| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第13-31页 |
| 1.1 诺如病毒研究进展 | 第13-28页 |
| 1.1.1 诺如病毒细胞培养系统研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.2 诺如病毒灭活研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1.3 诺如病毒抗原研究进展 | 第19-23页 |
| 1.1.4 诺如病毒分型与变异研究进展 | 第23-24页 |
| 1.1.5 诺如病毒检测方法研究进展 | 第24-28页 |
| 1.2 札如病毒研究进展 | 第28页 |
| 1.3 免疫胶体金技术 | 第28-30页 |
| 1.4 本论文的研究目的与内容 | 第30-31页 |
| 第2章 诺如病毒多表位抗原表达及其小鼠单抗和多抗制备 | 第31-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 实验动物及菌株 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 2.2.1 BL21/pET32a/HuNoV菌株活化与鉴定 | 第34页 |
| 2.2.2 BL21/pET32a/HuNoV菌株融合蛋白诱导表达与纯化 | 第34-36页 |
| 2.2.3 小鼠多克隆抗体制备与纯化鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.4 小鼠单克隆抗体制备与纯化鉴定 | 第37-39页 |
| 2.3 实验结果 | 第39-43页 |
| 2.3.1 BL21/pET32a/HuNoV菌株菌落PCR与测序鉴定 | 第39页 |
| 2.3.2 BL21/pET32a/HuNoV菌株融合蛋白诱导表达与纯化 | 第39-40页 |
| 2.3.3 小鼠多抗血清效价与纯化IgG | 第40-41页 |
| 2.3.4 小鼠单克隆抗体制备与纯化鉴定 | 第41-43页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第43-45页 |
| 第3章 札如病毒多表位抗原的表达及其兔多抗制备 | 第45-54页 |
| 3.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.1 实验动物及病毒株 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.2.1 札如病毒多表位抗原基因的设计与合成 | 第45页 |
| 3.2.2 BL21/pET32/HuSaV菌株的构建 | 第45-48页 |
| 3.2.3 BL21/pET32/HuSaV菌株的诱导表达与蛋白纯化 | 第48-49页 |
| 3.2.4 兔多克隆抗体制备与纯化鉴定 | 第49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-52页 |
| 3.3.1 札如病毒多表位抗原序列 | 第49页 |
| 3.3.2 BL21/pET32/HuSaV菌株的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.3 BL21/pET32/HuSaV菌株的诱导表达与蛋白纯化 | 第51页 |
| 3.3.4 兔抗血清纯化与效价测定 | 第51-52页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第52-54页 |
| 第4章 诺如病毒胶体金检测试纸制作与评估 | 第54-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.1 主要试剂与耗材 | 第54页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第54页 |
| 4.1.3 抗体 | 第54页 |
| 4.1.4 主要溶液的配制 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-60页 |
| 4.2.1 胶体金溶液的制备与质量鉴定 | 第54-55页 |
| 4.2.2 金标记兔抗HuNoV多克隆抗体 | 第55-56页 |
| 4.2.3 试纸条的组装及检测评判 | 第56-58页 |
| 4.2.4 竞争抑制法检测rHuNoV | 第58-59页 |
| 4.2.5 双抗夹心法检测rHuNoV | 第59-60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-66页 |
| 4.3.1 胶体金溶液质量鉴定 | 第60-62页 |
| 4.3.2 金标记兔IgG条件参数 | 第62-63页 |
| 4.3.3 竞争抑制法检测rHuNoV | 第63-65页 |
| 4.3.4 试纸条的质量检测 | 第65页 |
| 4.3.5 双抗夹心法检测rHuNoV | 第65-66页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第66-68页 |
| 第5章 札如病毒胶体金检测试纸制作与评估 | 第68-71页 |
| 5.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.1.1 主要试剂与耗材 | 第68页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第68页 |
| 5.1.3 抗体与血清 | 第68页 |
| 5.1.4 主要溶液的配制 | 第68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 金标记兔抗HuSaV多克隆抗体 | 第68页 |
| 5.2.2 竞争抑制法检测rHuSaV | 第68-69页 |
| 5.3 实验结果 | 第69页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第69-71页 |
| 第6章 数字PCR绝对定量诺如病毒方法的建立 | 第71-80页 |
| 6.1 实验材料 | 第71-72页 |
| 6.1.1 病毒株 | 第71页 |
| 6.1.2 主要试剂与耗材 | 第71页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第71页 |
| 6.1.4 主要溶液的配制 | 第71-72页 |
| 6.2 实验方法 | 第72-75页 |
| 6.2.1 引物&探针设计、合成与鉴定 | 第72-74页 |
| 6.2.2 探针合成 | 第74页 |
| 6.2.3 Tm值优化 | 第74-75页 |
| 6.3 实验结果 | 第75-79页 |
| 6.3.1 引物、探针信息 | 第75-77页 |
| 6.3.2 Tm值优化 | 第77-79页 |
| 6.4 分析与讨论 | 第79-80页 |
| 第7章 结论与创新点 | 第80-82页 |
| 7.1 本论文的研究总结 | 第80页 |
| 7.2 展望 | 第80-81页 |
| 7.3 创新点 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第95页 |
