| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 中英文缩略词表 | 第18-20页 |
| 引言 | 第20-23页 |
| 第一部分 miR-139-5p和Tspan3在AML中的表达及意义 | 第23-41页 |
| 1 前言 | 第23-24页 |
| 2 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1 细胞样本收集 | 第24页 |
| 2.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 实验仪器 | 第25页 |
| 3 实验方法 | 第25-29页 |
| 3.1 qRT-PCR检测miR-139-5p的表达水平 | 第25-26页 |
| 3.2 qRT-PCR检测Tspan3的表达水平 | 第26-28页 |
| 3.3 在线软件预测miR-139-5p的靶基因 | 第28页 |
| 3.4 统计学分析 | 第28-29页 |
| 4 结果 | 第29-31页 |
| 4.1 miR-139-5p在AML患者骨髓单个核细胞中的表达水平 | 第29页 |
| 4.2 Tspan3在AML患者骨髓单个核细胞中的表达水平 | 第29-30页 |
| 4.3 miR-139-5p和Tspan3的表达相关性分析 | 第30-31页 |
| 4.4 利用生物信息学软件预测miR-139-5p的靶基因 | 第31页 |
| 5 讨论 | 第31-33页 |
| 6 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 第二部分 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞生物功能的影响及分子机制 | 第41-92页 |
| 1 前言 | 第41-42页 |
| 2 实验材料 | 第42-46页 |
| 2.1 实验细胞 | 第42页 |
| 2.2 实验试剂 | 第42-44页 |
| 2.3 实验器材 | 第44页 |
| 2.4 实验配制的试剂 | 第44-46页 |
| 3 实验方法 | 第46-61页 |
| 3.1 构建miR-139-5p过表达慢病毒载体 | 第46-49页 |
| 3.2 构建Tspan3过表达慢病毒载体 | 第49-51页 |
| 3.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第51-54页 |
| 3.4 293T细胞培养 | 第54-55页 |
| 3.5 病毒包装 | 第55页 |
| 3.6 病毒滴度测定 | 第55-56页 |
| 3.7 细胞系的筛选 | 第56页 |
| 3.8 miR-139-5p过表达稳定细胞系的构建 | 第56页 |
| 3.9 白血病细胞的培养 | 第56-57页 |
| 3.10 qRT-PCR检测miR-139-5p过表达对Tspan3mRNA表达的影响 | 第57页 |
| 3.11 Westernblot | 第57-59页 |
| 3.12 CCK-8实验检测细胞增殖活力 | 第59页 |
| 3.13 流式细胞术检测细胞周期变化 | 第59-60页 |
| 3.14 流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第60页 |
| 3.15 Transwell实验检测细胞侵袭能力 | 第60页 |
| 3.16 Transwell实验检测细胞迁移情况 | 第60-61页 |
| 3.17 统计方法 | 第61页 |
| 4 结果 | 第61-82页 |
| 4.1 miR-139-5p过表达慢病毒载体的构建 | 第61-62页 |
| 4.2 Tspan3过表达慢病毒载体的构建 | 第62-63页 |
| 4.3 Lent-Tspan3的测序结果 | 第63-65页 |
| 4.4 慢病毒的包装及滴定 | 第65-66页 |
| 4.5 荧光素酶报告载体的构建 | 第66-68页 |
| 4.6 miR-139-5p靶向调控Tspan3的表达 | 第68页 |
| 4.7 实验细胞系的筛选 | 第68-70页 |
| 4.8 miR-139-5p过表达稳定细胞系的构建 | 第70-72页 |
| 4.9 miR-139-5p过表达对Tspan3mRNA表达的影响 | 第72-73页 |
| 4.10 miR-139-5p过表达对Tspan3蛋白表达的影响 | 第73-74页 |
| 4.11 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞增殖的影响 | 第74-75页 |
| 4.12 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞周期的影响 | 第75-77页 |
| 4.13 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞凋亡的影响 | 第77-79页 |
| 4.14 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞侵袭的影响 | 第79-80页 |
| 4.15 miR-139-5p靶向Tspan3对AML细胞迁移的影响 | 第80-81页 |
| 4.16 miR-139-5p靶向Tspan3对PI3K/AKT信号通路的影响 | 第81-82页 |
| 5 讨论 | 第82-85页 |
| 6 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 第三部分 miR-139-5p靶向Tspan3对AML移植瘤生长的影响及分子机制 | 第92-108页 |
| 1 前言 | 第92-93页 |
| 2 实验材料 | 第93-94页 |
| 2.1 实验动物 | 第93页 |
| 2.2 细胞株 | 第93页 |
| 2.3 实验主要试剂 | 第93页 |
| 2.4 主要仪器 | 第93-94页 |
| 3 实验方法 | 第94-96页 |
| 3.1 细胞培养 | 第94页 |
| 3.2 细胞荷瘤小鼠肿瘤模型的构建 | 第94-95页 |
| 3.3 荷瘤小鼠肿瘤体积和质量检测 | 第95页 |
| 3.4 qRT-PCR检测miR-139-5p和Tspan3的表达情况 | 第95页 |
| 3.5 免疫组化检测各移植瘤中Ki67的表达情况 | 第95-96页 |
| 3.6 Westernblot检测各组移植瘤中Tspan3蛋白的表达情况 | 第96页 |
| 4 结果 | 第96-101页 |
| 4.1 miR-139-5p过表达对移植瘤生长的影响 | 第96-97页 |
| 4.2 miR-139-5p过表达对移植瘤质量的影响 | 第97-98页 |
| 4.3 各组移植瘤中Ki67的表达情况 | 第98-99页 |
| 4.4 各组移植瘤中miR-139-5p的表达情况 | 第99页 |
| 4.5 miR-139-5p过表达对移植瘤中Tspan3mRNA表达的影响 | 第99-100页 |
| 4.6 miR-139-5p过表达对移植瘤中Tspan3蛋白表达的影响 | 第100页 |
| 4.7 miR-139-5p靶向Tspan3对移植瘤中PI3K/AKT信号通路的影响 | 第100-101页 |
| 5 讨论 | 第101-103页 |
| 6 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-108页 |
| 全文结论 | 第108-109页 |
| 综述 miRNA在急性髓系白血病中的研究进展 | 第109-132页 |
| 参考文献 | 第124-132页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
