摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
Abbreviations table | 第14-15页 |
1 引言 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-32页 |
2.1 材料 | 第17-21页 |
2.1.1 实验对象与受试物 | 第17页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第17-18页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第21-22页 |
2.2.2 细胞染毒及恶性转化细胞株的建立 | 第22页 |
2.2.3 软琼脂克隆形成实验 | 第22-23页 |
2.2.4 BEAS-2B细胞RNAi处理 | 第23-25页 |
2.2.5 RT-PCR分析 | 第25-27页 |
2.2.6 RT-PCR检测基因Rap2B、P38 和P65 的表达 | 第27页 |
2.2.7 Western blot检测Rap2B、P38 和P65 蛋白的表达 | 第27-30页 |
2.2.8 细胞划痕实验测定细胞迁移能力 | 第30页 |
2.2.9 MTT实验 | 第30页 |
2.2.10 流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 | 第30-31页 |
2.2.11 统计分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-47页 |
3.1 恶性转化细胞系的建立 | 第32-33页 |
3.1.1 细胞形态学观察 | 第32页 |
3.1.2 软琼脂克隆形成实验 | 第32-33页 |
3.2 Rap2B在恶性转BEAS-2B化细胞中的表达 | 第33-37页 |
3.2.1 细胞总RNA纯度及完整性测定结果 | 第33页 |
3.2.2 荧光定量PCR检测结果 | 第33-35页 |
3.2.3 Western Blot检测细胞蛋白结果 | 第35-37页 |
3.3 细胞转染效率测定的结果 | 第37-38页 |
3.3.1 细胞转染后荧光显微镜下观察结果 | 第37页 |
3.3.2 流式细胞仪检测细胞转染效率的结果 | 第37-38页 |
3.4 Rap2B基因干扰效率的检测结果 | 第38页 |
3.5 软琼脂克隆形成实验 | 第38-39页 |
3.6 细胞划痕实验 | 第39-41页 |
3.7 MTT法检测各组细胞增殖情况 | 第41-42页 |
3.8 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和周期情况 | 第42-43页 |
3.8.1 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第42页 |
3.8.2 流式细胞仪检测细胞周期 | 第42-43页 |
3.9 Rap2B基因干扰后对p38、p65 的影响 | 第43-47页 |
3.9.1 荧光定量PCR检测p38、p65 基因表达量结果 | 第43-45页 |
3.9.2 Western Blot检测细胞p38、p65 蛋白表达量 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-52页 |
4.1 BEAS-2B细胞恶性转化模型的建立 | 第48页 |
4.2 恶性转化BEAS-2B细胞Rap2B基因和蛋白的表达 | 第48页 |
4.3 干扰 Rap2B 基因后对细胞增殖和迁移能力的影响 | 第48-49页 |
4.4 干扰Rap2B基因后对细胞增殖和迁移能力的影响 | 第49-50页 |
4.5 Rap2B 基因干扰后对 p38、p65 基因和蛋白表达的影响 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
综述 Rap2B基因的研究现状 | 第57-70页 |
1.Rap2B基因与肺癌 | 第57-59页 |
2. Rap2B基因与MAPK通路 | 第59-61页 |
2.1 MAPK信号通路与肿瘤的关系 | 第60页 |
2.2 MAPK信号通路的基本组成 | 第60-61页 |
2.3 P38 转导通路与肿瘤的关系 | 第61页 |
3. Rap2B基因与NF-κB通路 | 第61-65页 |
3.1 NF-κB通路与肿瘤 | 第62-63页 |
3.2 NF-κB通路与恶性转化的关系 | 第63-64页 |
3.3 NF-κB通路对凋亡的影响 | 第64页 |
3.4 NF-κB通路对血管形成及转移的作用 | 第64-65页 |
4.结束语 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |