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RNAi沉默Rap2B基因对恶性转化BEAS-2B细胞的作用

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
Abbreviations table第14-15页
1 引言第15-17页
2 材料与方法第17-32页
    2.1 材料第17-21页
        2.1.1 实验对象与受试物第17页
        2.1.2 主要实验仪器第17-18页
        2.1.3 主要实验试剂第18-19页
        2.1.4 主要试剂配制第19-21页
    2.2 实验方法第21-32页
        2.2.1 细胞培养第21-22页
        2.2.2 细胞染毒及恶性转化细胞株的建立第22页
        2.2.3 软琼脂克隆形成实验第22-23页
        2.2.4 BEAS-2B细胞RNAi处理第23-25页
        2.2.5 RT-PCR分析第25-27页
        2.2.6 RT-PCR检测基因Rap2B、P38 和P65 的表达第27页
        2.2.7 Western blot检测Rap2B、P38 和P65 蛋白的表达第27-30页
        2.2.8 细胞划痕实验测定细胞迁移能力第30页
        2.2.9 MTT实验第30页
        2.2.10 流式细胞仪检测细胞周期和凋亡第30-31页
        2.2.11 统计分析第31-32页
3 结果第32-47页
    3.1 恶性转化细胞系的建立第32-33页
        3.1.1 细胞形态学观察第32页
        3.1.2 软琼脂克隆形成实验第32-33页
    3.2 Rap2B在恶性转BEAS-2B化细胞中的表达第33-37页
        3.2.1 细胞总RNA纯度及完整性测定结果第33页
        3.2.2 荧光定量PCR检测结果第33-35页
        3.2.3 Western Blot检测细胞蛋白结果第35-37页
    3.3 细胞转染效率测定的结果第37-38页
        3.3.1 细胞转染后荧光显微镜下观察结果第37页
        3.3.2 流式细胞仪检测细胞转染效率的结果第37-38页
    3.4 Rap2B基因干扰效率的检测结果第38页
    3.5 软琼脂克隆形成实验第38-39页
    3.6 细胞划痕实验第39-41页
    3.7 MTT法检测各组细胞增殖情况第41-42页
    3.8 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和周期情况第42-43页
        3.8.1 流式细胞仪检测细胞凋亡第42页
        3.8.2 流式细胞仪检测细胞周期第42-43页
    3.9 Rap2B基因干扰后对p38、p65 的影响第43-47页
        3.9.1 荧光定量PCR检测p38、p65 基因表达量结果第43-45页
        3.9.2 Western Blot检测细胞p38、p65 蛋白表达量第45-47页
4 讨论第47-52页
    4.1 BEAS-2B细胞恶性转化模型的建立第48页
    4.2 恶性转化BEAS-2B细胞Rap2B基因和蛋白的表达第48页
    4.3 干扰 Rap2B 基因后对细胞增殖和迁移能力的影响第48-49页
    4.4 干扰Rap2B基因后对细胞增殖和迁移能力的影响第49-50页
    4.5 Rap2B 基因干扰后对 p38、p65 基因和蛋白表达的影响第50-52页
5 结论第52-53页
参考文献第53-57页
综述 Rap2B基因的研究现状第57-70页
    1.Rap2B基因与肺癌第57-59页
    2. Rap2B基因与MAPK通路第59-61页
        2.1 MAPK信号通路与肿瘤的关系第60页
        2.2 MAPK信号通路的基本组成第60-61页
        2.3 P38 转导通路与肿瘤的关系第61页
    3. Rap2B基因与NF-κB通路第61-65页
        3.1 NF-κB通路与肿瘤第62-63页
        3.2 NF-κB通路与恶性转化的关系第63-64页
        3.3 NF-κB通路对凋亡的影响第64页
        3.4 NF-κB通路对血管形成及转移的作用第64-65页
    4.结束语第65-66页
    参考文献第66-70页
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果第70-71页
致谢第71页

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