southern印记杂交第51-54页
        3.3.1 再生苗的PCR检测第51-52页
        3.3.2 再生苗的Southern印记杂交第52-53页
        3.3.3 再生苗的尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳及测序第53-54页
    3.4 T_2代转基因植株的表型分析第54-66页
        3.4.1 T_2代转基因植株芽期耐盐碱表型分析第55-58页
        3.4.2 T_2代转基因植株苗期盐碱地表型分析第58-61页
        3.4.3 T_2代转基因植株室内盐碱土种植表型分析第61-62页
        3.4.4 T_2代转基因植株盐碱培养基种植表型分析第62-64页
        3.4.5 T_2代转基因水稻叶片耐盐碱表型分析第64-66页
    3.5 T_2代转基因植株生理生化指标测定第66-70页
        3.5.1 T_2代转基因植株脯氨酸含量的测定第66-68页
        3.5.2 T_2代转基因植株叶绿素含量的测定第68-69页
        3.5.3 T_2代转基因植株H_2O_2含量的测定第69-70页
    3.6 T_2代转基因植株与空育131植株农艺性状比较分析第70-73页
第4章 讨论第73-76页
    4.1 选择TALEN技术构建载体第73页
    4.2 盐碱胁迫对水稻表型的影响第73-74页
    4.3 盐碱胁迫对水稻生理生化指标影响第74页
    4.4 试验展望第74-76页
第5章 结论第76-77页
参考文献第77-82页
致谢第82页

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