中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 前言 | 第8-18页 |
1.1 试验目的与意义 | 第8页 |
1.2 DST基因概述 | 第8-12页 |
1.2.1 水稻DST基因的发现 | 第8-9页 |
1.2.2 水稻DST基因耐盐碱基本原理 | 第9-10页 |
1.2.3 水稻耐盐碱能力的分类 | 第10-11页 |
1.2.4 耐盐碱水稻的研究前景 | 第11-12页 |
1.3 TALEN技术概述 | 第12-17页 |
1.3.1 TALEN切割和修复原理 | 第14-15页 |
1.3.2 TALEN靶向基因敲除基本流程 | 第15-16页 |
1.3.3 TALEN技术的展望 | 第16-17页 |
1.4 试验技术路线 | 第17-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-44页 |
2.1 试验材料 | 第18-24页 |
2.1.1 水稻材料 | 第18页 |
2.1.2 载体质粒和菌株 | 第18-19页 |
2.1.3 转化相关试剂 | 第19-21页 |
2.1.4 PCR检测及Southern印记杂交相关试剂 | 第21-22页 |
2.1.5 尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第22-23页 |
2.1.6 试验相关仪器 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-44页 |
2.2.1 TALEN表达载体的构建 | 第24-28页 |
2.2.2 水稻转化体系建立与再生苗的形成 | 第28-29页 |
2.2.3 再生苗的PCR检测及Southern印记杂交 | 第29-35页 |
2.2.4 再生苗的尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳及测序分析 | 第35-37页 |
2.2.5 T_2代转基因植株的耐盐碱性分析 | 第37-43页 |
2.2.6 T_2代转基因植株的农艺性状分析 | 第43页 |
2.2.7 数据处理与统计分析 | 第43-44页 |
第3章 结果与分析 | 第44-73页 |
3.1 TALEN表达载体的构建 | 第44-50页 |
3.1.1 空育131DST基因序列分析 | 第44-46页 |
3.1.2 酶切连接与转化 | 第46-49页 |
3.1.3 表达载体的检测 | 第49-50页 |
3.2 空育131水稻愈伤组织的诱导分化与再生苗的获得 | 第50-51页 |
3.3 再生苗的PCR检测与Southern印记杂交 | 第51-54页 |
3.3.1 再生苗的PCR检测 | 第51-52页 |
3.3.2 再生苗的Southern印记杂交 | 第52-53页 |
3.3.3 再生苗的尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳及测序 | 第53-54页 |
3.4 T_2代转基因植株的表型分析 | 第54-66页 |
3.4.1 T_2代转基因植株芽期耐盐碱表型分析 | 第55-58页 |
3.4.2 T_2代转基因植株苗期盐碱地表型分析 | 第58-61页 |
3.4.3 T_2代转基因植株室内盐碱土种植表型分析 | 第61-62页 |
3.4.4 T_2代转基因植株盐碱培养基种植表型分析 | 第62-64页 |
3.4.5 T_2代转基因水稻叶片耐盐碱表型分析 | 第64-66页 |
3.5 T_2代转基因植株生理生化指标测定 | 第66-70页 |
3.5.1 T_2代转基因植株脯氨酸含量的测定 | 第66-68页 |
3.5.2 T_2代转基因植株叶绿素含量的测定 | 第68-69页 |
3.5.3 T_2代转基因植株H_2O_2含量的测定 | 第69-70页 |
3.6 T_2代转基因植株与空育131植株农艺性状比较分析 | 第70-73页 |
第4章 讨论 | 第73-76页 |
4.1 选择TALEN技术构建载体 | 第73页 |
4.2 盐碱胁迫对水稻表型的影响 | 第73-74页 |
4.3 盐碱胁迫对水稻生理生化指标影响 | 第74页 |
4.4 试验展望 | 第74-76页 |
第5章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
致谢 | 第82页 |