英文缩略词表 | 第5-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-17页 |
1 猪嗜血支原体病原学研究 | 第9-11页 |
1.1 病原体分类 | 第9-10页 |
1.2 病原体形态结构 | 第10页 |
1.3 病原理化特性和生物活性 | 第10-11页 |
1.4 生活史和传播途径 | 第11页 |
2 猪嗜血支原体分子生物学研究 | 第11-13页 |
2.1 猪嗜血支原体全基因序列 | 第11页 |
2.2 猪嗜血支原体相关基因及蛋白研究 | 第11-13页 |
3 蛋白质原核表达技术简述 | 第13-16页 |
3.1 克隆载体 | 第14-15页 |
3.2 表达载体 | 第15页 |
3.3 外源基因 | 第15页 |
3.4 表达宿主菌 | 第15-16页 |
4 研究目的及意义 | 第16-17页 |
材料与方法 | 第17-39页 |
1 实验材料 | 第17-21页 |
1.1 病料来源 | 第17页 |
1.2 主要仪器及设备 | 第17-18页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
1.4 试剂配制 | 第19-21页 |
2 实验方法 | 第21-32页 |
2.1 病原体来源 | 第21页 |
2.2 M.suis阳性血液鉴定 | 第21-22页 |
2.3 M.suis基因组DNA提取 | 第22-23页 |
2.4 目的基因M.suis ppa PCR扩增与纯化 | 第23-24页 |
2.5 M.suis ppa基因克隆与鉴定 | 第24-26页 |
2.6 重组表达质粒的构建 | 第26-28页 |
2.7 M.suis ppa重组蛋白表达形式鉴定 | 第28-29页 |
2.8 诱导表达条件优化 | 第29-30页 |
2.9 表达产物的纯化 | 第30-31页 |
2.10 M.suis ppa重组蛋白的鉴定 | 第31-32页 |
3 试验结果 | 第32-39页 |
3.1 血细胞悬滴镜检结果 | 第32页 |
3.2 血液直接PCR结果 | 第32-33页 |
3.3 M.suisppa目的基因的扩增结果 | 第33-34页 |
3.4 pEasy-M.suis ppa重组质粒菌液PCR结果 | 第34页 |
3.5 pEasy-M.suis ppa重组质粒序列测定 | 第34-35页 |
3.6 双酶切鉴定 | 第35页 |
3.7 M.suis ppa重组蛋白的表达和条件优化 | 第35-37页 |
3.8 M.suis ppa重组蛋白的纯化结果 | 第37-38页 |
3.9 M.suis ppa重组蛋白的免疫印迹鉴定结果 | 第38-39页 |
讨论 | 第39-43页 |
1 目的基因M.suis ppa的获得 | 第39页 |
2 原核表达载体的选择 | 第39-40页 |
3 M.suis ppa重组表达质粒的构建和鉴定 | 第40页 |
4 表达宿主菌的选择 | 第40-41页 |
5 最适表达条件的优化 | 第41页 |
6 M.suis ppa重组蛋白的纯化 | 第41-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
Abstract | 第48页 |
致谢 | 第50页 |