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草酸青霉在牛粪发酵产乙醇中的应用及菌株改造

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第1章 绪论第12-22页
    1.1 木质纤维素乙醇概述第12-14页
        1.1.1 木质纤维素乙醇简介第12-13页
        1.1.2 燃料乙醇原料第13页
        1.1.3 牛粪的研究进展第13-14页
    1.2 木质纤维素酶解第14-18页
        1.2.1 木质纤维素降解真菌第14-15页
        1.2.2 木质纤维素降解酶系第15-16页
        1.2.3 真菌纤维素酶转录调控因子第16-17页
        1.2.4 终止子研究进展第17-18页
    1.3 木质纤维素乙醇的生产第18-20页
        1.3.1 生物质预处理第19页
        1.3.2 半同步糖化发酵第19-20页
    1.4 本文研究目的和意义第20-22页
第2章 牛粪对草酸青霉纤维素酶表达的诱导及在乙醇发酵中的应用第22-40页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 菌株,样品收集第22页
        2.1.2 培养基第22-23页
        2.1.3 试剂第23-24页
    2.2 实验方法第24-26页
        2.2.1 酸碱预处理生物质第24页
        2.2.2 生物质成分分析方法第24页
        2.2.3 牛粪诱导草酸青霉114-2、RE-8、RE-10、RBB1-10表达木质纤维素酶第24-25页
        2.2.4 商业纤维素酶SN-1溶液、草酸青霉RBB1-10纤维素酶酶活测定第25页
        2.2.5 SaccharomycescerevisiaeLF1生物量标准曲线的测定及菌株活化方法第25-26页
        2.2.6 同步糖化发酵方法第26页
        2.2.7 分批糖化同步发酵方法第26页
    2.3 结果与讨论第26-39页
        2.3.1 酸碱预处理前后生物质的组分分析第26-29页
        2.3.2 牛粪诱导草酸青霉114-2、RE-8、RE-10、RBB1-10菌株纤维素酶的表达第29-33页
        2.3.3 商业酶SN-1溶液、草酸青霉RBB1-10酶酶活测定结果第33-34页
        2.3.4 酿酒酵母LF1生物量标准曲线第34页
        2.3.5 单批水解同步糖化发酵第34-37页
        2.3.6 分批水解糖化发酵第37-39页
    2.4 本章小结第39-40页
第3章 不同终止子对草酸青霉纤维素酶转录调控因子ClrB、XlnR功能的影响第40-54页
    3.1 实验材料第40-43页
        3.1.1 菌株及引物第40页
        3.1.2 试剂第40-41页
        3.1.3 培养基第41-43页
    3.2 实验方法第43-47页
        3.2.1 终止子筛选方法第43-44页
        3.2.2 终止子区、潮霉素基因(hph)、启动子置换表达盒片段的克隆及构建第44-45页
        3.2.3 草酸青霉原生质体制备及转化第45-46页
        3.2.4 草酸青霉分纯及验证方法第46-47页
        3.2.5 草酸青霉发酵及纤维素酶酶活测定方法第47页
    3.3 实验结果第47-53页
        3.3.1 终止子筛选结果第47页
        3.3.2 终止子、潮霉素、同源臂基因的获得及表达盒构建结果第47-48页
        3.3.3 转化子验证结果第48-49页
        3.3.4 重组114-2菌株纤维素酶活测定结果第49-51页
        3.3.5 重组G-75菌株纤维素酶活测定结果第51-53页
    3.4 本章小结第53-54页
第4章 结论与展望第54-58页
参考文献第58-64页
致谢第64-66页
在学期间主要科研成果第66页
    一、发表学术论文第66页

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