| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验细胞和培养方法 | 第14页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第14-16页 |
| 2.2 主要实验设备 | 第16-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-30页 |
| 2.3.1 HCT116 和HT-29 结肠癌细胞株的培养 | 第17-18页 |
| 2.3.2 miR-320 mimics和miR-320 inhibitor转染结肠癌细胞 | 第18页 |
| 2.3.3 荧光显微镜观察结肠癌细胞转染效率 | 第18页 |
| 2.3.4 real-time PCR检测结肠癌细胞miR-320 表达 | 第18-20页 |
| 2.3.5 MTT法检测细胞增值 | 第20页 |
| 2.3.6 平板克隆形成试验 | 第20-21页 |
| 2.3.7 流式细胞仪检测细胞周期 | 第21页 |
| 2.3.8 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第21页 |
| 2.3.9 Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力 | 第21-22页 |
| 2.3.10 MTT法检测结肠癌化疗敏感性 | 第22-23页 |
| 2.3.11 MTT法检测结肠癌放疗敏感性 | 第23页 |
| 2.3.12 生物信息学预测miR-320 靶基因 | 第23-25页 |
| 2.3.13 双荧光素酶报告基因试验 | 第25-28页 |
| 2.3.14 实时定量PCR检测转染后结肠癌细胞基因m RNA表达量 | 第28页 |
| 2.3.15 Western blot检测转染后结肠癌细胞基因蛋白表达量 | 第28-30页 |
| 2.4 统计学处理 | 第30-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-42页 |
| 3.1 荧光显微镜观察结肠癌细胞转染效率 | 第31页 |
| 3.2 实时定量PCR验证转染效率 | 第31-32页 |
| 3.3 miR-320 对结肠癌细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.1 MTT法检测细胞生长曲线 | 第32-33页 |
| 3.3.2 克隆形成试验 | 第33页 |
| 3.4. miR-320 对结肠癌细胞周期及细胞凋亡的影响 | 第33-35页 |
| 3.4.1 PI单染法检测细胞周期 | 第33-34页 |
| 3.4.2 Annexin V-FITC /PI双染法检测细胞凋亡 | 第34-35页 |
| 3.5. miR-320 对结肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.6. miR-320 增加结肠癌细胞对 5-FU及奥沙利铂的敏感性 | 第36-38页 |
| 3.7.miR-320 增加结肠癌细胞对放疗的敏感性 | 第38页 |
| 3.8.双荧光素酶报告系统的建立及FOXM1 为miR-320 靶基因的验证 | 第38-42页 |
| 3.8.1 FOXM13’UTR双荧光素酶报告基因建立 | 第38-39页 |
| 3.8.2 荧光素酶活性检测验证FOXM1 为miR-320 靶基因 | 第39-40页 |
| 3.8.3 实时定量PCR检测HCT116 及HT-29 细胞中FOXM1 表达情况30 | 第40页 |
| 3.8.4 Western blot检测HCT116 及HT-29 细胞中FOXM1 及Wnt通路蛋白表达情况 | 第40-42页 |
| 第4章 讨论 | 第42-47页 |
| 第5章 结论及展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 综述 | 第54-62页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 附件 | 第62页 |
