摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1 南方根结线虫及其危害 | 第9页 |
·南方根结线虫的分类地位 | 第9页 |
·南方根结线虫的危害及防治 | 第9页 |
2 线虫类FMRF酰胺肽及其G蛋白偶联受体的研究进展 | 第9-12页 |
·FMRF酰胺肽 | 第9-10页 |
·线虫FLP的GPCR | 第10-12页 |
·线虫FLP-GPCR在药剂研发方面的作用 | 第12页 |
3 植物抗线虫基因工程研究进展 | 第12-20页 |
·抗线虫基因介导的植物抗线虫基因工程 | 第12-16页 |
·外源蛋白 | 第16-18页 |
·植物寄生线虫RNAi研究进展 | 第18-20页 |
4 科学问题的提出 | 第20-21页 |
第二章 M.I-NPR-1和M.I-NPR-3基因克隆及生物信息学分析 | 第21-34页 |
1 试验方法 | 第21-24页 |
·植物材料培养 | 第21页 |
·南方根结线虫接种 | 第21页 |
·南方根结线虫二龄幼虫的收集 | 第21页 |
·南方根结线虫总RNA的提取 | 第21页 |
·cDNA的合成 | 第21页 |
·npr-1和npr-3基因片段的克隆 | 第21-22页 |
·RACE法扩增npr-3 3’端序列 | 第22页 |
·PCR扩增npr-3基因完全开放阅读框序列 | 第22-23页 |
·npr-1和npr-3基因内含子的扩增 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-32页 |
·RNA的提取 | 第24页 |
·npr-1及npr-3基因的扩增 | 第24-25页 |
·RACE结果与分析 | 第25页 |
·npr-3开放阅读框(ORF)序列的扩增 | 第25页 |
·南方根结线虫npr-1和npr-3基因的编码区序列 | 第25-28页 |
·目的基因内含子的扩增结果与分析 | 第28-30页 |
·npr-1和npr-3基因编码的蛋白的结构分析 | 第30-32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 NPR-1和NPR-3基因的异源表达 | 第34-42页 |
1 试验材料 | 第34页 |
·生物材料 | 第34页 |
·主要试剂、载体 | 第34页 |
·溶液配制 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
2 试验方法 | 第34-39页 |
·南方根结线虫各虫态的收集 | 第34页 |
·npr-1和npr-3基因的原核表达 | 第34-36页 |
·npr-1和npr-3基因的真核表达 | 第36-38页 |
·目的基因在南方根结线虫不同虫态中的表达分析 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-40页 |
·npr-1和npr-3基因的原核表达结果分析 | 第39页 |
·npr-1和npr-3基因的真核表达结果分析 | 第39页 |
·npr-1和npr-3基因不同虫态的表达情况 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 南方根结线虫NPR-1基因的RNAI效应分析 | 第42-50页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
·供试材料 | 第42页 |
·主要仪器和试剂 | 第42页 |
·npr-1基因dsRNA的合成 | 第42-44页 |
·南方根结线虫的RNAi实验 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-49页 |
·dsRNA的合成 | 第45-46页 |
·干扰效应的验证 | 第46-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
第五章 全文总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简介 | 第59页 |