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二硫键异构酶类蛋白在植物响应汞胁迫中的作用

目录第6-9页
致谢第9-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-13页
缩略词表第14-16页
第一章 文献综述第16-35页
    1.1 汞污染及其对植物生长发育的影响第16-24页
        1.1.1 重金属汞污染现状与来源第16-18页
        1.1.2 汞对植物生长发育的影响第18-20页
            1.1.2.1 汞对种子萌发和幼苗生长的影响第18页
            1.1.2.2 汞对植物细胞分裂的影响第18页
            1.1.2.3 汞对植物细胞膜透性及水分与离子代谢的影响第18-19页
            1.1.2.4 Hg对叶绿体结构与光合作用的影响第19-20页
            1.1.2.5 汞对线粒体结构与呼吸作用的影响第20页
        1.1.3 植物应对汞胁迫的抗性机制第20-23页
            1.1.3.1 脯氨酸积累第20-21页
            1.1.3.2 抗氧化系统的启动与动态平衡第21-23页
        1.1.4 外源物质在缓解植物汞毒害中的作用第23页
        1.1.5 基因工程技术在提高植物抗汞性能中的应用第23-24页
    1.2 蛋白质二硫键异构酶类蛋白的结构与功能第24-33页
        1.2.1 PDI的结构第25-26页
        1.2.2 PDI的种类第26-27页
        1.2.3 PDI的生物学功能第27-31页
            1.2.3.1 催化二硫键的形成和异构第27-29页
            1.2.3.2 分子伴侣活性第29-30页
            1.2.3.3 PDI的其它功能第30-31页
        1.2.4 植物中的PDI第31-33页
            1.2.4.1 拟南芥PDI类蛋白第31-32页
            1.2.4.2 玉米PDI类蛋白第32页
            1.2.4.3 甘薯PDI类蛋白第32-33页
            1.2.4.4 胡萝卜PDI类蛋白第33页
    1.3 研究思路第33-35页
第二章 水稻二硫键异构酶类蛋白的生物信息学分析及其在汞胁迫下表达的变化第35-50页
    2.1 材料与方法第35-38页
        2.1.1 试验材料第35页
        2.1.2 试验试剂第35页
        2.1.3 试验方法第35-38页
            2.1.3.1 生物信息学分析第35-36页
            2.1.3.2 水稻幼苗的培养与处理第36页
            2.1.3.3 水稻根总RNA的提取第36-37页
            2.1.3.4 实时荧光定量PCR(Real time quantity-PCR)检测水稻PDILs的表达第37-38页
    2.2 结果与分析第38-47页
        2.2.1 水稻二硫键异构酶类蛋白的生物信息学分析第38-46页
            2.2.1.1 水稻PDILs的基本信息与结构域第38-40页
            2.2.1.2 水稻PDILs的跨膜结构第40-42页
            2.2.1.3 水稻PDI基因的染色体定位第42-43页
            2.2.1.4 水稻PDI基因的表达分析第43-45页
            2.2.1.5 水稻PDI基因的MPSS数据第45-46页
        2.2.2 二硫键异构酶类蛋白在水稻响应汞胁迫时的表达变化第46-47页
    2.3 讨论第47-50页
第三章 嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶类基因在拟南芥中的转化及其功能分析第50-68页
    3.1 材料与方法第50-56页
        3.1.1 试验材料第50页
        3.1.2 试验试剂第50-51页
        3.1.3 试验方法第51-56页
            3.1.3.1 植物表达载体的构建第51-54页
            3.1.3.2 植物材料的培养第54页
            3.1.3.3 拟南芥花序法转化第54页
            3.1.3.4 转基因拟南芥的筛选和鉴定第54-55页
            3.1.3.5 转基因拟南芥的抗逆性研究第55页
            3.1.3.6 数据处理第55-56页
    3.2 结果与分析第56-65页
        3.2.1 植物表达载体p23-35S::MTH1745的构建第56-59页
        3.2.2 MTH1745在拟南芥中的转化与筛选第59-60页
        3.2.3 转基因拟南芥对氯化汞胁迫的响应第60-62页
        3.2.4 转基因拟南芥对其它逆境的响应第62-65页
            3.2.4.1 CdCl_2处理对野生型和转MTH1745基因拟南芥生长的影响第62页
            3.2.4.2 42℃预处理对野生型和转MTH1745基因拟南芥生长的影响第62-64页
            3.2.4.3 不同浓度NaCl处理对野生型和转MTH1745基因拟南芥生长的影响第64-65页
    3.3 讨论第65-68页
        3.3.1 MTH1745异源表达在提高植物抗重金属汞胁迫中的作用第66-67页
        3.3.2 MTH1745异源表达在提高植物抗其它逆境中的作用第67-68页
第四章 嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶类基因在水稻中的转化及其抗汞机理研究第68-92页
    4.1 材料与方法第68-74页
        4.1.1 试验材料第68页
        4.1.2 试验试剂第68页
        4.1.3 试验方法第68-74页
            4.1.3.1 植物表达载体的构建第68-69页
            4.1.3.2 MTH1745在水稻中的转化第69-70页
            4.1.3.3 转基因水稻植株的鉴定第70-71页
            4.1.3.4 转基因水稻对汞胁迫的响应第71页
            4.1.3.5 汞含量测定第71-72页
            4.1.3.6 光合参数测定第72页
            4.1.3.7 丙二醛(MDA)含量测定第72页
            4.1.3.8 超氧阴离子(O_2~(·-))产生速率和过氧化氢(H_2O_2)含量测定第72页
            4.1.3.9 抗氧化酶活性测定第72-73页
            4.1.3.10 非蛋白硫醇(NPT)含量测定第73-74页
            4.1.3.11 氧化型谷胱甘肽(GSSG)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定第74页
    4.2 结果第74-88页
        4.2.1 植物表达载体p13-35S::MTH1745的构建第74-76页
        4.2.2 农杆菌介导的遗传转化和植株再生第76-77页
        4.2.3 转基因水稻的筛选与鉴定第77-78页
        4.2.4 氯化汞胁迫对转基因水稻幼苗生长的影响第78-81页
        4.2.5 MTT1745对水稻Hg吸收和转运的影响第81页
        4.2.6 氯化汞胁迫对转基因和野生型水稻光合作用的影响第81-83页
        4.2.7 氯化汞胁迫对转基因和野生型水稻膜脂过氧化的影响第83-85页
        4.2.8 氯化汞胁迫对转基因和野生型水稻叶片抗氧化酶活性的影响第85-86页
        4.2.9 氯化汞胁迫对转基因和野生型水稻体内非酶抗氧化物含量的影响第86-88页
    4.3 讨论第88-92页
        4.3.1 MTH1745过表达对水稻光合作用及水分代谢的影响第89页
        4.3.2 MTH1745过表达对水稻膜脂过氧化和活性氧代谢的影响第89-91页
        4.3.3 MTH1745异源表达对水稻体内蛋白合成与变性的影响第91-92页
第五章 全文结论与展望第92-95页
    5.1 全文结论第92-93页
    5.2 创新之处第93-94页
    5.3 研究展望第94-95页
参考文献第95-109页
作者简历及攻读博士学位期间取得的科研成果第109页

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