| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-13页 |
| 材料与方法 | 第13-30页 |
| 1.实验材料 | 第13-15页 |
| 1.1 主要仪器与设备 | 第13页 |
| 1.2 主要试剂和材料 | 第13-14页 |
| 1.3 主要试剂配方 | 第14-15页 |
| 1.4 主要载体、宿主菌和细胞系 | 第15页 |
| 2.实验方法 | 第15-30页 |
| 2.1 杂交瘤细胞RNA提取 | 第15-16页 |
| 2.2 鼠源单克隆抗体亚型鉴定 | 第16页 |
| 2.3 RT-PCR | 第16-17页 |
| 2.4 重链及轻链可变区基因PCR | 第17页 |
| 2.5 核酸凝胶回收 | 第17-18页 |
| 2.6 PCR或双酶切产物清洁 | 第18页 |
| 2.7 TA克隆 | 第18-19页 |
| 2.8 转化 | 第19页 |
| 2.9 质粒小量抽取 | 第19-20页 |
| 2.10 高保真PCR扩增 | 第20页 |
| 2.11 双酶切反应 | 第20-21页 |
| 2.12 酶连反应 | 第21-22页 |
| 2.13 真核表达 | 第22页 |
| 2.14 Elisa检测 | 第22-23页 |
| 2.15 质粒中量抽取 | 第23-24页 |
| 2.16 抗体纯化 | 第24-25页 |
| 2.17 SOE-PCR | 第25-26页 |
| 2.18 流式细胞分析 | 第26-27页 |
| 2.19 混合淋巴反应 | 第27-30页 |
| 结果 | 第30-42页 |
| 1.PD1杂交瘤细胞RNA提取 | 第30页 |
| 2.PD1鼠单抗亚型鉴定 | 第30-31页 |
| 3.PD1鼠单抗重链和轻链可变区基因提取 | 第31-32页 |
| 4.PD1鼠嵌合抗体表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 5.PD1鼠嵌合抗体小量表达及活性检测 | 第33-34页 |
| 6.PD1鼠嵌合抗体大量表达与纯化 | 第34-35页 |
| 7.PD1人源化嵌合抗体表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 8.PD1人源化嵌合抗体小量表达及活性检测 | 第36-37页 |
| 9.PD1人源化嵌合抗体大量表达与纯化 | 第37-38页 |
| 10.PD1鼠嵌合抗体与PD1人源化嵌合抗体纯化后活性鉴定 | 第38-39页 |
| 11.PD1抗体细胞亲和力流式检测 | 第39-40页 |
| 12.混合淋巴反应测定PD1抗体活性 | 第40-42页 |
| 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 综述 Nivolumab和pembrolizumab在靶向PD1免疫治疗中的比较 | 第49-61页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-64页 |