| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 盐胁迫 | 第13-17页 |
| 1.1 盐胁迫对植物的危害 | 第13-15页 |
| 1.2 植物应对盐胁迫的耐受机制 | 第15-17页 |
| 2 干旱胁迫 | 第17-24页 |
| 2.1 干旱胁迫对植物的危害 | 第17-19页 |
| 2.2 植物耐旱机理 | 第19-24页 |
| 3 植物泛素/26S蛋白酶体途径及F-box蛋白的研究现状 | 第24-31页 |
| 3.1 植物泛素/26S蛋白酶体途径 | 第24-28页 |
| 3.2 F-box家族蛋白的研究现状 | 第28-31页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 拟南芥DIF1调节盐和干旱胁迫的反应 | 第33-67页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-37页 |
| 2.2 载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.3 拟南芥总DNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.4 拟南芥总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.5 基因组DNA的消解与cDNA的合成 | 第39-40页 |
| 2.6 PCR体系的建立 | 第40-41页 |
| 2.7 大肠杆菌(农杆菌)感受态的制备(CaCl_2法) | 第41页 |
| 2.8 目的片段的连接及转化 | 第41-42页 |
| 2.9 质粒的提取 | 第42页 |
| 2.10 农杆菌的转化 | 第42页 |
| 2.11 拟南芥侵染、筛选与DNA水平鉴定 | 第42-44页 |
| 2.12 35S::eGFP和35S::DIF1-eGFP转化洋葱表皮细胞(基因枪法) | 第44页 |
| 2.13 毕赤酵母感受态的制备、转化及鉴定 | 第44-45页 |
| 2.14 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳) | 第45-46页 |
| 2.16 生理指标的统计 | 第46页 |
| 2.17 伊文思蓝(Evans Blue)染色 | 第46页 |
| 2.18 转DIF1毕赤酵母耐盐性检测 | 第46-47页 |
| 2.19 钠钾含量的测定 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-64页 |
| 3.1 拟南芥DIF1的生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 3.2 DIF1在不同组织中的表达和DIF1蛋白的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| 3.3 非生物胁迫以及ABA处理下D/Fi的表达模式 | 第50-53页 |
| 3.4 35S::DIF1和dif1突变体植株的鉴定 | 第53-55页 |
| 3.5 拟南芥35S::DIF1和dif1对盐胁迫敏感性的鉴定 | 第55-59页 |
| 3.6 异源表达D/R/提高毕赤酵母的耐盐性 | 第59-60页 |
| 3.7 拟南芥35S::DIF1和dif1对干旱胁迫敏感性的鉴定 | 第60-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| 第三章 DIF1调节盐和干旱的胁迫反应依赖于ABA途径 | 第67-79页 |
| 1 前言 | 第67页 |
| 2 材料与方法 | 第67-69页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第67-68页 |
| 2.2 载体的构建 | 第68页 |
| 2.3 拟南芥总DNA的提取 | 第68页 |
| 2.4 拟南芥总RNA的提取 | 第68页 |
| 2.5 基因组DNA的消解和cDNA的合成 | 第68页 |
| 2.6 PCR反应体系的建立 | 第68页 |
| 2.7 大肠杆菌(农杆菌)感受态的制备(CaCl_2法) | 第68页 |
| 2.8 目的片段的连接与转化 | 第68页 |
| 2.9 质粒的提取 | 第68页 |
| 2.10 农杆菌转化 | 第68页 |
| 2.11 拟南芥侵染、筛选与DNA水平的鉴定 | 第68页 |
| 2.12 实时荧光定量PCR | 第68-69页 |
| 2.13 生理指标的统计 | 第69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-74页 |
| 3.1 DIF1参与ABA介导的盐和干旱胁迫的反应 | 第69-71页 |
| 3.2 DIF1调控ABA介导的气孔关闭 | 第71-72页 |
| 3.3 ABA和胁迫相关基因的表达 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-79页 |
| 4.1 DIF1参与盐和干旱胁迫的响应 | 第74-75页 |
| 4.2 DIF1调控依赖于ABA的盐和干旱胁迫反应 | 第75-76页 |
| 4.3 DIF1是ABA信号途径的负调控因子 | 第76-79页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选DIF1与LCR的互作蛋白 | 第79-93页 |
| 1 前言 | 第79-80页 |
| 2 材料与方法 | 第80-83页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第80-81页 |
| 2.2 载体的构建 | 第81页 |
| 2.3 PCR体系的建立 | 第81页 |
| 2.4 大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法) | 第81-82页 |
| 2.5 目的片段的连接与转化 | 第82页 |
| 2.6 质粒的提取 | 第82页 |
| 2.7 酵母感受态的制备及转化 | 第82-83页 |
| 2.8 拟南芥cDNA文库的筛选 | 第83页 |
| 2.9 酵母质粒的提取 | 第83页 |
| 2.10 文库质粒转化大肠杆菌及插入片段的鉴定 | 第83页 |
| 2.11 阳性候选克隆测序 | 第83页 |
| 2.12 候选基因的确定 | 第83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-90页 |
| 3.1 报告基因的自激活验证和毒性检测 | 第83-85页 |
| 3.2 拟南芥cDNA文库的筛选 | 第85-87页 |
| 3.3 库质粒转化大肠杆菌测序 | 第87页 |
| 3.5 DIF1及LCR候选互作蛋白的功能初步分析 | 第87-90页 |
| 4 讨论 | 第90-93页 |
| 全文小结 | 第93-95页 |
| 创新点 | 第95-97页 |
| 存在问题和工作展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-113页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
