摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第13-22页 |
1.1 牙周病的危害 | 第13页 |
1.2 牙周病致病菌牙龈卟啉单胞菌研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 牙龈卟啉单胞菌 | 第14页 |
1.2.2 牙龈卟琳单胞菌与炎症 | 第14-15页 |
1.2.3 牙龈卟啉单胞菌与细胞凋亡 | 第15页 |
1.2.4 牙龈卟啉单胞菌与氧化应激 | 第15页 |
1.3 整合素avβ6的研究综述 | 第15-19页 |
1.3.1 整合素avβ6的结构和功能 | 第15-16页 |
1.3.2 整合素avβ6与炎症 | 第16页 |
1.3.3 整合素avβ6关键亚基β6表达的调控机制 | 第16-19页 |
1.4 整合素与牙周病的研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 整合素avβ6与牙周病的研究进展 | 第19-20页 |
1.4.2 其他整合素与牙周病的研究进展 | 第20-21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 实验材料和仪器 | 第22-27页 |
2.1 细胞来源 | 第22页 |
2.2 主要仪器 | 第22-24页 |
2.3 主要试剂 | 第24-27页 |
第三章 实验方法 | 第27-43页 |
3.1 牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)培养 | 第27页 |
3.2 细胞培养 | 第27-29页 |
3.2.1 培养基的制备 | 第27页 |
3.2.2 细胞复苏 | 第27-28页 |
3.2.3 细胞换液 | 第28页 |
3.2.4 细胞传代 | 第28-29页 |
3.2.5 细胞冻存 | 第29页 |
3.3 转染重组质粒 | 第29-30页 |
3.4 RNA研究 | 第30-36页 |
3.4.1 过表达质粒转染 | 第30页 |
3.4.2 RNA提取、纯化和定量 | 第30-32页 |
3.4.3 cDNA合成 | 第32-33页 |
3.4.4 RT-PCT | 第33-34页 |
3.4.5 实时定量PCR反应 | 第34-36页 |
3.5 Western blot | 第36-38页 |
3.5.1 细胞总蛋白提取 | 第36页 |
3.5.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第36页 |
3.5.3 蛋白免疫印迹分析 | 第36-38页 |
3.6 转化 | 第38页 |
3.7 重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
3.8 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第39-40页 |
3.9 染色质免疫共沉淀(Chip) | 第40-42页 |
3.9.1 制备细胞样品 | 第40页 |
3.9.2 超声裂解 | 第40-41页 |
3.9.3 免疫沉淀 | 第41页 |
3.9.4 洗磁珠 | 第41-42页 |
3.9.5 纯化染色质,解交联,蛋白酶K消化 | 第42页 |
3.9.6 QPCR分析 | 第42页 |
3.10 统计学分析 | 第42-43页 |
第四章 结果 | 第43-53页 |
4.1 P.G裂解液对HACAT中ITGβ6表达的影响 | 第43-44页 |
4.2 ITGβ6基因启动子区P.G裂解液应答调控元件的确定 | 第44-45页 |
4.3 P.G裂解液使FOXO3a结合到ITGβ6基因启动子上 | 第45-47页 |
4.4 P.G裂解液通过FOXO3a下调ITGβ6的表达 | 第47-52页 |
4.4.1 FOXO3a对基础条件下ITGβ6表达的影响 | 第47-49页 |
4.4.2 FOXO3a参与P.G裂解液下调ITGβ6表达的影响 | 第49页 |
4.4.3 FOXO1对基础条件下ITGβ6表达的影响 | 第49-51页 |
4.4.4 FOXO1参与P.G裂解液下调ITGβ6表达的影响 | 第51-52页 |
4.5 P.G裂解液对P-FOXO3a (ser253)表达的影响 | 第52-53页 |
第五章 讨论 | 第53-57页 |
5.1 P.G裂解液对ITGβ6表达的影响 | 第53-54页 |
5.2 FOXO3a参与P.G裂解液对ITGβ6的表达调控 | 第54-55页 |
5.3 P.G裂解液下调ITGβ6的可能机制探讨 | 第55页 |
5.4 本研究的局限性和未来展望 | 第55-56页 |
5.5 本研究的意义 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
附录 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67页 |