| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-29页 |
| ·生物柴油概述 | 第11-12页 |
| ·生物柴油的定义 | 第11页 |
| ·生物柴油的特征 | 第11-12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-14页 |
| ·国外生物柴油发展状况 | 第12-13页 |
| ·国内生物柴油发展状况 | 第13-14页 |
| ·生物柴油生产原料介绍 | 第14-15页 |
| ·木本油脂简介 | 第14-15页 |
| ·麻疯树籽油 | 第14-15页 |
| ·黄连木籽油 | 第15页 |
| ·油脂精炼方法 | 第15页 |
| ·油脂的脱胶 | 第15页 |
| ·油脂的脱色 | 第15页 |
| ·生物柴油的生产方法 | 第15-20页 |
| ·物理法 | 第15-16页 |
| ·直接混合法 | 第15-16页 |
| ·微乳液法 | 第16页 |
| ·化学法 | 第16-18页 |
| ·高温热裂解法 | 第16页 |
| ·酯交换法 | 第16-18页 |
| ·生物酶法 | 第18-19页 |
| ·超临界流体法 | 第19-20页 |
| ·微生物脂肪酶简介 | 第20-26页 |
| ·微生物脂肪酶的结构 | 第20页 |
| ·微生物脂肪酶的底物特异性 | 第20-21页 |
| ·Rhizopus oryzae 脂肪酶的性质与酰基迁移作用 | 第21-23页 |
| ·微生物脂肪酶的酶活测定 | 第23-24页 |
| ·酶的固定化方法 | 第24-25页 |
| ·吸附法 | 第24页 |
| ·交联法 | 第24页 |
| ·共价结合法 | 第24-25页 |
| ·包埋法 | 第25页 |
| ·酶的固定化载体的介绍 | 第25-26页 |
| ·无机类载体 | 第25页 |
| ·有机类载体 | 第25-26页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统高密度发酵概述 | 第26-28页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·高密度发酵 | 第27-28页 |
| ·前景 | 第28页 |
| ·本论文的研究意义 | 第28-29页 |
| 2. 木本植物油脂的提取与精制 | 第29-35页 |
| ·实验部分 | 第29-31页 |
| ·实验原料及试剂 | 第29页 |
| ·实验仪器及设备 | 第29页 |
| ·原料分析 | 第29-31页 |
| ·原料预处理 | 第29-30页 |
| ·原料含油率的测定 | 第30页 |
| ·原料油酸值的测定 | 第30页 |
| ·原料油皂化值的测定 | 第30页 |
| ·原料油平均分子量的测定 | 第30页 |
| ·原料油红外光谱分析 | 第30页 |
| ·原料油脂肪酸组成分析 | 第30-31页 |
| ·原料毛油的精制 | 第31页 |
| ·毛油的脱胶 | 第31页 |
| ·毛油的脱色 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-34页 |
| ·原料油主要理化性质 | 第31-32页 |
| ·原料油红外光谱分析结果 | 第32-33页 |
| ·原料油脂肪酸的组成 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 3. 重组脂肪酶基因工程菌的诱导产酶 | 第35-48页 |
| ·材料与方法 | 第35-41页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·实验菌株 | 第35页 |
| ·主要药品 | 第35页 |
| ·培养基与试剂 | 第35-38页 |
| ·毕赤酵母工程菌在摇瓶中诱导培养步骤 | 第38页 |
| ·毕赤酵母工程菌在发酵罐上高密度诱导培养步骤 | 第38-39页 |
| ·平板划线 | 第38页 |
| ·种子液的制备 | 第38页 |
| ·上罐发酵 | 第38-39页 |
| ·菌体生物质量（biomass）的测定 | 第39页 |
| ·OD600的测定 | 第39页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
| ·重组脂肪酶蛋白 SDS-PAGE 分析 | 第40-41页 |
| ·凝胶的制备 | 第40-41页 |
| ·酶蛋白样品的制备 | 第41页 |
| ·电泳检测 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-47页 |
| ·摇瓶与发酵罐诱导培养的比较 | 第41-43页 |
| ·不同培养基对脂肪酶表达的影响 | 第43-44页 |
| ·甲醇诱导时间对脂肪酶量分泌的影响 | 第44-46页 |
| ·甲醇补料方式对发酵罐高密度诱导培养的影响 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 4. 重组脂肪酶的固定化 | 第48-69页 |
| ·实验原材料及试剂 | 第48-49页 |
| ·试验菌株 | 第48页 |
| ·实验仪器设备 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48-49页 |
| ·溶液的配制方法 | 第49页 |
| ·脂肪酶活力的表示和测定方法 | 第49-50页 |
| ·脂肪酶活力的测定 | 第49-50页 |
| ·固定化脂肪酶活测定方法 | 第50页 |
| ·脂肪酶浓度的测定方法 | 第50页 |
| ·脂肪酶的固定化 | 第50-52页 |
| ·无机载体的固定化 | 第50-51页 |
| ·有机载体的固定化 | 第51-52页 |
| ·固定化酶催化酯交换反应 | 第52页 |
| ·油脂甲酯化反应产物的分析 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-68页 |
| ·BSA 吸附曲线的制作 | 第52-53页 |
| ·载体的选择 | 第53-58页 |
| ·添加剂对转酯化反应的影响 | 第53-54页 |
| ·无机载体的比较 | 第54页 |
| ·有机载体的比较 | 第54-55页 |
| ·脂肪酶固定的树脂的筛选 | 第55页 |
| ·不同树脂固定脂肪酶的效果对比 | 第55-57页 |
| ·交联过程对固定化酶酶活和稳定性的影响 | 第57-58页 |
| ·Amberlite IRA-93 树脂固定化酶的制备工艺条件 | 第58-61页 |
| ·预吸附过程的条件优化 | 第58-59页 |
| ·交联工艺条件的探讨 | 第59-61页 |
| ·固定化酶催化精制大豆油工艺条件的探讨 | 第61-68页 |
| ·反应溶剂对固定化脂肪酶催化酯交换试验的影响 | 第61-63页 |
| ·反应缓冲液 pH 对反应的影响 | 第63页 |
| ·含水率对反应的影响 | 第63-64页 |
| ·反应温度对酯交换反应的影响 | 第64-65页 |
| ·酶量对酯交换反应的影响 | 第65页 |
| ·醇油比对反应的影响 | 第65-66页 |
| ·甲醇加入方式对酯交换反应的影响 | 第66页 |
| ·反应时间对酯交换反应的影响 | 第66-67页 |
| ·固定化酶的重复使用性 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 5. 固定化重组脂肪酶催化木本油脂转酯化制备生物柴油 | 第69-83页 |
| ·实验原料及试剂 | 第69-70页 |
| ·实验原料 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·主要试剂 | 第69-70页 |
| ·木本油脂催化制备生物柴油 | 第70页 |
| ·固定化酶催化酯交换反应 | 第70页 |
| ·油脂甲酯化反应产物的分析 | 第70页 |
| ·固定化酶催化麻疯树油工艺条件之探讨 | 第70-78页 |
| ·响应面优化设计单因素实验 | 第70-73页 |
| ·胶质和色素对固定化酶催化的影响 | 第70-71页 |
| ·含水率对反应的影响 | 第71-72页 |
| ·温度对转酯化反应的影响 | 第72页 |
| ·酶量对反应的影响 | 第72-73页 |
| ·醇油比对反应的影响 | 第73页 |
| ·固定化酶催化麻风树籽油合成生物柴油条件优化 | 第73-78页 |
| ·Box-Behnken 设计 | 第73-75页 |
| ·方差分析 | 第75页 |
| ·根据回归方程绘制响应面二维曲线图 | 第75-77页 |
| ·酯化反应工艺参数优化及平行实验检验 | 第77页 |
| ·固定化酶催化制备麻疯树籽油的重复使用性 | 第77-78页 |
| ·固定化酶催化黄连木籽油合成生物柴油条件优化 | 第78-82页 |
| ·黄连木籽油酯交换反应条件单因素探讨 | 第78-82页 |
| ·胶质和色素对反应的影响 | 第78页 |
| ·含水率对反应的影响 | 第78-79页 |
| ·温度对反应的影响 | 第79页 |
| ·酶量对反应的影响 | 第79-80页 |
| ·醇油比对反应的影响 | 第80页 |
| ·黄连木籽油酯交换反应条件正交实验设计 | 第80-82页 |
| ·固定化酶催化黄连木籽油的重复使用性 | 第82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 6. 生物柴油的性能研究 | 第83-86页 |
| ·实验部分 | 第83-84页 |
| ·实验原料 | 第83页 |
| ·实验仪器及设备 | 第83页 |
| ·密度的测定 | 第83页 |
| ·运动粘度的测定 | 第83页 |
| ·燃烧值的测定 | 第83-84页 |
| ·闪点的测定 | 第84页 |
| ·十六烷值的测定 | 第84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 总结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 详细摘要 | 第94-97页 |
