| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| 1.1 抗生素概述 | 第8-10页 |
| 1.2 β-内酰胺抗生素 | 第10-11页 |
| 1.3 β-内酰胺酶 | 第11-14页 |
| 1.3.1 金属β-内酰胺酶 | 第12-14页 |
| 1.4 微量热技术(ITC)简介 | 第14-18页 |
| 1.4.1 微量热技术的原理及特点 | 第15-16页 |
| 1.4.2 等温滴定技术在生物学领域的应用 | 第16-18页 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 金属β-内酰胺酶的表达、纯化及表征 | 第20-38页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.2 实验材料及试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验所用溶液及其配制方法 | 第22-23页 |
| 2.3 实验部分 | 第23-29页 |
| 2.3.1 金属β-内酰胺酶(MβLs)的表达 | 第23-28页 |
| 2.3.2 Apo-MβLs的制备 | 第28页 |
| 2.3.3 MβLs的表征 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-37页 |
| 2.4.1 金属β-内酰胺酶的纯化及SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第29-36页 |
| 2.4.2 NDM-1的紫外表征及其活性测定 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 金属β-内酰胺酶与Zn(Ⅱ)离子键合的热动力学研究 | 第38-52页 |
| 3.1 研究背景 | 第38页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第38-39页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.3 实验内容 | 第39-40页 |
| 3.3.1 实验条件 | 第39页 |
| 3.3.2 数据处理 | 第39-40页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第40-49页 |
| 3.4.1 CcrA与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第40-41页 |
| 3.4.2 NDM-1与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第41-43页 |
| 3.4.3 VIM-2与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第43页 |
| 3.4.4 VIM-2与Co(Ⅱ)离子的作用 | 第43-45页 |
| 3.4.5 IMP-1与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第45-46页 |
| 3.4.6 ImiS与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第46-47页 |
| 3.4.7 L1与Zn(Ⅱ)离子的作用 | 第47-48页 |
| 3.4.8 MβLs活性位点的酶动力学评价 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小节 | 第49-52页 |
| 第四章 耐药细菌活菌体内MβLs活性的ITC实时监测与抑制 | 第52-62页 |
| 4.1 研究背景 | 第52页 |
| 4.2 实验仪器设备及所用材料 | 第52-53页 |
| 4.2.1 实验所用仪器设备 | 第52-53页 |
| 4.2.2 实验所用材料 | 第53页 |
| 4.3 实验部分 | 第53-55页 |
| 4.3.1 实验溶液的配制 | 第53页 |
| 4.3.2 产NDM-1细菌水解抗生素的ITC监测方法 | 第53-54页 |
| 4.3.3 产NDM-1工程菌抑制的ITC实时监测研究 | 第54页 |
| 4.3.4 产NDM-1临床菌抑制的ITC实时监测研究 | 第54页 |
| 4.3.5 头孢唑林对不同细菌敏感性的热力学表征 | 第54-55页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 4.4.1 产NDM-1大肠杆菌水解抗生素的实验结果与讨论 | 第55-56页 |
| 4.4.2 产NDM-1大肠杆菌水解头孢唑林的实验结果与讨论 | 第56-57页 |
| 4.4.3 产NDM-1工程菌水解头孢唑林被抑制的实验结果与讨论 | 第57-58页 |
| 4.4.4 产NDM-1临床菌水解头孢唑林抑制的ITC表征 | 第58-59页 |
| 4.4.5 头孢唑林对不同耐药细菌敏感性的ITC表征 | 第59-60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-62页 |
| 论文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读硕士学位期间取得科研成果 | 第74页 |
