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猪嗜血支原体无机焦磷酸酶原核表达和纯化

英文缩略词表第5-8页
摘要第8-9页
前言第9-17页
    1 猪嗜血支原体病原学研究第9-11页
        1.1 病原体分类第9-10页
        1.2 病原体形态结构第10页
        1.3 病原理化特性和生物活性第10-11页
        1.4 生活史和传播途径第11页
    2 猪嗜血支原体分子生物学研究第11-13页
        2.1 猪嗜血支原体全基因序列第11页
        2.2 猪嗜血支原体相关基因及蛋白研究第11-13页
    3 蛋白质原核表达技术简述第13-16页
        3.1 克隆载体第14-15页
        3.2 表达载体第15页
        3.3 外源基因第15页
        3.4 表达宿主菌第15-16页
    4 研究目的及意义第16-17页
材料与方法第17-39页
    1 实验材料第17-21页
        1.1 病料来源第17页
        1.2 主要仪器及设备第17-18页
        1.3 主要试剂及耗材第18-19页
        1.4 试剂配制第19-21页
    2 实验方法第21-32页
        2.1 病原体来源第21页
        2.2 M.suis阳性血液鉴定第21-22页
        2.3 M.suis基因组DNA提取第22-23页
        2.4 目的基因M.suis ppa PCR扩增与纯化第23-24页
        2.5 M.suis ppa基因克隆与鉴定第24-26页
        2.6 重组表达质粒的构建第26-28页
        2.7 M.suis ppa重组蛋白表达形式鉴定第28-29页
        2.8 诱导表达条件优化第29-30页
        2.9 表达产物的纯化第30-31页
        2.10 M.suis ppa重组蛋白的鉴定第31-32页
    3 试验结果第32-39页
        3.1 血细胞悬滴镜检结果第32页
        3.2 血液直接PCR结果第32-33页
        3.3 M.suisppa目的基因的扩增结果第33-34页
        3.4 pEasy-M.suis ppa重组质粒菌液PCR结果第34页
        3.5 pEasy-M.suis ppa重组质粒序列测定第34-35页
        3.6 双酶切鉴定第35页
        3.7 M.suis ppa重组蛋白的表达和条件优化第35-37页
        3.8 M.suis ppa重组蛋白的纯化结果第37-38页
        3.9 M.suis ppa重组蛋白的免疫印迹鉴定结果第38-39页
讨论第39-43页
    1 目的基因M.suis ppa的获得第39页
    2 原核表达载体的选择第39-40页
    3 M.suis ppa重组表达质粒的构建和鉴定第40页
    4 表达宿主菌的选择第40-41页
    5 最适表达条件的优化第41页
    6 M.suis ppa重组蛋白的纯化第41-43页
结论第43-44页
参考文献第44-48页
Abstract第48页
致谢第50页

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