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牙龈卟啉单胞菌裂解液下调上皮细胞中整合素β6表达的分子机制

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-22页
    1.1 牙周病的危害第13页
    1.2 牙周病致病菌牙龈卟啉单胞菌研究进展第13-15页
        1.2.1 牙龈卟啉单胞菌第14页
        1.2.2 牙龈卟琳单胞菌与炎症第14-15页
        1.2.3 牙龈卟啉单胞菌与细胞凋亡第15页
        1.2.4 牙龈卟啉单胞菌与氧化应激第15页
    1.3 整合素avβ6的研究综述第15-19页
        1.3.1 整合素avβ6的结构和功能第15-16页
        1.3.2 整合素avβ6与炎症第16页
        1.3.3 整合素avβ6关键亚基β6表达的调控机制第16-19页
    1.4 整合素与牙周病的研究进展第19-21页
        1.4.1 整合素avβ6与牙周病的研究进展第19-20页
        1.4.2 其他整合素与牙周病的研究进展第20-21页
    1.5 研究目的和意义第21-22页
第二章 实验材料和仪器第22-27页
    2.1 细胞来源第22页
    2.2 主要仪器第22-24页
    2.3 主要试剂第24-27页
第三章 实验方法第27-43页
    3.1 牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)培养第27页
    3.2 细胞培养第27-29页
        3.2.1 培养基的制备第27页
        3.2.2 细胞复苏第27-28页
        3.2.3 细胞换液第28页
        3.2.4 细胞传代第28-29页
        3.2.5 细胞冻存第29页
    3.3 转染重组质粒第29-30页
    3.4 RNA研究第30-36页
        3.4.1 过表达质粒转染第30页
        3.4.2 RNA提取、纯化和定量第30-32页
        3.4.3 cDNA合成第32-33页
        3.4.4 RT-PCT第33-34页
        3.4.5 实时定量PCR反应第34-36页
    3.5 Western blot第36-38页
        3.5.1 细胞总蛋白提取第36页
        3.5.2 BCA法测定蛋白浓度第36页
        3.5.3 蛋白免疫印迹分析第36-38页
    3.6 转化第38页
    3.7 重组质粒的鉴定第38-39页
    3.8 双荧光素酶报告基因活性检测第39-40页
    3.9 染色质免疫共沉淀(Chip)第40-42页
        3.9.1 制备细胞样品第40页
        3.9.2 超声裂解第40-41页
        3.9.3 免疫沉淀第41页
        3.9.4 洗磁珠第41-42页
        3.9.5 纯化染色质,解交联,蛋白酶K消化第42页
        3.9.6 QPCR分析第42页
    3.10 统计学分析第42-43页
第四章 结果第43-53页
    4.1 P.G裂解液对HACAT中ITGβ6表达的影响第43-44页
    4.2 ITGβ6基因启动子区P.G裂解液应答调控元件的确定第44-45页
    4.3 P.G裂解液使FOXO3a结合到ITGβ6基因启动子上第45-47页
    4.4 P.G裂解液通过FOXO3a下调ITGβ6的表达第47-52页
        4.4.1 FOXO3a对基础条件下ITGβ6表达的影响第47-49页
        4.4.2 FOXO3a参与P.G裂解液下调ITGβ6表达的影响第49页
        4.4.3 FOXO1对基础条件下ITGβ6表达的影响第49-51页
        4.4.4 FOXO1参与P.G裂解液下调ITGβ6表达的影响第51-52页
    4.5 P.G裂解液对P-FOXO3a (ser253)表达的影响第52-53页
第五章 讨论第53-57页
    5.1 P.G裂解液对ITGβ6表达的影响第53-54页
    5.2 FOXO3a参与P.G裂解液对ITGβ6的表达调控第54-55页
    5.3 P.G裂解液下调ITGβ6的可能机制探讨第55页
    5.4 本研究的局限性和未来展望第55-56页
    5.5 本研究的意义第56-57页
结论第57-58页
附录第58-62页
参考文献第62-67页
致谢第67页

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